一种构建荧光寡核苷酸标准曲线的方法以及试剂盒技术

技术编号:37190285 阅读:25 留言:0更新日期:2023-04-20 22:51
本申请公开了一种构建荧光寡核苷酸标准曲线的方法以及试剂盒。本申请中,所述方法包括步骤一:使用氨的水溶液配制所述荧光寡核苷酸的标准溶液。本发明专利技术的实施方式提供的构建荧光寡核苷酸标准曲线的方法,构建的荧光寡核苷酸标准曲线线性良好,可用于测量响应值极低的TaqMan探针本底荧光强度。TaqMan探针本底荧光强度。

【技术实现步骤摘要】
一种构建荧光寡核苷酸标准曲线的方法以及试剂盒


[0001]本专利技术实施例涉及分析检测领域,特别涉及一种构建荧光寡核苷酸标准曲线的方法以及试剂盒。

技术介绍

[0002]实时荧光定量PCR(聚合酶链式反应)技术是一种在PCR反应体系中加入荧光报告基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术不仅实现了对DNA 模板的定量,而且具有灵敏度高、特异性和可靠性更强、能实现多重反应、自动化程度高、无污染性、具实时性和准确性等特点,目前已广泛应用于分子生物学研究和医学研究等领域。
[0003]实时荧光定量PCR常用的检测模式有TaqMan探针和SYBR Green I检测模式,TaqMan探针由于可以实现多重检测及特异性强的特点,更广泛的应用在该项技术中。TaqMan探针5端标记一个荧光报告基团,3端标记一个荧光淬灭基团。当探针完整时,报告基团发出的荧光被淬灭基团所吸收而发生荧光共振能量转移(FRET),此时检测不到该探针5端荧光报告基团发出的荧光。在PCR扩增过程中,由于Taq酶的5
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种构建荧光寡核苷酸标准曲线的方法,其特征在于,所述方法包括步骤一:使用氨的水溶液配制所述荧光寡核苷酸的标准溶液。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤一之后还包括步骤二:测定步骤一所得所述荧光寡核苷酸的标准溶液的本底荧光强度。3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤二之后还包括步骤三:根据所述荧光寡核苷酸的标准溶液的浓度和步骤二所得所述荧光寡核苷酸的标准溶液的本底荧光强度构建标准曲线。4.根据权利要求1~3中任一项所述的方法,其特征在于,所述氨的水溶液中氨的质量百分含量为0.008~0.012%。5.根据权利要求1~3中任一项所述的方法,其特征在于,所述荧光寡核苷酸标准溶液浓度范围为1~10pmol/μL。6.根据权利要求1~3中任一项所述的方法,其特征在于,至少配置三个所述荧光寡核苷酸标准溶液。7.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员:蒋析文兰诗龙黎培凤何玲
申请(专利权)人:广州达安基因股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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