新冠病毒抗原检测试剂盒及其制备方法、应用技术

本发明专利技术属于体外诊断试剂领域，具体涉及新冠抗原检测试剂盒及其制备方法、应用。通过磁性金微球标记新冠病毒N蛋白抗体，配合免疫层析技术，实现了对新冠抗原的定性，定量检测，使用磁性金微球代替胶体金等传统标记物，使得检测信号转变成了三维模式，信号的利用率大大提高。本发明专利技术中将新冠抗原N蛋白抗体结合到磁珠上，形成磁性金微球标记新冠病毒N蛋白抗体，具有磁响应性，在磁力作用下，该微球发生力学移动，从而达到分离抗原的目的。从而达到分离抗原的目的。从而达到分离抗原的目的。

【技术实现步骤摘要】
新冠病毒抗原检测试剂盒及其制备方法、应用


[0001]本专利技术属于体外诊断试剂领域，具体涉及新冠病毒抗原检测试剂盒及其制备方法、应用。

技术介绍

[0002]胶体金免疫层析法(GICA)快速检测具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、检测时间短等特点，一般10分钟就能肉眼观察结果，而且操作简单，无需任何设备，特别适合现场的样品筛选。
[0003]由于胶体金的自身性质限制，GICA的检测结果只能存在有限的时间，对于结果的长期保存是不利的。而且GICA在硝酸纤维素膜中信号的呈现形式是二维模式，依靠观察色度来判定结果，信号直接在硝酸纤维素膜表面以颜色的形式呈现结果。而硝酸纤维素膜是个三维结构，这样，有一部分信号是无法检测到的，这样，限制了GICA用于定量检测。
[0004]磁微粒是近年来在受到广泛关注的标记材料。生物体系内极少出现具有磁性的物质，故而以磁性复合粒子作为标记物用于免疫层析的背景干扰极小，从提高灵敏度和定量分析角度看十分理想。
[0005]但太小的磁微粒无法提供足够的信号用于定量检测，而过大的磁珠会面临易团聚，尤其是在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.新冠病毒抗原检测试剂盒，其特征在于，包括试纸条和样品提取液，所述试纸条包括样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸，所述样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸沿层析方向依次搭接；所述结合垫吸附有磁性金微球标记的新冠病毒N蛋白抗体；所述NC膜沿样品流动方向依次设有喷涂新冠病毒N蛋白抗体构成的T线、喷涂兔抗鼠IgG构成的C线；所述磁性金微球标记的新冠病毒N蛋白抗体的制备方法包括以下步骤：(1)水热法合成粒径为180nm～220nm的Fe3O4纳米颗粒，将Fe3O4纳米颗粒用CTAB溶液处理，得到水溶性Fe3O4纳米颗粒；(2)水溶性Fe3O4纳米颗粒分散于水中，加入Au
3+
溶液，加入NH2OH将Au
3+
还原为金原子，洗涤，得到磁性金微球；(3)磁性金微球用缓冲液溶解至2mg/ml，加入1.5mg/mL碳二亚胺和1.5mg/mL N
‑
羟基琥珀酰亚胺并快速混匀，在20～30℃孵育10～20min；(4)将步骤(3)孵育后的溶液离心，去上清，加入50％(体积)Tris缓冲液重悬，按质量比，新冠病毒N蛋白抗体：磁性金微球＝1:10，加入新冠病毒N蛋白抗体，混匀，并25℃孵育4～6h；(5)加入1％(质量)BSA在20～30℃下封闭1～1.5h；(6)离心20～30min，去除未结合的抗体和BSA，得到磁性金微球标记的新冠病毒N蛋白抗体。2.如权利要求1所述的新冠病毒抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：寇增强，刘兴佳，胡晓飞，董雯，
申请(专利权)人：山东博科生物产业有限公司，
类型：发明
国别省市：