用于检测EGFR的探针、试剂盒和缺失突变分析方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测EGFR的探针、试剂盒和缺失突变分析方法，用于检测EGFR的探针包括一条针对缺失区域之外的侧翼序列的探针，序列为SEQ ID NO：1；以及一条或多条针对缺失区域野生序列的探针，序列为SEQ ID NO:2。试剂盒还包括引物，所述引物包括EGFR缺失侧翼正向引物，序列为SEQ ID NO：3；以及EGFR缺失侧翼反向引物，序列为SEQ ID NO：4。缺失突变分析方法采用所述的探针针对多种缺失突变，通过比较不同针对野生序列的探针扩增曲线的Ct值，达到了对突变模板有无以及多少的相对定量分析，从而在分析EGFR缺失突变含量较少的游离核酸时，具有一定实用价值。有一定实用价值。

【技术实现步骤摘要】
用于检测EGFR的探针、试剂盒和缺失突变分析方法


[0001]本专利技术涉及分子生物
，具体涉及用于检测EGFR的探针、试剂盒和缺失突变分析方法。

技术介绍

[0002]EGFR基因突变与肺癌发生密切相关。其中EGFR外显子19上的缺失突变高达三十种之多，其中包括18碱基缺失和15碱基缺失发生频率很高，既是肺癌的致癌突变，也是肺癌靶向治疗的靶点。
[0003]对含有EGFR突变的肺癌的癌组织和晚期癌症患者的血液标本，因为EGFR突变基因拷贝数较高，常规PCR技术和二代测序技术，可以检测到相应突变。然而，对于肿瘤早期诊断和早期筛查，以及手术后的复发监控等，血中游离核酸突变基因含量极少，常规技术难以检测。
[0004]因此，对血中突变基因进行富集，选择性扩增突变基因，具有实际应用价值。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，为解决上述技术问题，本专利技术的目的在于提出一种用于检测EGFR的探针、试剂盒和缺失突变分析方法，本专利技术的EGFR缺失突变富集技术，在分析EGFR缺失突变含量较稀少的游离核酸时，具有一定实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测EGFR的探针，其特征在于，包括一条针对缺失区域之外的侧翼序列的探针，序列为SEQ ID NO：1；以及一条或多条针对缺失区域野生序列的探针，序列为SEQ ID NO:2。2.一种用于检测EGFR的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的探针，还包括引物，所述引物包括EGFR缺失侧翼正向引物，序列为SEQ ID NO：3；以及EGFR缺失侧翼反向引物，序列为SEQ ID NO：4。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括限制性内切酶。4.一种EGFR缺失突变分析方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.PCR扩增前和PCR扩增过程中结合针对EGFR野生序列的限制性内切酶消化；S2.荧光PCR对突变相对定性与定量分析时采用且仅采用针对野生序列的探针，所述探针为权利要求1所述的探针。5.根据权利要求4所述的EGFR缺失突变分析方法，其特征在于，还包括S3.当PCR扩增与选择性富集缺失突变片段后，针对缺失区域之外的探针定量PCR扩增的所有产物，包括野生序列产物和缺失突变产物；而针对缺失区域的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李凯，刘李登，齐捧，曾亚玲，肖莉，廖端芳，
申请(专利权)人：珠海艾莱博科技有限公司，
类型：发明
国别省市：