一种利用探针溶解曲线法检测MGMT启动子甲基化的引物探针组、试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种利用探针溶解曲线法检测MGMT启动子甲基化的引物探针组、试剂盒及其应用。本发明专利技术利用探针熔解曲线方法，以亚硫酸氢盐处理后的核酸为模板，以探针覆盖范围内的CpG位点均发生甲基化设计探针，并在引物中加入兼并碱基，共计2条引物和3条探针。本发明专利技术所筛选出的位点和MGMT表达水平相关度高，利用探针熔解曲线的方法开发出的MGMT启动子甲基化检测体系只需要1管qPCR反应就可以检测出8个CpG位点是否甲基化；1个CpG位点或者多个位点同时甲基化均可以检出，解决了目前常规qPCR方法无法实现的技术难题。解决了目前常规qPCR方法无法实现的技术难题。解决了目前常规qPCR方法无法实现的技术难题。

【技术实现步骤摘要】
一种利用探针溶解曲线法检测MGMT启动子甲基化的引物探针组、试剂盒及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种利用探针溶解曲线法检测MGMT启动子甲基化的引物探针组、试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]脑胶质瘤（Glioblastoma，GBM）是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，其发病率约占颅内肿瘤的44%，是导致死亡的重要肿瘤类型之一。替莫唑胺（Temozolomide, TMZ）化疗目前是GBM的一线标准治疗方案。有研究表明， MGMT 基因启动子甲基化状态是预测TMZ对患者是否敏感的重要检测指标。另外， MGMT 基因启动子甲基化的病人的生存时间明显长于非甲基化患者，提示 MGMT 基因启动子甲基化引起的 MGMT 基因沉默是胶质母细胞瘤化疗效果好的因素之一。
[0003]MGMT全称O6
‑
甲基鸟嘌呤 DNA甲基转移酶 (O6
‑
methylguanine
‑
DNA methyltransferase)，是唯一能将O6鸟嘌呤复合物从DNA上移除的蛋白，可保本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用探针溶解曲线法检测MGMT启动子甲基化的引物探针组，其特征在于，具体序列如下：MGMT上游引物：5
’
GYGTTTYGGATATGTTGGGATAG3
’
；MGMT下游引物：5'CAAACCCRAAAAAAAACTAAACAA3'；MGMT
‑
P1：FAM
‑
5'GTTTAACGTCGAAACGCAAAACGTTCTAAAAAC3'
‑
BHQ1；MGMT
‑
P2：VIC
‑
5'CACTCTCACCAAATCGCAAACGATACGCACC3'
‑
BHQ1；MGMT
‑
P3：ROX
‑
5'AAGATCCCgAAAAAAAACTCCgCACTCTT3'
‑
BHQ2。2.根据权利要求1所述的引物探针组，其特征在于，所述MGMT
‑
P1覆盖75、76、77三个CpG位点；所述MGMT
‑
P2覆盖82、83、84三个CpG位点；所述MGMT
‑
P3覆盖88、89两个CpG位点。3.一种含有权利要求1或2所述的引物探针组的试剂盒，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨海星，张茜茜，绳红丹，于强，苗金明，许晓丹，王晓林，张亮，
申请(专利权)人：银丰生物工程集团有限公司，
类型：发明
国别省市：