一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型及其评价方法技术

本发明专利技术涉及实验动物模型技术领域，公开了一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型，该模型实现方法包括以下步骤：S1、选材分组；S2、模型复制；S3、模型评价；S4、指标检测；S5、统计学处理；S6、模型验证。本发明专利技术通过给予模型大鼠高脂低蛋白饲料，每日负重后放于自制泳池中游泳至力竭，6周后评估模型；该造模方法并未直接对大鼠肺脏造成损伤，且其导致脾气虚过程十分缓和，复合虚证病程绵延的发病特征，同时脾气虚为先，肺气虚为后，符合肺脾气虚证中医证候形成的基本机制；该方法建立肺脾气虚证动物模型，病因病机准确，且无创、稳定、易于评价，拓宽了原造模方法的应用范畴，对陪土生金治法的机制研究奠定基础。金治法的机制研究奠定基础。

【技术实现步骤摘要】
一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型及其评价方法


[0001]本专利技术涉及实验动物模型
，具体是一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型及其评价方法。

技术介绍

[0002]“母病及子”是中医理论中的一种不正常的相生现象，表现为母脏遭到破坏后不能正常滋养子脏，导致子脏功能异常的一种病理现象，如脾属土，肺属金，土生金，则脾为母，肺为子；脾虚导致肺虚，最终肺脾气虚则为“母病及子”。
[0003]目前对于中医肺脾气虚复合证候模型大多停留在脾气虚症状和肺气虚症状的堆叠而非从证候真正发病机制的角度出发：由脾虚引起的肺虚，肺脾气虚证动物模型造模的主要方法如下：(1)烟熏配合番泻叶法：先采用烟熏法导致大鼠出现肺气虚症状，或应用脂多糖气管滴入导致肺脏受损，后应用番泻叶冷服泻下法建立脾气虚模型；(2)疲劳结合饮食失节加烟熏法：每日使大鼠游泳力竭并单日以白菜喂养双日以猪油脂灌胃建立脾虚模型，之后烟熏建立肺气虚模型；(3)烟熏加脂多糖法配合番泻叶法：分别在建模第1天和第15天向大鼠气管内滴注脂多糖；建模第2～13天和第15～40天将大鼠置于烟熏箱中被动吸烟0.5h，每日2次，每次间隔4h；自建模第20天起，取番泻叶沸水浸泡后，置于4℃预冷制备大鼠肺脾气虚泻下模型；(4)脂多糖加烟熏配合大黄水煎液灌胃法：造模开始的第1天、第14天进行气管切开滴注脂多糖；第2～13天、第15～28天，在自制的有机玻璃箱中持续吸入香烟烟雾每日2次，每次半小时，造模第7天起用大黄水煎液灌胃，共8天。
[0004]这些造模法，虽然也可以产生肺脾气虚症状，但脾气虚和肺气虚分别造模的方法导致的脏器损伤是相对孤立的，并无病机上的延续性和相关性；同时烟熏和脂蛋白气管滴入本来属于邪气外侵，早期多属于实证，即便延长造模时间，也是因实致虚，最终表现为虚实夹杂，且脂蛋白滴入法本身存在有创手术，动物的创伤导致其造模的不确定性和复杂性，对于研究中药方剂补法中的陪土生金治法并不准确对应病因病机。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型及其评价方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0007]一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型，该模型实现方法包括以下步骤：
[0008]S1、选材分组：取若干只SPF级Wistar大鼠，其中雌雄各半，将大鼠饲养于IVC独立送回风净化笼中，适应性饲养3天，观察大鼠状况良好、无异常后，运用大鼠尾部自动标号仪进行编号并称重，然后按照大鼠体重因素，应用Excel生成随机数字的方法进行分组，分为空白组和模型组；
[0009]S2、模型复制：从实验第4d开始，给空白组投食AIN
‑
76A纯化饲料，模型组投食高脂低蛋白饲料，两组均自由饮水进食，模型组从第4d开始，每日下午尾部以30％体重负重，放于自制泳池中游泳，使大鼠不能触及圆筒底部，以大鼠入水到游至力竭即鼻尖没入水中 10s时停止；造模时间为6周，实验开始后第14d即进行一般状况指标的观察，实验第45d 开始进行造模情况评估；
[0010]S3、模型评价：对肺脾气虚证动物模型进行评价，并建立一般状况评价标准；
[0011]S4、指标检测：检测大鼠的各项指标，包括一般状况观察、体重、旷场实验、代谢笼、尿D木糖、肺功能、血清学指标；
[0012]S5、统计学处理：应用专业数据统计软件及R语言对数据进行统计，用均数
±
标准偏差进行表示，用t检验进行连续变量组间的比较，P＜0.05有统计学意义；
[0013]S6、模型验证：通过肺脾气虚证动物模型回归方程验证肺脾气虚模型是否复制成功。
[0014]作为本专利技术再进一步的方案：所述S1步骤中大鼠的年龄为4周龄，体重为105
±
10g。
[0015]作为本专利技术再进一步的方案：所述S2步骤中的AIN
‑
76A纯化饲料按照质量比成分中包含0.2％氯化胆碱、0.3％蛋氨酸、5％纤维素、20％酪蛋白和1％多维；高脂低蛋白饲料在 AIN
‑
76A纯化饲料的基础上减少酪蛋白含量，增加猪油和胆固醇配制而成，高脂低蛋白饲料按照质量比成分中包含0.2％氯化胆碱、15％猪油和0.5％胆固醇。
[0016]作为本专利技术再进一步的方案：所述S4步骤中制泳池的水温为25
±
2℃，水深30cm。
[0017]作为本专利技术再进一步的方案：所述S3步骤中大鼠的一般状况评价标准的建立以中医基本理论为指导，根据肺脾气虚证的临床表现，拟定大鼠肺脾气虚模型宏观体征诊断标准和客观测量指标；再综合宏观和客观指标，制定出肺脾气虚证大鼠模型评价标准。
[0018]一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型的评价方法，包括以下步骤：
[0019]S11、模拟中医临床诊断中将得到的所有信息进行综合评判的思维方法，将大鼠模型所有症状、体征及检测结果组成评价因素论域，综合评判每只大鼠模型复制状况，确定造模成功与否；
[0020]S12、设Z为大鼠肺脾气虚模型评价因素的论域，由造模后大鼠的一般状况和检测指标构成肺脾气虚模型评价因素论域，即：Z＝{形体消瘦、眯眼闭目、被毛枯黄、爪色苍白、便质软溏、自主活动减少、体重下降、食量减少、尿D木糖排泄率降低、潮气量下降、血清白蛋白下降、血清胆固醇升高、血清胃泌素减少}。
[0021]与现有技术相比，本专利技术的有益效果：
[0022]本专利技术通过给予模型大鼠高脂低蛋白饲料，每日负重后放于自制泳池中游泳至力竭，6周后评估模型；该造模方法并未直接对大鼠肺脏造成损伤，且其导致脾气虚过程十分缓和，复合虚证病程绵延的发病特征，同时脾气虚为先，肺气虚为后，符合肺脾气虚证中医证候形成的基本机制；该方法建立肺脾气虚证动物模型，病因病机准确，且无创、稳定、易于评价，拓宽了原造模方法的应用范畴，对陪土生金治法的机制研究奠定基础。
具体实施方式
[0023]本专利技术实施例中，一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型，该模型实现方法包括以下步骤：
[0024]S1、选材分组：取若干只SPF级Wistar大鼠，其中雌雄各半，将大鼠饲养于IVC独立送回风净化笼中，适应性饲养3天，观察大鼠状况良好、无异常后，运用大鼠尾部自动标号仪进行编号并称重，然后按照大鼠体重因素，应用Excel生成随机数字的方法进行分组，分为空白组和模型组；
[0025]S2、模型复制：从实验第4d开始，给空白组投食AIN
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76A纯化饲料，模型组投食高脂低蛋白饲料，两组均自由饮水进食，模型组从第4d开始，每日下午尾部以30％体重负重，放于自制泳池中游泳，使大鼠不能触及圆筒底部，以大鼠入水到游至力竭即鼻尖没入水中10s时停止；造模时间为6周，实验开始后第14d即进行一般状况指标的观察，实验第45d开始进行造模情况评估；<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型，其特征在于，该模型实现方法包括以下步骤：S1、选材分组：取若干只SPF级Wistar大鼠，其中雌雄各半，将大鼠饲养于IVC独立送回风净化笼中，适应性饲养3天，观察大鼠状况良好、无异常后，运用大鼠尾部自动标号仪进行编号并称重，然后按照大鼠体重因素，应用Excel生成随机数字的方法进行分组，分为空白组和模型组；S2、模型复制：从实验第4d开始，给空白组投食AIN
‑
76A纯化饲料，模型组投食高脂低蛋白饲料，两组均自由饮水进食，模型组从第4d开始，每日下午尾部以30％体重负重，放于自制泳池中游泳，使大鼠不能触及圆筒底部，以大鼠入水到游至力竭即鼻尖没入水中10s时停止；造模时间为6周，实验开始后第14d即进行一般状况指标的观察，实验第45d开始进行造模情况评估；S3、模型评价：对肺脾气虚证动物模型进行评价，并建立一般状况评价标准；S4、指标检测：检测大鼠的各项指标，包括一般状况观察、体重、旷场实验、代谢笼、尿D木糖、肺功能、血清学指标；S5、统计学处理：应用专业数据统计软件及R语言对数据进行统计，用均数
±
标准偏差进行表示，用t检验进行连续变量组间的比较，P＜0.05有统计学意义；S6、模型验证：通过肺脾气虚证动物模型回归方程验证肺脾气虚模型是否复制成功。2.根据权利要求1所述的一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚证动物模型，其特征在于，所述S1步骤中大鼠的年龄为4周龄，体重为105
±
10g。3.根据权利要求1所述的一种基于“母病及子”理论建立的肺脾气虚...

【专利技术属性】
技术研发人员：修方睿，王世军，于华芸，吴智春，赵海军，王媛，张亚楠，赵文晓，韩晓春，马柯，王花欣，王彤，高祖，罗光芝，
申请(专利权)人：山东中医药大学附属医院，
类型：发明
国别省市：