一种利那洛肽的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种利那洛肽的制备方法。本发明专利技术采用固相液相结合的方法，通过完全选择性氧化精准构建利那洛肽的三对二硫键，且操作过程中不需要过多的纯化步骤，不但提高了反应总产率，且极大降低了利那洛肽二硫键错配现象的发生，引入的光保护基团符合当下绿色化学的发展理念，原料价格低廉易得，能有效降低物料成本，有利于工业化大规模生产。有利于工业化大规模生产。有利于工业化大规模生产。

【技术实现步骤摘要】
一种利那洛肽的制备方法


[0001]本专利技术属于多肽合成
，具体涉及一种利那洛肽的制备方法。

技术介绍

[0002]利那洛肽的氨基酸序列及其S
‑
S连接方式如图1所示，其结构式如下：
[0003][0004]利那洛肽于(linaclotide)2012年8月30日获美国FDA批准上市，商品名为Linzess，2019年于中国上市，成为中国第一个上市的口服肠上皮细胞鸟苷酸环化酶C(GC
‑
C)激动剂，用于治疗成人便秘肠易激综合征(IBS
‑
C)和慢性特发性便秘(CIC)。利那洛肽由十四个氨基酸组成，分子式为C
59
H
79
N
15
O
21
S6，相对分子质量为1526.8，含有三对二硫键(Cys1
‑
Cys6、Cys2
‑
Cys10、Cys5
‑
Cys13)。
[0005]目前，利那洛肽的合成方法分为以下几种方法，一是自由氧化方法，如专利CN201本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利那洛肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：以Fmoc
‑
Tyr(tBu)
‑
Wang Resin树脂或Fmoc
‑
Tyr(tBu)
‑
CTC Resin树脂为固相载体，采用Fmoc固相合成法合成具有如式I或式II所示氨基酸序列的利那洛肽线性前体树脂：S2：用1～5％TFA/DCM溶液脱除利那洛肽线性前体树脂第1和6位Cys上的Mmt保护基；然后将脱Mmt保护基后的树脂与NCS按100:5～15的质量比投入反应器中，室温反应1～2h，然后用甲醇收缩30min，构建第一对二硫键Cys(1
‑
6)；S3：用裂解液对经过S2处理后的树脂进行裂解，再纯化，得到Cys(2
‑
10)侧链巯基裸露、Cys(5
‑
13)侧链巯基受到NBn保护的利那洛肽前体1；所述裂解液为1～5％裂解剂/TFA溶液，所述裂解剂为苯甲醚、苯甲硫醚、乙二硫醇、巯基乙醇、苯酚、水和TRIPS中的至少一种；S4：将利那洛肽前体1分散于pH为7～8的溶液中，加入5～15eq的氧化剂，室温氧化1～3h，构建第二对二硫键Cys(2
‑
10)，得到含有两对二硫键Cys(1
‑
6)和Cys(2
‑
10)的利那洛肽前体2；所述氧化剂为DSF、双氧水、50M碳酸氢铵和NCS中的至少一种；S5：将利那洛肽前体2在波长为350～380nm的紫外光下照射5～120min，脱除第5和13位Cys上的NBn保护基；然后以DSF为氧化剂氧化1～3h，形成第三对二硫键Cys(5
‑
13)；再经HPLC纯化得到利那洛肽。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述利那洛肽线性前体树脂的合成包括以下步骤：SS1：将取代度为0.1～1mmol/g的Fmoc
‑
Tyr(tBu)
‑
Wang Resin树脂或取代度为0.1～1mmol/g的Fmoc
‑
Tyr(tBu)
‑
CTC Resin树脂分散于DCM溶液中，溶胀15～25min，然后用DCM和DMF各冲洗两次，得预处理后的Fmoc
‑
Tyr(tBu)
‑
Wang Resin树脂或Fmoc
‑
Tyr(tBu)
‑
CTC Resin树脂；SS2：将预处理后的Fmoc
‑
Tyr(tBu)
‑
Wang Resin树脂或Fmoc
‑
Tyr(tBu)
‑
CTC Resin树脂浸没于20％PIP/DMF(体积百分比)溶液中，室温下反应2min；然后更换新的20％PIP/DMF溶液，继续反应5min，得脱除Fmoc保护基的树脂；SS3：将脱除Fmoc保护基的树脂、Fmoc
‑
C...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁兴勇，邱中豪，程纯儒，刘安林，丁新刚，周豪，庄翔麟，
申请(专利权)人：四川轻化工大学，
类型：发明
国别省市：