冬青素A作为ACSS2核转位抑制剂的应用制造技术

本发明专利技术提供一种冬青素A作为ACSS2核转位抑制剂的应用，本发明专利技术揭示了冬青素A是一种ACSS2核转位的抑制剂。以冬青素A为活性成分，制备基于抑制ACSS2核转位为目标的药物，治疗ACSS2入核导致的相关疾病，包括肝内脂肪蓄积的疾病及并发症为肝内脂肪蓄积的疾病。的疾病及并发症为肝内脂肪蓄积的疾病。的疾病及并发症为肝内脂肪蓄积的疾病。

【技术实现步骤摘要】
from Ilex hainanensis Merr. Improves Diet
‑
Induced Non
‑
Alcoholic Fatty Liver Disease in Rats [J]. Drug Dev Res，2013，74(4)：227
‑
236证明了Ile
‑
A能降低高脂饲喂大鼠体内血脂水平。现有技术Zhang L，Qiao X，Chen M，et al. Ilexgenin A prevents early colonic carcinogenesis and reprogramed lipid metabolism through HIF1α/SREBP
‑
1 [J]. Phytomedicine，2019，63：153011.公开了通过抑制SREBP1通过调控脂代谢抑制AOM/DSS小鼠模型中HIF
‑
1α的表达。上述结果均表明Ile
‑
A具有调控血脂代谢异常、改善脂肪肝相关疾病的作用，但是Ile
‑
A调控肝内脂肪蓄积的作用机理尚不明确。冬青素A大量存在于冬青属植物中，而这类植物资源十分丰富，故冬青素A在改善脂肪肝的临床治疗中有巨大的潜在价值。
[0005]目前，尚未有冬青素A在制备ACSS2入核抑制剂中的应用的报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供冬青素A在制备ACSS2入核抑制剂中的应用。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案为：本专利技术提供一种冬青素A作为ACSS2核转位抑制剂的应用。申请人经研究肝脏细胞发现动物或人肝内脂肪蓄积引发疾病表现为肝脏细胞核中ACSS2的表达水平升高，更进一步表现为肝脏细胞中ACSS2向其细胞核内转移。冬青素A具有改善酒精诱导的脂质新生的功能，抑制肝脏细胞中ACSS2向细胞核转移.作为技术方案的进一步改进，冬青素A用于制备治疗肝内脂肪蓄积所引发疾病的药物。
[0008]作为技术方案的进一步改进，所述肝内脂肪蓄积所引发疾病为酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝病作为技术方案的进一步改进，所述肝内脂肪蓄积引发疾病为酒精性肝病。酒精性肝病包括酒精性脂肪肝以及其后期疾病肝硬化、肝纤维化。
[0009]作为技术方案的进一步改进，所述肝内脂肪蓄积引发疾病为酒精性脂肪肝。
[0010]作为技术方案的进一步改进，冬青素A用于制备辅助治疗并发症为肝内脂肪蓄积疾病的药物。
[0011]作为技术方案的进一步改进，所述肝内脂肪蓄积所引发疾病为高脂血症或糖尿病。
[0012]本专利技术相对现有技术具有突出的实质性特点和显著的进步，具体的说，本专利技术中冬青素A作为ACSS2核转位抑制剂的应用，通过抑制ACSS2入核，降低组蛋白乙酰化水平，发挥抑制脂质新生的作用。冬青素A是天然的小分子化合物，来源广泛，提取工艺成熟，开发成本低，有望被开发为新型的肝内脂肪蓄积治疗药物。
附图说明
[0013]图1为Ile
‑
A对酒精诱导的动物体内TG水平的影响的效果图。
[0014]图2为Ile
‑
A对脂肪新生基因Srebp
‑
1c、Fasn及Acc的表达影响效果图。
[0015]图3为Ile
‑
A对酒精诱导的肝细胞中脂质水平的影响效果图。BODIPY493/503染料代表细胞中的中性脂质（图中白色光亮越强，表示脂质表达水平越高）。
[0016]图4为Ile
‑
A对酒精诱导的细胞核中ACSS2表达水平及组蛋白乙酰化影响结果图。
[0017]各图中,左至右分别为对照组、模型组以及Ile
‑
A组。
具体实施方式
[0018]下面通过具体实施方式，对本专利技术的技术方案做进一步的详细描述。
[0019]本公开中实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照原料或商品制造厂商所建议的条件。未注明具体来源的试剂，为市场购买的常规试剂。
[0020]冬青素A可商购或者采用酒精提取的方法自制，实施例中所用冬青素A的制备步骤如下：取山绿茶60℃烘干，打粉后过60目筛，得山绿茶粉末。取200g山绿茶粉末，加入70%乙醇3L加热回流提取60min，得到59.75g山绿茶浸膏。精密称取10.00g山绿茶浸膏，加入1L乙醇
‑
2%盐酸（v/v=4:1）混合溶液，80℃水浴30min水解，冷却至室温后，用等体积石油醚萃取1次，取下层，浓缩，加乙醇定容至原溶液体积的1/5，加入2倍体积单蒸水（v/v=1:2），离心取沉淀，烘干，称重。将取萃取水沉后的山绿茶浸膏上MCI柱。依次用55%丙酮洗脱5BV、58%丙酮洗脱5BV、100%丙酮洗脱2BV，收集58%丙酮洗脱时3
‑
5BV段洗脱液，浓缩，挥干，再重结晶。将冬青素A粗品加入50ml甲醇，70℃水浴，浓缩至溶液剩余5.7mg/ml，离心取上清，继续70℃水浴，浓缩至浓缩至原甲醇体积1/10，离心20min，弃去上清，沉淀部分加入原甲醇体积的1/2复溶，70℃水浴，浓缩至甲醇体积1/5，离心弃去上清。沉淀加入原甲醇体积1/2的95%乙醇复溶，70℃水浴，浓缩至乙醇体积1/5，8000rpm离心20min，60℃干燥至恒重，即得冬青素A。
[0021]HPLC检测冬青素A纯度为92.7%，色谱条件为色谱柱：shim
‑
packCLC
‑
ODS（6
×
150mm）。流动相：A相为0.1%甲酸
‑
水，B相为甲醇:乙腈（v/v）=5:1。检测器为ELSD：漂移管温度90℃，气体流速2.2L/min。梯度洗脱程序：0
‑
13min，B相从75%
‑
85%；13
‑
14min，B相从85%
‑
100%，14
‑
22min，B相100%等度洗脱。流速为1.0mL/min。
[0022]实施例1冬青素A改善酒精诱导的肝脂质新生试验动物为雄5
‑
6周雄性野生型C57BL/6J小鼠购自南京大学模式动物研究中心。所有小鼠都被饲养在SPF级动物中心，饲养室温度为22
‑
24
°
C，动物饲养遵循12小时昼夜光照周期。适应性饲养一周后，动物随机分为三组，Ile
‑
A组灌胃给予Ile
‑
A50mg/kg，对照组及模型组分别给予等量羧甲基纤维素钠。半小时后模型组及Ile
‑
A组小鼠腹腔注射2g/kg的乙醇
‑
生理盐水，对照组腹腔注射等剂量生理盐水。四小时后，异氟烷麻醉小鼠，于左心室采血测定甘油三酯（TG）含量。处死后收集肝脏，测定TG含量，采用Q
‑
PCR检测脂肪新生基因Srebp
‑
1c、Fasn本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种冬青素A作为ACSS2核转位抑制剂的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，冬青素A用于制备治疗肝内脂肪蓄积所引发疾病的药物。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，肝内脂肪蓄积所引发疾病包括酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝病。4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述肝内脂肪蓄积引...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨杰，胡文心，鲁雅雯，闻晓东，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：