一种立体选择性羧酯酶、编码基因、载体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种立体选择性羧酯酶、编码基因、载体及其应用。本发明专利技术的立体选择性羧酯酶对多种环烷烃甲酯类底物具有较高的活力，利用本发明专利技术所述的羧酯酶催化动力学拆分环烷烃甲酯类底物时，反应条件温和，操作过程简便，易于放大；通过该动力学拆分反应制备所得的手性酸产物浓度高，光学纯度高，ee值可达99％，具有良好的工业应用前景。良好的工业应用前景。良好的工业应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种立体选择性羧酯酶、编码基因、载体及其应用


[0001]本专利技术涉及一种立体选择性羧酯酶、编码基因、载体及其应用，属于生物工程


技术介绍

[0002](S)
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氧杂环己烷
‑2‑
甲酸((S)
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THPCA)是一种重要的手性化工原料和医药中间体，广泛的应用于手性合成领域，特别是在手性药物制备方面，也是药物的重要手性构建块，如针对II型糖尿病的Danuglipron(PF
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06882961)，其需求量在飞速的增长。由于氧杂环己烷
‑2‑
甲酸酯连接到手性中心的两个取代基差异很小，很少有报道的酶具有对映体选择性来区分杂环羧酸酯的两个对映体。此外，使用手性助剂的杂环羧酸酯的化学拆分也具有挑战性，这也是因为其特殊的对称结构。因此鉴定具有高对映体选择性的新型羧酸酯酶，对高效合成手性氧杂环羧酸及其衍生物，阐明羧酸酯酶对映体选择性的分子机理具有重要意义。
[0003]用于生物法制备(S)
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THPCA的生物催化剂既可以是整细胞，也可本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种立体选择性羧酯酶，其特征在于，所述立体选择性羧酯酶是如下(a)或(b)的羧酯酶：(a)氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的羧酯酶；(b)由(a)中所述羧酯酶经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸得到的具有羧酯酶活性的衍生蛋白质。2.根据权利要求1所述的立体选择性羧酯酶，其特征在于：所述的衍生蛋白质是将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的羧酯酶的第144位甲硫氨酸突变为苏氨酸，第148位异亮氨酸突变为苯丙氨酸，同时将第149位脯氨酸突变为丙氨酸。3.编码权利要求1或2所述的立体选择性羧酯酶的基因。4.根据权利要求3所述的基因，其特征在于：所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示。5.携带权利要求3或4所...

【专利技术属性】
技术研发人员：许国超，窦哲，倪晔，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：