【技术实现步骤摘要】
一种北方驯化后的秋火焰快繁方法
：
[0001]本专利技术涉及植物快速繁殖
，特别涉及一种北方驯化后的秋火焰快繁方法。
技术介绍
：
[0002]“秋火焰”，又名美国秋火焰红枫、美国红枫、秋火焰枫等，属于槭属科槭属。美国红枫是一种槭树科漆树属植物，生长快，适应性强且耐旱、耐湿、比较耐寒。秋季叶片色彩艳丽，是彩色叶树种具有代表的植物。近年来，在南方栽植应用范围很广，其主要繁殖方式是扦插，因为原有美国红枫品种在东北的极寒地区栽植会出现冻死或者出现冻稍现象，所以不适合利用原来的品种直接栽植或者繁殖，因此，美国红枫在东北极寒地区繁植还是一项空白。
技术实现思路
：
[0003]本专利技术在于克服
技术介绍
中存在的现有美国红枫品种在东北极寒地区栽植会出现冻死或者出现冻稍现象因而不适合利用原来的品种直接栽植或者繁殖的问题，而提供一种北方驯化后的秋火焰快繁方法。该北方驯化后的秋火焰快繁方法，能够建立美国红枫组织培养体系，得到驯化好适应东北地区的美国红枫再生植株，填补了东北极寒地区没有美国红枫繁植的空白。
[0004]本专利技术解决其问题可通过如下技术方案来达到：该北方驯化后的秋火焰快繁方法，包括以下步骤：
[0005](1)外植体选取及预处理：
[0006]采集生长健壮的秋火焰一年生半木质化嫩枝为外植体，保持湿润，将带腋芽的茎段清理干净，剪成若干茎段后清洗干净后移至超净工作台下备用；保证每个茎段都有腋芽；
[0007](2)外植体的消毒处理；
[0008](3)启动培养>[0009]消毒处理后的外植体需要切除表面伤口部分，芽下端留1.2
‑
1.5cm，上端留0.5
‑
0.7cm，之后直立接种于空白培养基中；7
‑
10天后转移到腋芽启动培养基上进行诱导培养；将诱导培养后外植体消毒处理后直接接种在腋芽启动培养基中，接种完成后将组培瓶转移至组培室中；
[0010](4)继代增殖培养
[0011]取步骤(3)组培室中生长健壮的组培苗进行继代增殖培养，剪取带顶芽的茎段，每个茎段约2
‑
3个节间，高2.5
‑
3cm接种到继代增殖培养基；进行继代培养40天一个周期；
[0012](5)壮苗培养
[0013]继代增殖培养后的幼苗，减去基部叶片，放置到壮苗培养基中进行壮苗培养，培养40天一个周期；
[0014](6)生根诱导培养
[0015]壮苗培养后的组培苗生长达到5cm进行生根诱导培养，保留3～4对叶；可以在组培瓶内的生根诱导培养基中进行生根诱导试验；在壮苗后的美国红枫组培苗中挑选长势好的，且分支少的组培苗进行生根培育，培养30天一个周期；
[0016](7)炼苗及移栽培养
[0017]选择生根好的组培苗进行移栽炼苗；移动到室内放置，在自然光照条件下进行闭瓶炼苗，放置5d后进行半开盖处理，两天后移栽；炼苗后轻轻从组培瓶中取出组培苗，清洗根部，保证根部无任何残留的培养基，进行移栽到基质中，第一次移栽浇透底水，之后放置在光照培养箱中，1周后放入温室定植。
[0018]优选的，步骤(1)秋火焰的采集时间为晴天上午；腋芽的茎段清理时在流水下冲洗60
‑
70min；带腋芽的茎段清理干净后剪成若干茎段将其剪成4cm
‑
5cm，且腋芽上端留有0.8
‑
1cm，下端留有1.6
‑
2.0cm，保证每个茎段都有腋芽，并去掉茎段上的叶片。
[0019]优选的，所述步骤(2)外植体的消毒处理过程为：对美国红枫腋芽茎段预处理后，在无菌操作台中进行消毒，先将外植体放入2％的洁尔儿灭浸泡9
‑
10min，无菌水中冲洗几遍，再放入75％的酒精消毒处理20s
‑
30s后立刻取出外植体放入无菌水中冲洗2～3遍，再放入10％次氯酸钠4
‑
5min，无菌水中冲洗。
[0020]优选的，步骤(3)腋芽启动培养基为：以改良MS为基本培养基，添加ZT 0.1mg/L(促进愈伤组织发芽须)和IBA 1.0mg/L(促进发芽)进行腋芽启动培养；每升培养基添加5g
‑
7的琼脂及30g
‑
35g的蔗糖，PH值为5.8
‑
6.0；腋芽启动培养条件为：调节温度为22
‑
24℃，湿度为65
‑
70％，光照时长为14h/天，光照强度为1400
‑
1500lx。
[0021]优选的，步骤(4)继代增殖培养基为：以改良MS为基本培养基，添加TDZ 0.005mg/L(新型的植物生长调节剂，具有很强的细胞分裂素活性)、6
‑
BA0.1 mg/L(促进细胞分裂)、GA30.1 mg/L(促进植物发芽，加快植物生长过程)、IBA0.1 mg/L四种植物生长调节剂，每升培养基添加5g
‑
7g的琼脂及30g
‑
35g的蔗糖，PH值为5.8
‑
6.0；继代增殖培养条件为：温度为23℃
‑
24℃，湿度为70％，光照时长为14h/天，光照强度为1500lx。
[0022]优选的，改良MS培养基具体为：NH4NO
3 1.3g/L,KNO
3 1.9g/L,CaCl2·
2H2O 0.44g/L,MgSO4·
7H2O 0.74g/L,KH2PO
4 0.17g/L,KI 0.00083g/L,H3BO
3 0.0062g/L,MnSO4·
4H2O 0.0223g/L,ZnSO4·
7H2O 0.0086g/L,Na2MoO4·
2H2O 0.00025g/L,CuSO4·
5H2O 0.0000025g/L,CoCl2·
6H2O 0.0000025g/L,Na2·
EDTA 0.0373g/L,FeSO4·
7H2O 0.0278g/L,烟酸0.5mg/L,盐酸硫胺素(VB1)0.5mg/L,盐酸吡哆醇(VB6)0.4mg/L,肌醇100mg/L,甘氨酸2mg/L。
[0023]优选的，步骤(5)壮苗培养基为：以MS为基本培养基，添加植物生长调节剂GA3 1.0mg/L+6
‑
BA 1.0mg/L+IBA0.2mg/L，培养基中蔗糖添加30g/L,琼脂5g/L，PH值为5.8
‑
6.0；壮苗培养条件为：培养温度为23℃
‑
24℃，湿度为60％
‑
70％，光照时长为14h/天，光照强度为1400lx
‑
1500lx。每瓶两个外植体，培养40天一个周期。
[0024]优选的，步骤(6)生根诱导培养基为：采用1/2MS培养基为生根培养阶段的基本培养基。添加GA3 1.0mg/L+2,4
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种北方驯化后的秋火焰快繁方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）外植体选取及预处理：采集生长健壮的秋火焰一年生半木质化嫩枝为外植体，保持湿润，将带腋芽的茎段清理干净，剪成若干茎段后清洗干净再移至超净工作台下备用；保证每个茎段都有腋芽；（2）外植体的消毒处理；（3）启动培养：消毒处理后的外植体需要切除表面伤口部分，芽下端留1.2cm
‑ꢀ
1.5 cm，上端留 0.5cm
‑
0.7 cm，之后直立接种于空白培养基中；7
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10天后转移到腋芽启动培养基上进行诱导培养；将诱导培养后外植体消毒处理后直接接种在腋芽启动培养基中，接种完成后将组培瓶转移至组培室中；（4）继代增殖培养：取步骤（3）组培室中生长健壮的组培苗进行继代增殖培养，剪取带顶芽的茎段，每个茎段约 2
‑
3 个节间，高2.5cm
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3cm 接种到继代增殖培养基；进行继代培养40天一个周期；（5）壮苗培养：继代增殖培养后的幼苗，减去基部叶片，放置到壮苗培养基中进行壮苗培养，培养40天一个周期；（6）生根诱导培养：壮苗培养后的组培苗生长达到5cm进行生根诱导培养，保留3~4对叶；可以在组培瓶内的生根诱导培养基中进行生根诱导试验；在壮苗后的美国红枫组培苗中挑选长势好的，且分支少的组培苗进行生根培育，培养30天一个周期；（7）炼苗及移栽培养选择生根好的组培苗进行移栽炼苗； 移动到室内放置， 在自然光照条件下进行闭瓶炼苗，放置 5d 后进行半开盖处理，两天后移栽；炼苗后轻轻从组培瓶中取出组培苗，清洗根部，保证根部无任何残留的培养基，进行移栽到基质中，第一次移栽浇透底水，之后放置在光照培养箱中，1周后放入温室定植。2.根据权利要求1所述的北方驯化后的秋火焰快繁方法，其特征在于：步骤（1）秋火焰的采集时间为晴天上午；腋芽的茎段清理时在流水下冲洗60min
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70min；带腋芽的茎段清理干净后剪成若干茎段将其剪成4cm
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5cm，且腋芽上端留有0.8cm
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1cm，下端留有1.6
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2.0cm，保证每个茎段都有腋芽，并去掉茎段上的叶片。3.根据权利要求1所述的北方驯化后的秋火焰快繁方法，其特征在于：所述步骤（2）外植体的消毒处理过程为：对美国红枫腋芽茎段预处理后，在无菌操作台中进行消毒，先将外植体放入2%的洁尔儿灭浸泡9
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10min，无菌水中冲洗几遍，再放入75%的酒精消毒处理20s
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30s后立刻取出外植体放入无菌水中冲洗2～3遍，再放入10%次氯酸钠4
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5min，无菌水中冲洗。4.根据权利要求1所述的北方驯化后的秋火焰快繁方法，其特征在于：步骤（3）腋芽启动培养基为：以改良MS 为基本培养基，添加ZT 0.1mg/L和IBA 1.0mg/L进行腋芽启动培养；每升培养基添加5g
‑
7g的琼脂及30g
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35g的蔗糖，PH值为5.8
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6.0；腋芽启动培养条件为：调节温度为22
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24℃，湿度为65%
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70%，光照时长为14h/天，光照强度为1400lx
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1500lx。
5.根据权利要求1所述的北方驯化后的秋火焰快繁方法，其特征在于：步骤（4）继...
【专利技术属性】
技术研发人员：王宏霞，杨洪标，杨凤军，刘芳，逄兴杰，王忠庆，李镏钰，朱珊珊，刘尧，孙竹梅，韩志敏，孟艳，赵淑芹，张云辉，滕彬孚，刘国昌，
申请(专利权)人：中国石油天然气集团有限公司，
类型：发明
国别省市：
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