一种用于濒危植物丰都车前高效繁育的方法技术

本发明专利技术提供一种用于濒危植物丰都车前高效繁育的方法。种子在蒴果果皮呈浅黄色采收，放在自然通风环境下阴干10

【技术实现步骤摘要】
一种用于濒危植物丰都车前高效繁育的方法


[0001]本专利技术属于珍稀植物保护
，涉及一种用于濒危植物丰都车前高效繁育的方法。

技术介绍

[0002]丰都车前(Plantago fengdouensis)为车前科车前属多年生草本植物，是我国特有种，随着三峡水库的逐步蓄水，使其成为可能因三峡工程建设而导致自然生境和野生居群全部毁灭的草本植物。丰都车前分布区狭窄，只分布在丰都、忠县和巴南区等地，而作为三峡消落带一种特有植物，可以作为一种很好的试验材料来研究该植物对特殊环境的生态适应性和应对机制。因此，对该特有物种的保护与扩繁研究具有重要意义。
[0003]目前，因丰都车前分布狭窄，国内仅一些普通车前草的种子育苗栽培技术有少量报道，对丰都车前繁育尚无相关报道。陈建荣等人在(专利名称一种车前草离体快速繁殖的方法申请号：201310710565.4)车前草的离体快繁中，利用叶片诱导愈伤，其结果说明外植体消毒效率高达80％，生根率100％，对其愈伤诱导及增殖效率没有详细说明；王勇等(2006)对巴南对河坝居群植株年生长周期的调查表明：在自然条件下，丰都车前在4月上旬开始开花，5月上旬开始结实，从5月下旬至9月上旬的间歇性水淹期间，极少种子能够成熟，丰都车前植株矮小，种子光滑且颗粒大，不利于风力和流水传播，制约了种子的长距离输移，而种子表面厚厚的粘液便于种子随人和动物的传播，这可能是丰都车前在群落内分布格局的主要成因；徐运飞，赵敏等人在(重金属Cu2+Cd2+和Zn2+对车前草种子萌发的影响)试验中提到车前草种子普遍存在发芽率较低现象，而种子发芽率低的原因可能是由于种子采收过早、未成熟或采收后晾晒不彻底、湿度过大以及没有彻底解除休眠等。

技术实现思路

[0004]本专利技术采用种皮呈浅黄色、形态未完全成熟的种子，经过10
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15d自然阴干后进行无菌苗的诱导、增殖，其中包括种子的采集时间、灭菌、发芽培养环境及培养基的优化，通过此专利技术方法能够使种子萌发提前30d左右，萌发率提高至80％以上(比徐运飞等人在车前草发芽结论效果佳)，采用种子为外植体消毒率高达100％(比陈建容等人离体繁育试验中提高了20％)，在常见的几种培养基中萌发率10％左右，而优化后的培养基中萌发率高达95％以上，增殖率达到5.06，且无菌苗叶片大、颜色嫩绿、根部发达，采用此无菌苗的营养器官(根、叶片、芽等)做下一步试验污染率为0％。解决了车前属离体培养中叶片诱导愈伤污染率的问题，同时增加了离体繁育途径，为丰都车前后续组培繁育、转基因等研究奠定基础，对该物种繁育及种群恢复与生态保护具有重要意义。
[0005]为达到上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0006]一种用于濒危植物丰都车前高效繁育的方法，所述以下步骤：
[0007]S1种子采集及发芽：种子在蒴果果皮呈浅黄色采收，放在自然通风环境下阴干10
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15左右脱粒后进行发芽处理；
[0008]S2种子预处理及灭菌：种子用纱布包扎好，进行消毒处理；
[0009]S3种子诱导萌发：
[0010]S4丛生芽诱导；
[0011]S5壮苗生根培养；
[0012]S6炼苗移栽；
[0013]完成繁育。
[0014]优选地，所述步骤S1：发芽处理操作为：放在自然通风环境下阴干10
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15左右脱粒后，光照培养箱，温度20～30℃变温处理，其中30℃光照1500Lux，20℃为黑暗培养，光周期12h。
[0015]优选地，所述步骤S2：消毒处理具体方法为：先用GA30.5
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1.5mg/L加百菌杀菌剂500倍溶液浸种30
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60min，清洗干净残留物后再用0.05
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0.15％消毒粉浸泡5
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15min，流水冲洗30
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60min，随后放置在超净工作台内紫外灯照射25
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35min，75％酒精浸泡25
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35s,无菌水清洗2
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3次，0.05
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0.15％升汞浸泡3
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8min，无菌水清洗5
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6次。
[0016]优选地，所述步骤S3诱导萌发培养基中组分占每升的浓度为：硝酸钾9
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10g/L、硝酸铵8.1
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8.3g/L、磷酸二氢钾0.8
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0.9g/L、七水合硫酸镁1.8
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1.9g/L、无水氯化钙3.2
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3.4g/L、碘化钾0.04
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0.05g/L、硼酸0.6
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0.7g/L、硫酸锰1.65
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1.7g/L、硫酸锌0.8
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0.9g/L、硫酸钠0.01
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0.03g/L、硫酸铜0.001
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0.002g/L、氯化钴0.001
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0.002g/L、乙二胺四乙酸二钠0.9
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1g/L、硫酸亚铁0.6
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0.7g/L、肌醇8
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12g/L、甘氨酸0.1
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0.3g/L、盐酸硫胺素0.01
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0.02g/L、盐酸吡哆醇0.03
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0.1g/L、烟酸0.03
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0.1g/L。
[0017]进一步优选地，所述步骤S4诱导丛生芽培养基为：硝酸钾9.5g/L、硝酸铵8.25g/L、磷酸二氢钾0.85g/L、七水合硫酸镁1.85g/L、无水氯化钙3.3g/L、碘化钾0.0465g/L、硼酸0.62g/L、硫酸锰1.69g/L、硫酸锌0.86g/L、硫酸钠0.025g/L、硫酸铜0.0025g/L、氯化钴0.00125g/L、乙二胺四乙酸二钠0.9325g/L、硫酸亚铁0.695g/L、肌醇10g/L、甘氨酸0.2g/L、盐酸硫胺素0.01g/L、盐酸吡哆醇0.05g/L、烟酸0.05g/L，添加激素浓度NAA1.5mg/L,附加蔗糖30g/L、琼脂6g/L，调节pH至5.8～6.0。
[0018]本专利技术的有益效果是：
[0019]1、种子在蒴果果皮呈浅黄色采收，使其提前脱离母株，缩短种子形态成熟期30d左右，放在自然通风环境下阴干10
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15左右脱粒后放在光照培养箱，温度20～30℃变温处理其中30℃光照1500Lux，20℃为黑暗培养，光周期12h的环境下播种，只需4天萌发，萌发率高于其他处理约35％。
[0020]2、种子用GA31.0mg/L加百菌清杀菌剂500倍溶液浸种30
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60min，清洗干净残留物后，再用0.1％消毒粉浸泡10min，流水冲洗30
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60min，随后放置在超净工作台内紫外灯照射30min，75％酒精浸泡30s,无菌水清洗2
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3次，0.1％升汞本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于濒危植物丰都车前高效繁育的方法，其特征在于，所述以下步骤：S1种子采集及发芽：种子在蒴果果皮呈浅黄色采收，放在自然通风环境下阴干10
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15左右脱粒后进行发芽处理；S2种子预处理及灭菌：种子用纱布包扎好，进行消毒处理；S3种子诱导萌发：S4丛生芽诱导;S5壮苗生根培养;S6炼苗移栽;完成繁育。2.根据权利要求1所述的用于濒危植物丰都车前高效繁育的方法，其特征在于，所述步骤S1：发芽处理操作为：放在自然通风环境下阴干10
‑
15左右脱粒后，光照培养箱，温度20~30℃变温处理，其中30℃光照1500Lux，20℃为黑暗培养，光周期12h。3.根据权利要求1所述的用于濒危植物丰都车前高效繁育的方法，其特征在于，所述步骤S2：消毒处理具体方法为：先用GA30.5
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1.5mg/L加百菌杀菌剂500倍溶液浸种30
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60min，清洗干净残留物后再用0.05
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0.15%消毒粉浸泡5
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15min，流水冲洗30
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60min，随后放置在超净工作台内紫外灯照射25
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35min，75%酒精浸泡25
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35s,无菌水清洗2
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3次，0.05
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0.15%升汞浸泡3
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8min，无菌水清洗5
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6次。4.根据权利要求1所述的用于濒危植物丰都车前高效繁育的方法，其特征在于，所述步骤 S3诱导萌发培养基中组分占每升的浓度为：硝酸钾9
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10g/L、硝酸铵8.1
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8.3 g/L、磷酸二氢钾0.8
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0....

【专利技术属性】
技术研发人员：陈会员，黄桂云，朱豪飞，胡梅香，望雄英，
申请(专利权)人：中国长江三峡集团有限公司，
类型：发明
国别省市：