一种人乳寡糖LNFPI对照品的制备方法技术

本发明专利技术公开一种人乳寡糖LNFP I对照品的制备方法，本发明专利技术的方法包括以下步骤：首先以人乳中性糖总样为原料；然后溶解所述的人乳中性糖总样，并使用亲水色谱填料，流动相为水和有机溶剂，使用梯度或等度方式进行洗脱，获得LNFP I粗品；再然后溶解LNFP I粗品，并使用多孔石墨碳材料为色谱柱固定相，流动相为碱水和有机溶剂，使用梯度或等度方式进行洗脱，获得LNFP I纯品；最后浓缩并冷冻干燥LNFP I纯品，即获得人乳寡糖LNFP I对照品，该方法具有选择性好，分离效率高，稳定性好，操作简便可控等特点，适用于放大制备。适用于放大制备。适用于放大制备。

【技术实现步骤摘要】
一种人乳寡糖LNFP I对照品的制备方法


[0001]本专利技术涉及一种寡糖的制备方法，具体为一种人乳寡糖LNFP I对照品的制备方法。
技术背景
[0002]人乳寡糖是存在于人乳中的一类天然存在的低聚糖：对婴儿消化系统的早期发育，及出生后免疫系统的完善和体内生态平衡的建立发挥不可替代的。深入了解人乳寡糖生物和药理活性的前提是得到人乳寡糖样品，因此，以获得高纯度的人乳寡糖对照品为目标的寡糖制备技术就成为了寡糖研究中的关键步骤之一。然而，由于寡糖为极性的化合物，含有不同空间构型的单糖结构、不同的糖基序列、以及不同的糖置换方式，其可产生多样的结构种类，从而增加了分离的难度。
[0003]人乳寡糖LNFP I是中性糖中的一种，分子式为C
32
H
55
NO
25
，序列为：Fucα1
‑
2Galβ1
‑
3GlcNAcβ1
‑
3Galβ1
‑
4Glc，婴儿肠道菌群与人乳寡糖的特殊结构有着密不可分的关系，LNFP I可作为岩藻本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人乳寡糖LNFP I对照品的制备方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：S1、以人乳中性糖总样为原料；S2、所述的人乳中性糖总样与第一溶剂混合，溶解并得到第一混合物，并使用亲水色谱填料，流动相为水和有机溶剂，使用梯度或等度方式进行洗脱，利用柱色谱分离获得LNFP I粗品；S3、所述的LNFP I粗品与第二溶剂混合，溶解并得到第二混合物，并利用多孔石墨碳材料为色谱柱固定相，流动相为碱水和有机溶剂，使用梯度或等度方式进行洗脱，利用柱色谱分离获得LNFP I纯品；S4、浓缩并冷冻干燥LNFP I纯品，即获得人乳寡糖LNFP I对照品。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中的第一溶剂为40
‑
60%甲醇溶液，所述步骤S3中的第二溶剂为水溶液。3.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中的亲水色谱填料为硅胶表面键合半胱氨酸极性基团的填料，所述步骤S3中的碱水溶液为0.2%~0.6%的氢氧化铵水溶液。4.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤S2和S3的有机溶剂为乙醇、甲醇、乙腈中的一种或二种以上。5.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中等度洗脱方式为：流动相中水溶液的体积比例为5%~95%；或使用线性梯度方式为：流动相中水溶液的体积浓度从小到大变化，起始体积浓度为5
‑
60%，终止体积浓度为40
‑
95%；或台阶梯度方式为：按流动相中水溶液的体积比例从5%~95%中从小至大随机选取2个以上进行洗脱操作。6.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁鑫淼，王超然，郭志谋，闫竞宇，郭秀洁，吉素志，万瑛，董海临，李效农，薛兴亚，
申请(专利权)人：泰州医药城国科化物生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：