用于治疗癌症的溶瘤病毒组合物和方法技术

本文尤其提供了包含表达CD47抗体的重组溶瘤病毒的组合物和方法，其用于治疗包括癌症、免疫病症和感染性疾病在内的疾病。免疫病症和感染性疾病在内的疾病。免疫病症和感染性疾病在内的疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗癌症的溶瘤病毒组合物和方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2020年2月7日提交的美国临时申请第62/971,768号的优先权，该美国临时申请据此通过引用以其整体并出于所有目的并入。
[0003]关于在联邦政府资助的研究和开发下所进行的专利技术的权利声明
[0004]本专利技术是在美国卫生院(National Institutes of Health)颁发的授予号R01NS106170和P01CA163205下利用政府支持进行的。政府享有本专利技术的某些权利。
[0005]对序列表、表格或作为ASCII文本文件提交的计算机程序列表附录的引用
[0006]序列表以文件048440
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748001WO
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SEQUENCE_LISTING_ST25.TXT编写，创建于2021年2月5日，有11,491字节，机器格式是IBM
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PC，采用MS Windows操作系统，据此以引用的方式并入。

技术介绍

[0007]溶瘤病毒(OV)疗法已被认为是一种有前途的癌症治疗方法。它与其中病毒载体用于递送特定基因的传统基因疗法不同。OV疗法利用病毒本身作为免疫刺激剂，所述病毒还可以选择性地在肿瘤细胞中复制，从而导致所述肿瘤细胞溶解而不伤害正常组织。OV疗法的概念已经存在了几十年。OV疗法在用含有胸苷激酶(TK)基因突变的基因工程改造的I型单纯疱疹病毒(HSV
‑
1)治疗脑肿瘤的临床前模型中是有效的。这鼓励研究人员进一步修改病毒基因组，设计出溶瘤HSV
‑
1(oHSV)。在过去的二十年中，已经证实oHSV可以加强全身免疫，并从而加强抗肿瘤免疫应答。
[0008]胶质母细胞瘤(GBM)是最常见且具有侵袭性的原发性恶性脑肿瘤。接受标准治疗(包括外科手术切除、化学疗法和放射疗法)的GBM患者的中位生存期仅为大约15个月。由于该疾病的早期浸润性，完全外科手术切除GBM在很大程度上是无法实现的。GBM对化学疗法和放射疗法的固有耐药性也促进了不良的临床结果。鉴于这些属性，迫切需要新的治疗剂来提高中位生存期。(参见，例如，参考文献1)。本文提供了本领域中的这些和其他问题的解决方案。
[0009]卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤(参见，例如，参考文献44
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47)。尽管已经通过更积极的外科手术方法和引入更有效的化学疗法做出大量努力来改善卵巢癌的治疗，但是晚期卵巢癌的5年总体生存率为大约30％。来自临床前和临床数据的越来越多的证据表明，利用和增强抗肿瘤效应细胞的免疫治疗方法，如免疫检查点阻断疗法和肿瘤特异性单克隆抗体疗法，已经为卵巢癌带来临床益处(参见，例如，参考文献48)。
[0010]CD47在20世纪80年代首次被鉴定为人卵巢癌的肿瘤抗原(参见，例如，参考文献49
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50)。人们发现CD47过表达与卵巢癌的不良预后相关(参见，例如，参考文献51
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52)。CD47通过与其受体即巨噬细胞上的信号调节蛋白α(SIRPα)结合来提供“别吃”信号，并抑制吞噬作用(参见，例如，参考文献53
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54)。靶向CD47疗法已被证明是卵巢癌的有效治疗方法，有若干临床试验(参见，例如，参考文献51、55、56)。
[0011]然而，抗体药物的传统递送方法，如静脉内(i.v.)、皮下(s.c.)或肌内(i.m.)施
用，导致抗体在肿瘤组织中的分布有限，但是却将大多数所施用的抗体留在外周循环系统中，从而导致副作用(参见，例如，参考文献57
‑
58)。

技术实现思路

[0012]在一个方面，本文提供了一种重组溶瘤病毒，其包含编码抗CD47抗体的表达盒。在一个方面，本文提供了一种重组溶瘤病毒，其包含编码抗CD47抗体的核酸。
[0013]在一个方面，本文提供了一种药物组合物，其包含如本文所述的重组溶瘤病毒，以及药学上可接受的载剂。在一个方面，药物组合物还包含抗癌剂。
[0014]在一个方面，本文提供了一种包括药物组合物的组合疗法，所述药物组合物包含如本文所述的重组溶瘤单纯疱疹病毒和抗癌剂。在一个方面，抗癌剂是检查点抑制剂。
[0015]在一个方面，本文提供了一种用于杀死受试者的肿瘤细胞的方法，其包括向受试者施用有效量的根据如本文所述的任何实施方案的重组溶瘤病毒。在一个方面，所述方法还包括向受试者施用抗癌剂。
[0016]在一个方面，本文提供了一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，其包括向受试者施用有效量的包含如上所述的重组溶瘤病毒和如本文所述的药学上可接受的载剂的药物组合物或根据如本文所述的任何实施方案的重组溶瘤病毒。在一个方面，所述方法还包括向受试者施用抗癌剂。
附图说明
[0017]图1A
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1E描绘了OV
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Q1、OV
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Hu5F9
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G1和OV
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Hu5F9
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G4的构建和表征(Hu5F9在整个本说明书中也称为αCD47(α
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CD47))。图1A示出本研究中使用的溶瘤病毒的示意性图谱。顶部：野生型HSV
‑
1的基因图谱。第二：对照oHSV OV
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Q1的基因图谱，其具有两个拷贝的γ34.5缺失、ICP6功能障碍以及GFP基因的插入。第三：OV
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Hu5F9
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G1的基因图谱，其示出在人IgG1支架上构建的抗CD47的IgG1型式(αCD47
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G1)的插入编码基因。αCD47
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G1的轻链和重链编码基因通过T2A序列连接并由病毒pIE4/5启动子驱动。第四：OV
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αCD47
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G4的基因图谱，其展示了在人IgG4而不是IgG1的支架上构建的抗CD47的IgG4型式(αCD47
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G4)的插入编码基因。图1B示出用工程改造的CHO细胞和oHSV感染的U251T2细胞的浓缩上清液进行的免疫印迹。使用慢病毒感染的CHO细胞(CHO
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αCD47
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G1和CHO
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αCD47
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G4)产生纯的αCD47
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G1和αCD47
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G4。在感染后24小时，从培养的CHO
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EV(空载体)、CHO
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αCD47
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G1和CHO
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αCD47
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G4细胞，以及OV
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Q1感染的、OV
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αCD47
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G1感染的和OV
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αCD47
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G4感染的U251T2细胞中收集10ml上清液。图1C示出通过流式细胞术测定法测试了αCD47
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种重组溶瘤单纯疱疹病毒(HSV)，其包含编码抗CD47抗体的核酸。2.根据权利要求1所述的重组溶瘤病毒，其中所述抗CD47抗体是IgG1同种型。3.根据权利要求1所述的重组溶瘤病毒，其中所述重组溶瘤病毒不包含编码功能性γ34.5基因的核酸。4.根据权利要求1所述的重组溶瘤病毒，其中所述重组溶瘤病毒不包含编码功能性ICP6基因的核酸。5.根据权利要求1所述的重组溶瘤病毒，其中编码所述抗CD47抗体的所述核酸处于病毒或肿瘤特异性启动子的控制下。6.根据权利要求5所述的重组溶瘤病毒，其中所述病毒启动子是单纯疱疹病毒(HSV)立即早期(IE)启动子。7.根据权利要求6所述的重组溶瘤病毒，其中所述HSV IE启动子是IE 4/5启动子。8.根据权利要求1所述的重组溶瘤病毒，其中所述重组溶瘤病毒包含编码ICP6基因内的标志物的核酸。9.一种药物组合物，其包含：根据权利要求1所述的重组溶瘤病毒，以及药学上可接受的载剂。10.一种药物组合物，其包含：根据权利要求1所述的重组溶瘤病毒、抗癌剂以及药学上可接受的载剂。11.根据权利要求10所述的药物组合物，其中所述抗癌剂是检查点抑制剂。12.根据权利要求10所述的药物组合物，其中所述抗癌剂是PARP抑制剂。13.根据权利要求12所述的药物组合物，其中所述PARP抑制剂是奥拉帕利、芦卡帕利、尼拉帕利、他拉唑帕利、维立帕利、帕米帕利、CEP 9722、E7016或3
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氨基苯甲酰胺。14.一种用于杀死受试者的肿瘤细胞的方法，其包括：向受试者施用有效量的根据权利要求1所述的重组溶瘤病毒。15.一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1所述的重组溶瘤病毒。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述癌症是慢性癌症。17.根据权利要求15所述的方法，其中所述癌症是炎性慢性癌症。18.根据权利要求15所述的方法，其中所述癌症是表达CD47的癌症。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述表达CD47的癌症选自胶质母细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、白血病和淋巴瘤。20.根据权利要求15所述的方法，其中施用是通过肿瘤内、全身性或腔内施用进行的。21.一种用于受试者的免疫调节的方法，其包括施用有效量的根据权利要求1所述的重组溶瘤病毒。22.根据权利要求21所述的方法，其中免疫调节包括活化自然杀伤(NK)细胞。23.根据权利要求22所述的方法，其中NK细胞的活化被测量为细胞介导的抗体依赖性细胞毒性的诱导。24.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：余建华，M，
申请(专利权)人：希望之城，
类型：发明
国别省市：