FGF-2纳米抗体在制备治疗银屑病药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了FGF

【技术实现步骤摘要】
FGF
‑
2纳米抗体在制备治疗银屑病药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，特别涉及FGF
‑
2纳米抗体在制备治疗银屑病药物中的应用。

技术介绍

[0002]牛皮癣是一种常见的慢性炎症性皮肤病，影响全球2
‑
3％的人口。其特征是角质形成细胞异常分化和炎症细胞浸润真皮和表皮。银屑病的确切发病机制尚不清楚，但银屑病皮损的主要特征是角质形成细胞过度增殖，长期释放促炎因子与抗菌肽等刺激免疫细胞，激活的免疫细胞释放炎症因子等再次刺激角质形成细胞，以循环诱导银屑病形成。
[0003]现阶段临床治疗银屑病的生物制剂主要包括TNF抑制剂(依那西普、阿达木单抗、英夫利昔单抗)、IL
‑
12/23抑制剂(乌司奴单抗)、IL
‑
17抑制剂和IL
‑
23抑制剂(古赛库单抗)。这四类生物制剂通过靶向炎症因子，在抗炎层面上发挥治疗作用。
[0004]FGF
‑
2是典型的促成纤维细胞增殖及促血管新生因子，重组FGF
‑
2已经开发为外用药物用于治疗难愈性创伤，就是基于FGF
‑
2所具有的对多种皮肤细胞的促增殖活性。
[0005]目前，无研究报道靶向FGF
‑
2对银屑病的影响。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供FGF
‑
2纳米抗体在制备治疗银屑病药物中的应用。
[0007]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：FGF
‑
2纳米抗体在制备治疗银屑病药物中的应用，是专利技术人首次发现以FGF
‑
2为靶点能够有效缓解银屑病得到的研究成果。
[0008]所述的FGF
‑
2纳米抗体的氨基酸序列如下所示：
[0009]MLQESGGDLVQPGGSLRLSCEVSGSQFSINDMGWYRQAPGKRREVVAGISSVGRTMYGDPVKGRFTISRDNAKNMVYLQMNRLKPEDTAVYYCHLYGDYRGTGFWGKGTQVTVSSEPKTPKPHHHHHH。
[0010]所述的FGF
‑
2纳米抗体的编码核酸的序列优选如下所示：
[0011]ATGCTGCAGGAGTCTGGGGGAGACTTGGTGCAGCCTGGGGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGAAGTTTCTGGAAGCCAATTCAGTATCAATGACATGGGCTGGTACCGCCAGGCTCCAGGGAAGCGACGCGAGGTGGTCGCAGGTATTAGTAGTGTTGGACGCACAATGTATGGAGACCCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACATGGTGTATCTGCAAATGAACAGACTGAAACCTGAGGACACGGCCGTCTATTACTGTCACCTTTATGGTGACTATAGGGGGACTGGTTTCTGGGGCAAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCGTCGGAACCCAAGACACCAAAACCACATCATCACCATCACCATTAA。
[0012]本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0013]本专利技术以咪喹莫特(IMQ)诱导的银屑病小鼠为模型，探究FGF
‑
2纳米抗体对银屑病的治疗作用。经实验证明，靶向FGF
‑
2可有效抑制咪喹莫特(IMQ)诱导的银屑病小鼠表达的异常增殖，并缓解银屑病小鼠皮肤炎症。这项研究首次阐述了以FGF
‑
2为靶点能够有效缓解银屑病，为银屑病的治疗提供了全新的治疗方案，也为后续以生长因子为靶点治疗银屑病
提供了重要依据。
附图说明
[0014]图1是小量表达Nb
FGF
‑2(M
‑
F3)的SDS
‑
PAGE照片图。
[0015]图2是Nb
FGF
‑2(M
‑
F3)的表达纯化结果图；其中，A为亲和层析纯化图谱，B为SDS
‑
PAG照片图。
[0016]图3是Nb
FGF
‑2(M
‑
F3)缓解IMQ诱导小鼠银屑病的结果图；其中，A为第7天时各组的代表性照片图；B为在第1、3、5和7天时对红斑、浸润及鳞屑以及三个方面的总PASI评分结果。
[0017]图4是Nb
FGF
‑2(M
‑
F3)对银屑病小鼠皮肤组织病理学的影响结果图；其中，A为皮肤组织H&E切片图；B为皮肤组织Ki67免疫组化图；C为皮肤组织CD31免疫组化图；D为分析A、B和C得到的柱状图；数据以平均数
±
标准差(SD)表示，*p<0.05，**p<0.01；***p<0.001。
[0018]图5是Nb
FGF
‑2(M
‑
F3)抑制IMQ诱导的小鼠银屑病相关炎症因子表达的结果图；其中，A
‑
D为取小鼠皮损部位皮肤，提取RNA进行Q
‑
PCR检测炎症因子IL
‑
1β、IL
‑
6、IL
‑
17和IL
‑
23的mRNA水平；数据以平均数
±
标准差(SD)表示，*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001。
[0019]图6是Nb
FGF
‑2(M
‑
F3)抑制小鼠皮肤银屑病相关蛋白的表达结果图。
[0020]图7是Nb
FGF
‑2(M
‑
F3)抑制IMQ诱导的银屑病小鼠相关信号通路结果图。
具体实施方式
[0021]下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。
[0022]实施例1pPICzαA
‑
Nb
FGF
‑2(M
‑
F3)重组质粒的构建
[0023]前期，我们实验室以FGF
‑
2(购自Gibco，13256029)为抗原免疫羊驼，采用噬菌体展示技术构建了FGF
‑
2纳米抗体噬菌体库，并筛选得到了一株FGF
‑
2纳米抗体并构建在原核表达载体中，而在真核系统中表达可能会出现糖基化位点，减少外源蛋白中的N
‑
糖基化位点数量可能会提高其分泌表达的水平。因此通过糖基化预测网站(http://www.cbs.dtu.dk/services/NetNGlyc/)预测F3序列的糖基化位点，改变糖基化位点本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.FGF
‑
2纳米抗体在制备治疗银屑病药物中的应用。2.根据权利要求1所述的FGF
‑
2纳米抗体在制备治疗银屑病药物中的应用，其特征在于：所述的FGF
‑
2纳米抗体的氨基酸序...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊盛，唐健，周振龙，廖佰鑫，谢秋玲，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：