表达嵌合抗原受体的免疫活性细胞制造技术

本发明专利技术以提高免疫活性细胞的细胞杀伤活性、提高对于癌症等疾病的治疗效果为课题，提供一种免疫活性细胞，其二酰基甘油激酶活性降低、且表达融合蛋白和嵌合抗原受体，该融合蛋白包含IL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】表达嵌合抗原受体的免疫活性细胞


[0001]本专利技术涉及表达嵌合抗原受体的免疫活性细胞和含有其的医药。

技术介绍

[0002]近年来，免疫细胞治疗作为针对癌症的治疗方法备受关注。免疫细胞治疗是用在患者体外增殖和活化的免疫细胞对患者进行给药、以该免疫细胞攻击癌细胞的治疗方法。免疫细胞治疗与以往的外科治疗、放疗、化疗三大疗法相比具有几乎没有副作用的优点。免疫细胞治疗中有各种治疗方法，其中，使用负责自然免疫、对癌细胞具有细胞杀伤活性的T细胞(细胞毒性T细胞：CTL)的治疗备受关注。
[0003]此外，为了使细胞毒性T细胞识别、攻击在癌细胞表面表达的特定抗原，也进行了嵌合抗原受体(CAR)在细胞毒性T细胞表面的表达。
[0004]专利文献1和2中公开了由多能干细胞经造血前体细胞和CD4CD8双阳性T细胞而诱导CD8阳性细胞毒性T细胞的方法，专利文献1中公开了可在CD8阳性细胞毒性T细胞中表达嵌合抗原受体的要点。
[0005]专利文献3中公开了由多能干细胞诱导细胞毒性T细胞的方法，公开了可在细胞毒性T细胞中表达嵌合抗原受体、进一步可表达包含白细胞介素15(IL
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15)和白细胞介素15受体α亚基(IL
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15Rα)的融合蛋白的要点。非专利文献1中也公开了该融合蛋白。
[0006]另一方面，非专利文献2中有通过在细胞毒性T细胞中敲除二酰基甘油激酶基因可提高细胞毒性T细胞的抗癌活性的记载。
[0007]但是，还没有在T细胞等免疫活性细胞中将IL
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15和IL
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15Rα的融合蛋白的表达与二酰基甘油激酶基因的敲除进行组合的例子，虽然已知各种免疫活性细胞的突变，但并无将其组合的动机，此外对于其效果也不清楚。
[0008]现有技术文献
[0009]专利文献
[0010]专利文献1：WO2017/221975
[0011]专利文献2：WO2018/135646
[0012]专利文献3：WO2020/013315
[0013]非专利文献
[0014]非专利文献1：Proc.Natl.Acad.Sci.(美国科学院院刊)113，E7788
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e7797(2016)。
[0015]非专利文献2：Cancer Res.(癌症研究)2018年8月，15；78(16):4692
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4703。

技术实现思路

[0016]专利技术所要解决的课题
[0017]本专利技术的课题在于，提高免疫活性细胞的细胞杀伤活性、提高对于癌症等疾病的治疗效果。
[0018]用于解决课题的方法
[0019]为了解决上述课题，本专利技术人等进行了深入研究。结果发现，通过使表达嵌合抗原受体的细胞毒性T细胞等免疫活性细胞中的二酰基甘油激酶活性降低、并且表达包含IL
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15和IL
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15Rα的融合蛋白(IL
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15/IL
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15Rα)，能够显著提高对癌细胞等的细胞毒性、提高治疗效果，从而完成了本专利技术。
[0020]本专利技术的宗旨如下。
[0021][1]一种免疫活性细胞，其二酰基甘油激酶活性降低、且表达包含IL
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15和IL
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15受体α亚基(IL
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15Rα)的融合蛋白(IL
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15/IL
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15Rα)和嵌合抗原受体。
[0022][2]根据[1]所述的免疫活性细胞，保持有1种以上具有使细胞内的二酰基甘油激酶活性降低的突变的二酰基甘油激酶基因。
[0023][3]根据[1]或[2]所述的免疫活性细胞，前述融合蛋白为跨膜型蛋白。
[0024][4]根据[1]～[3]中任一项所述的免疫活性细胞，其为CD5阳性且CD8β阳性。
[0025][5]根据[1]～[4]中任一项所述的免疫活性细胞，其为T细胞。
[0026][6]根据[1]～[5]中任一项所述的免疫活性细胞，其从多能干细胞分化诱导。
[0027][7]根据[6]所述的免疫活性细胞，多能干细胞为人工多能干细胞。
[0028][8]一种医药组合物，含有[1]～[7]中任一项所述的免疫活性细胞。
[0029][9]根据[8]所述的医药组合物，其用于治疗癌症。
[0030][10]根据[9]所述的医药组合物，癌症为固体癌。
[0031][11]一种癌症的治疗方法，包括用治疗有效剂量的[1]～[7]中任一项所述的免疫活性细胞对需要治疗的对象进行给药的工序。
[0032][12][1]～[7]中任一项所述的免疫活性细胞在癌症治疗用医药组合物的制造中的应用。
[0033][13]根据[1]～[7]中任一项所述的免疫活性细胞，其用于治疗癌症。
[0034][14]一种表达嵌合抗原受体的免疫活性细胞的制造方法，包括(a)准备表达嵌合抗原受体的免疫活性细胞的工序，
[0035]前述免疫活性细胞中，二酰基甘油激酶活性降低、且表达包含IL
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15和IL
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15受体α亚基(IL
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15Rα)的融合蛋白(IL
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15/IL
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15Rα)。
[0036][15]根据[14]所述的方法，在工序(a)之前包括(b)使多能干细胞分化为免疫活性细胞的工序。
[0037][16]根据[15]所述的方法，工序(b)中得到的细胞表达嵌合抗原受体。
[0038][17]根据[16]所述的方法，工序(b)中使用表达嵌合抗原受体的多能干细胞或在工序(b)中的任一阶段表达嵌合抗原受体。
[0039][18]根据[15]～[17]中任一项所述的方法，工序(b)中得到的细胞的二酰基甘油激酶活性降低。
[0040][19]根据[18]所述的方法，在工序(b)中使用二酰基甘油激酶活性降低的多能干细胞或在工序(b)中的任一阶段进行使二酰基甘油激酶活性降低的突变。
[0041][20]根据[15]～[19]中任一项所述的方法，工序(b)中得到的细胞表达包含IL
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15和IL
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15受体α亚基(IL
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15Rα)的融合蛋白(IL
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15/IL
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15Rα)。
[0042][21]根据[20]所述的方法，工序(b)中使用表达IL
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15/IL
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15Rα的多能干细胞或在工序(b)中的任一阶段表达IL
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15/IL
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15Rα。
[0043]专利技术效果
[0044]根据本专利技术，能够在癌症等的细胞免疫疗法中发挥显著优异的细胞毒性效应。此外，可通过由多能干细胞制备细胞毒性T细胞等免疫活性细胞，稳定提供本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种免疫活性细胞，其二酰基甘油激酶活性降低、且表达融合蛋白即IL
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15/IL
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15Rα和嵌合抗原受体，所述融合蛋白即IL
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15/IL
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15Rα包含IL
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15和IL
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15受体α亚基即IL
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15Rα。2.根据权利要求1所述的免疫活性细胞，保持有1种以上具有使细胞内的二酰基甘油激酶活性降低的突变的二酰基甘油激酶基因。3.根据权利要求1或2所述的免疫活性细胞，所述融合蛋白为跨膜型蛋白。4.根据权利要求1～3中任一项所述的免疫活性细胞，其为CD5阳性且CD8β阳性。5.根据权利要求1～4中任一项所述的免疫活性细胞，其为T细胞。6.根据权利要求1～5中任一项所述的免疫活性细胞，其从多能干细胞分化诱导。7.根据权利要求6所述的免疫活性细胞，多能干细胞为人工多能干细胞。8.一种医药组合物，含有权利要求1～7中任一项所述的免疫活性细胞。9.根据权利要求8所述的医药组合物，其用于治疗癌症。10.根据权利要求9所述的医药组合物，癌症为固体癌。11.一种癌症的治疗方法，包括用权利要求1～7中任一项所述的免疫活性细胞的治疗有效剂量对需要治疗的对象进行给药的工序。12.权利要求1～7中任一项所述的免疫活性细胞在癌症治疗用医药组合物的制造中的应用。13.根据权利要求1～7中任一项所述的免疫活性细胞，其用于治疗癌症。14.一种表达嵌合抗原受体的免疫活性细胞的制造方法，包括(a)准备表达嵌合抗原受体的免疫活性细胞的工序，所述免疫活性细胞中二酰基甘油激酶活性降低、且表达融合蛋白即IL
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【专利技术属性】
技术研发人员：金子新，上田树，
申请(专利权)人：国立大学法人京都大学，
类型：发明
国别省市：