一种肽-黄酮纳米脂质体的薄膜分散-双频超声制备方法技术

本发明专利技术公开了一种肽

【技术实现步骤摘要】
一种肽
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黄酮纳米脂质体的薄膜分散
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双频超声制备方法


[0001]本专利技术涉及纳米脂质体制备
，特指一种以玉米肽、槲皮素、卵磷脂和胆固醇为原料，采用双频超声辅助薄膜分散技术制备肽
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黄酮纳米脂质体的方法。

技术介绍

[0002]脂质体是由磷脂和胆固醇组成的球形双层囊泡，由于其独特的双层膜结构具有良好的生物相容性，通常被用作活性物质载体，可同时包埋亲水和疏水性物质从而提高稳定性。与传统脂质体相比，纳米脂质体由于其较小的纳米尺寸能够更好地保护生物活性物质的活性，促进其在体内更好的吸收，减缓其提前降解，现在是用于保护和释放生物活性物质最有效的递送系统之一，在食品科学与营养健康领域中发挥着越来越重要的作用。
[0003]肽是由蛋白质经过蛋白酶适当水解得到的，具有抗氧化、降血压、抑菌等作用，具有良好的发展前景。但它的稳定性较差，容易受到温度、pH等环境因素的影响，这些会对其生物活性和生物利用率产生潜在影响。玉米肽是以玉米黄粉为原料经蛋白酶水解得到的一类具有抗氧化、降血压、醒酒保肝等作用的生物活性肽，富含人体所需的氨基酸，营养价值很高，可以作为各类食品的营养增补剂。
[0004]黄酮是一类脂溶性物质，具有抗氧化、抗癌、抗病毒、抗菌等作用，但在加工和储藏过程中其稳定性极易受到温度、氧、pH等环境因素的影响，且由于其水溶性极低，生物相容性差，这些会对其生物活性和应用范围产生潜在影响。槲皮素是一种天然的黄酮类物质，具有很强的抗氧化性，营养价值很高。
>[0005]常用的脂质体制备方法为逆向蒸发法、溶剂注入法、薄膜分散法等。此类方法的不足表现为制备得到的脂质体粒径较大，稳定性差，这些会对脂质体包埋的活性物质的活性产生潜在影响。
[0006]为了解决上述问题，本专利技术创建了一种双频超声辅助薄膜分散的方法，研究玉米肽
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槲皮素纳米脂质体的双频超声辅助薄膜分散制备法。双频超声波是指两个不同频率的超声波同步工作的模式，两个超声驻波的叠加效应，存在比单频超声波更强的物理作用力，剪切力更大，对目标对象的分散效果更好。采用这种方法制备的脂质体粒径更小且分布均匀，一般在纳米级，可以提高脂质体的水溶性和环境稳定性。利用这种方法制备的脂质体负载玉米肽和槲皮素，一方面可以保护生物活性物质的活性，减缓其提前降解；另一方面可以改善槲皮素不溶于水的问题，提高其生物相容性。

技术实现思路

[0007]为解决现有问题，该专利技术采用双频超声辅助薄膜分散处理技术制备玉米肽
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槲皮素纳米脂质体，探究复合物的理化特性、结构特性、生物活性、稳定性的变化。
[0008]本专利技术中玉米肽
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槲皮素纳米脂质体，是由以下质量份的原料制备而成：
[0009]玉米肽50
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130份，
[0010]槲皮素1
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10份，
[0011]卵磷脂67.5
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157.5份，
[0012]胆固醇22.5
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52.5份，
[0013]无水乙醇10份，
[0014]蒸馏水10份。
[0015]优选的玉米肽
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槲皮素纳米脂质体由以下质量份的原料制备而成：
[0016]玉米肽90份，
[0017]槲皮素5份，
[0018]卵磷脂112.5份，
[0019]胆固醇37.5份，
[0020]无水乙醇10份，
[0021]蒸馏水10份。
[0022]上述一种玉米肽
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槲皮素纳米脂质体的薄膜分散
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双频超声制备方法，按照下述步骤进行：
[0023](1)将玉米肽溶解到蒸馏水中，磁力搅拌完全溶解；得到浓度为(5
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13)mg/mL的玉米肽溶液；
[0024](2)将卵磷脂和胆固醇溶解到无水乙醇中，磁力搅拌至完全溶解；得到脂质体溶液，玉米肽与脂质体的质量比例为(3:3～3:7)；
[0025](3)将槲皮素加入到步骤(2)的脂质体溶液中，磁力搅拌至完全溶解；得到浓度为(0.1～1)mg/mL的槲皮素脂质体溶液；
[0026](4)将步骤(3)的槲皮素脂质体溶液转移到圆底烧瓶使用旋转蒸发仪旋转蒸发形成薄膜；
[0027](5)将步骤(4)制备的薄膜放在干燥皿中干燥10
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12h；
[0028](6)将步骤(1)的玉米肽溶液加入到步骤(5)的圆底烧瓶中，并放在水浴锅中水合60min；
[0029](7)将步骤(6)得到的溶液置于超声波加工装置中进行双频超声处理，得到玉米肽
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槲皮素纳米脂质体。
[0030]其中步骤(1)中优选玉米肽的浓度为9mg/mL。
[0031]其中步骤(1)中玉米肽的制备方法按照下述步骤进行：将10.86mg/mL玉米蛋白(蛋白含量58.7％)在pH 8.5，温度40℃，碱性蛋白酶(酶活269U/mg，酶底比7329U/g蛋白)，20/28kHz双频超声波处理，功率150W，间歇比10s/5s)，超声4次(每次超声工作40min，超声停止20min)下酶解300min，然后用3kDa超滤膜过滤收集透过液，经纯化透析脱盐处理后得到一个11肽，其氨基酸组成为亮氨酸
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苏氨酸
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甘氨酸
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赖氨酸
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组氨酸
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脯氨酸
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脯氨酸
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甘氨酸
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丙氨酸
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天冬氨酸
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谷氨酰胺，该肽占玉米肽的比例为90％。
[0032]其中步骤(2)中所述的玉米肽与脂质体的质量比例优选为3:5。
[0033]其中步骤(3)中优选槲皮素的浓度为0.5mg/mL。
[0034]其中步骤(7)中所述的双频超声工作模式为：双频为20/28kHz；功率为：200W、300W、400W、500W；间歇比为：10s/5s、20s/5s、30s/5s、40s/5s；时间为：5min、8min、11min、14min。优选的超声条件为：功率为300W、间歇比为20s/5s、时间为8min。
[0035]本专利技术的有益效果在于：
[0036](1)本专利技术实现了脂质体同时对玉米肽和槲皮素两种生物活性成分的负载，构建了一种玉米肽
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槲皮素纳米脂质体，拓宽了肽和黄酮在食品、保健品、医药及化妆品等多领域的应用。
[0037](2)本专利技术在制备玉米肽
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槲皮素纳米脂质体的过程中，使用了双频超声辅助薄膜分散处理技术替代单一薄膜分散法或者薄膜分散
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单频超声法，通过双频超声驻波的叠加效应，形成更强的物理力，提高了槲皮素的包埋率，降低了复合物的尺寸，使本专利技术的复合物具有槲皮素负载能力高、产量高、抗氧化活性强、粒本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.玉米肽
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槲皮素纳米脂质体，其特征在于是由以下质量份的原料制备而成：玉米肽50
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130份，槲皮素1
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10份，卵磷脂67.5
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157.5份，胆固醇22.5
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52.5份，无水乙醇10份，蒸馏水10份。2.根据权利要求1所述的玉米肽
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槲皮素纳米脂质体，其特征在于是由以下质量份的原料制备而成：玉米肽90份，槲皮素5份，卵磷脂112.5份，胆固醇37.5份，无水乙醇10份，蒸馏水10份。3.权利要求1或2所述的玉米肽
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槲皮素纳米脂质体的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：(1)将玉米肽溶解到蒸馏水中，磁力搅拌完全溶解；得到浓度为(5
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13)mg/mL的玉米肽溶液；(2)将卵磷脂和胆固醇溶解到无水乙醇中，磁力搅拌至完全溶解；得到脂质体溶液，玉米肽与脂质体的质量比例为(3:3～3:7)；(3)将槲皮素加入到步骤(2)的脂质体溶液中，磁力搅拌至完全溶解；得到浓度为(0.1～1)mg/mL的槲皮素脂质体溶液；(4)将步骤(3)的槲皮素脂质体溶液转移到圆底烧瓶使用旋转蒸发仪旋转蒸发形成薄膜；(5)将步骤(4)制备的薄膜放在干燥皿中干燥10
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12h；(6)将步骤(1)的玉米肽溶液加入到步骤(5)的圆底烧瓶中，并放在水浴锅中水合60min；(7)将步骤(6)得到的溶液置于超声波加工装置中进行双频超声处理，得到玉米肽
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槲皮素纳米脂质体。4.根据权利要求3所述的玉米肽
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槲皮素纳米脂质体制备方法，其特征在于其中步骤(1)中优选玉米肽的浓度为9mg/mL；玉米肽是由10.86mg/mL玉米蛋白(蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：曲文娟，杨斯宇，郭甜甜，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：