产3,4-二甲基苯甲醛的鸡肠球菌及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及产3,4

【技术实现步骤摘要】
产3,4
‑
二甲基苯甲醛的鸡肠球菌及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及产3,4
‑
二甲基苯甲醛的鸡肠球菌及其应用。

技术介绍

[0002]3,4
‑
二甲基苯甲醛(3,4
‑
dimethyl
‑
benzaldehyde)为无色或淡黄色透明液体，有杏仁味，被广泛应用于医药、农药、香料、饮料、食品等精细化学品的合成，尤其是用于合成聚丙烯成核透明剂，是新一代的无毒塑料助剂，广泛用于食品包装材料。
[0003]专利CN201911074432.6公开了3,4
‑
二甲基苯甲醛在制备害虫引诱剂中的应用。从中国月季顶空挥发物中分离得到3,4
‑
二甲基苯甲醛，经GC
‑
EAD、EAG、嗅觉行为、产卵行为生物测试和田间产卵试验，验证3,4
‑
二甲基苯甲醛对棉铃虫雌蛾具有很好的引诱效果，以实现害虫的无公害防治。
[0004]3,4
‑
二甲基苯甲醛的合成反应最早始于1897年Gattermann Koch对芳环上引入甲酰基的研究。有关3,4
‑
二甲基苯甲醛的合成方法主要有:
①
以1,2,4
‑
三甲苯为原料的间接电氧化法；
②
以邻二甲苯为原料，以HF
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BF3为催化剂或以AlCl3为主催化剂的合成方法。但这些合成方法存在电流效率制约、催化剂强腐蚀性或反应选择性下降的不利因素。
[0005]专利CN201811605384.4公开了一种3,4
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二甲基苯甲醛的环保合成方法，以无水三氯化铝和三氯化硼作为复合催化剂，不使用HF
‑
BF3超强酸作催化剂，三氯化硼可循环使用，以减少生产时“三废”的产生。但三氯化硼存在泄漏风险。
[0006]而微生物法制备具有天然代谢产物对环境友好、条件温和、副产物少、对设备要求低等优点，但现有文献中对3,4
‑
二甲基苯甲醛的微生物来源研究较少，已知有蓝江林等人(蓝江林，刘波，陈峥，等.菌株LPF
‑
1(Brevibacillus brevis LPF
‑
1)降解猪粪过程中降解物质的GS
‑
MS分析[J].福建农业学报，2011，26(6):9.)在菌株LPF
‑
1(Brevibacillus brevis LPF
‑
1)的发酵液中检测出含有3,4
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二甲基苯甲醛，但文献中未提及3,4
‑
二甲基苯甲醛的产量。

技术实现思路

[0007]为丰富产3,4
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二甲基苯甲醛的微生物来源，本专利技术从自然界中筛选获得一株具有产3,4
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二甲基苯甲醛较强能力的鸡肠球菌(Enterococcus gallinarum)菌株，为微生物法制备3,4
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二甲基苯甲醛提供可能，该菌株系天然代谢产物，解决现有技术中污染大、成本高、设备要求高、副产物存在毒性等技术问题，为3,4
‑
二甲基苯甲醛的生产制备提供一种可利用的微生物。
[0008]本专利技术提供了一株产3,4
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二甲基苯甲醛的鸡肠球菌(Enterococcus gallinarum)菌株，保藏编号为CGMCC NO.25148。保藏时间为2022年06月21日，保藏中心为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编为100101。
[0009]其中，上述产3,4
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二甲基苯甲醛的鸡肠球菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO:1所示。
[0010]其中，上述产3,4
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二甲基苯甲醛的鸡肠球菌，产3,4
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二甲基苯甲醛的量为1.833mg/L。
[0011]本专利技术还提供了一种微生物菌剂，其含有上述产3,4
‑
二甲基苯甲醛的鸡肠球菌。
[0012]进一步地，所述微生物菌剂为液体菌剂或固体菌剂。
[0013]更进一步地，所述液体菌剂或固体菌剂是含有上述鸡肠球菌活细胞、冷冻干燥得到的鸡肠球菌干菌体、固定化的鸡肠球菌细胞中的至少一种。
[0014]本专利技术还提供一种冻干菌粉，其含有上述产3,4
‑
二甲基苯甲醛的鸡肠球菌。
[0015]进一步地，所述冻干菌粉按如下方法制备：将上述产3,4
‑
二甲基苯甲醛的鸡肠球菌甘油保存管活化后接种于培养基中富集培养，37℃培养24
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48h，培养结束后离心收集菌体，向其添加海藻糖、维生素C、抗性糊精、山梨糖醇、脱脂乳粉作为冻干保护剂，混合均匀后进行真空冷冻干燥，即得。
[0016]本专利技术还提供上述鸡肠球菌在产3,4
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二甲基苯甲醛方面的应用。
[0017]具体地，所述应用是将鸡肠球菌在发酵培养基中，37℃静置培养2天，pH值为7.0，所述鸡肠球菌的接种量为2％(
×
107cfu/mL)。
[0018]更具体地，所述发酵培养基的组成为每升培养基中含有16g葡萄糖，10g胰蛋白胨，2.5g酵母粉，5g牛肉膏，3.85g牛脑，4.9g牛心，0.5g吐温80，1g柠檬酸铵，2.5g氯化钠，2.5g无水乙酸钠，0.05g硫酸镁，0.025g硫酸锰，1.25g磷酸氢二钠，1g磷酸氢二钾。
[0019]采用上述发酵工艺，该菌株所产3,4
‑
二甲基苯甲醛含量为1.833mg/L。
[0020]本专利技术还提供了上述鸡肠球菌菌株、微生物菌剂或冻干菌粉在制备害虫引诱剂中的应用。
[0021]进一步地，所述应用是将上述鸡肠球菌菌株、微生物菌剂或冻干菌粉添加在发酵培养基中培养，制得含有3,4
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二甲基苯甲醛和辅料的害虫引诱剂。
[0022]进一步地，所述辅料是增溶剂、增效剂、其他代谢产物中至少一种。
[0023]进一步地，所述增溶剂是乙醇、丙酮、聚山梨酯、聚乙二醇或甲醇中至少一种。
[0024]进一步地，所述增效剂为3
‑
苯丙醛、桉树脑、α
‑
松萜、3
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吡啶甲酸乙酯或4
‑
甲氧基苯甲醛中至少一种。
[0025]进一步地，所述其他代谢产物为乙酸、己酸、辛酸、壬酸、异戊醇、正己醇或苯乙醇中至少一种。
[0026]本专利技术还提供了上述鸡肠球菌菌株、微生物菌剂或冻干菌粉在制备成核透明剂、农药、食品、日用品、香料或医药中间体中的应用。
[0027]有益效果：
[0028]本专利技术从自然界中成功分离出了一株可产3,4
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二甲基苯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.产3,4
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二甲基苯甲醛的鸡肠球菌(Enterococcus gallinarum)菌株，其特征在于：保藏编号为CGMCC NO.25148。2.如权利要求1所述的菌株，其特征在于：其产3,4
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二甲基苯甲醛的量为1.833mg/L。3.一种微生物菌剂，其特征在于：含有权利要求1所述的产3,4
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二甲基苯甲醛的鸡肠球菌。4.如权利要求3所述的微生物菌剂，其特征在于：所述微生物菌剂为液体菌剂或固体菌剂。5.如权利要求4所述的微生物菌剂，其特征在于：所述液体菌剂或固体菌剂是含有权利要求1所述的产3,4
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二甲基苯甲醛的鸡肠球菌活细胞、冷冻干燥得到的鸡肠球菌干菌体、固定化的鸡肠球菌细胞中的至少一种。6.一种冻干菌粉，其特征在于：含有权利要求1所述的产3,4
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二甲基苯甲醛的鸡肠球菌。7.权利要求1所述的产3...

【专利技术属性】
技术研发人员：于惠，王松涛，沈才洪，赵秋伟，
申请(专利权)人：泸州老窖股份有限公司，
类型：发明
国别省市：