一株竹笋源发酵乳杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术属于食品加工领域，涉及一株竹笋源发酵乳杆菌及其应用。本发明专利技术提供了一株从自然发酵竹笋产品中筛选出的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)TJJ

【技术实现步骤摘要】
一株竹笋源发酵乳杆菌及其应用


[0001]本专利技术属于食品加工领域，涉及一株竹笋源发酵乳杆菌及其应用。

技术介绍

[0002]竹笋(Bamboo shoots)是竹鞭或秆基上的芽萌发分化而成的膨大的芽和幼嫩的茎，又称竹胎、竹肉等，脆嫩鲜美，营养丰富。中国是竹产业发展规模最大的国家，中国竹资源面积、种类、储量和加工均居世界前列，其中竹林面积641万hm2，约占世界竹林总面积的20％；中国现有竹子39属，837种，约占世界总量的50％。丰富的竹林资源，也让我国成为竹笋大国，很多地区春有春笋，冬有冬笋，夏秋有鞭笋以及亚热带地区的丛生竹笋，几乎周年供应。竹笋现已成为我国16个大宗出口农产品之一，在中国被誉为“蔬食之冠”，在欧洲被列为世界上5种最流行的健康食品之一，有着极高的食用价值，是我国传统佳肴，且一般生长在无污染的环境。
[0003]据统计，我国每年约有六成竹笋用于加工，主要产品有干制笋、盐渍笋、清水笋、调味笋等。清水竹笋是目前生产量最大的竹笋加工制品，是竹笋经修整、预煮、装罐、注汤、杀菌、冷却等工序制成，被广泛应用于餐饮和竹笋深加工，作为再加工的竹笋原料使用。但清水竹笋在加工过程中反复加热煮制，竹笋原料中许多可溶性营养物质流失在不被人们利用的汤汁中，造成营养物质浪费和环境污染。按现行轻工标准QB/T 1406
‑
2014竹笋罐头的规定，竹笋罐头固形物含量“优级品不应低于55％，合格产品不应低于50％”，意味着清水罐头中有接近50％质量的竹笋液被浪费。
[0004]乳酸菌是被人们普遍接受和应用的一类益生菌，自然界中含量丰富。竹笋产品中，自然发酵酸笋因其特殊的风味备受广西、湖南百姓的喜爱，更是作为柳州螺蛳粉的配料风靡全国。因此本专利技术以湖南自然发酵酸笋为原料，筛选其中能形成特殊风味的优势菌发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01，并将该菌用于清水罐头竹笋产品中废弃竹笋液的发酵，为解决竹笋罐头大量笋汁被浪费问题提供了一个新途径，同时也开发了一款新的竹笋益生饮料产品。

技术实现思路

[0005]本专利技术人研究发现这些清水竹笋罐头的竹笋液中含有大量还原糖、多糖、酚类、黄酮、甾醇、有机酸和氨基酸，且风味物质丰富，是很好的竹笋饮料产品的原料，为了水竹笋罐头大量笋汁被浪费问题。本专利技术提供以下技术方案：
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供一种发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01，该菌株在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC NO:M 20211688，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，保藏日期为2021年12月29日。
[0007]本专利技术的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)菌株TJJ
‑
01具有图1所示革兰氏染色阳性特征，其16S rRNA的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。其MRS培养基中的菌落形态如图2所示。将发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)菌株TJJ
‑
01的16S rRNA的核苷酸
序列在NCBI进行同源性比对，将比对结果使用MEGA软件中的Neighbor
‑
joining算法构建系统发育树，发育树如图3所示。
[0008]本专利技术的液体增殖培养基的制备方法如下：所述液体增殖培养基的配制方法：称取蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母膏5.0g，柠檬酸氢二铵[(NH4)2HC6H5O7]2.0g，葡萄糖(C6H
12
O6·
H2O)20.0g，乙酸钠(CH3COONa
·
3H2O)5.0g，磷酸氢二钾(K2HPO4·
3H2O)2.0g，硫酸镁(MgSO4·
7H2O)0.50g，硫酸锰(MnSO4·
H2O)0.25g，吐温80量取1.0mL，800mL清水罐头竹笋产品的废弃竹笋液加入200mL蒸馏水。将MRS液体培养基中含发酵乳杆菌菌株(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01数为1.0
×
106cfu/ml的菌液40ml接入上述高密度增殖培养基，37℃培养72h，测得该液体培养基中发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01含量为1.0
×
10
10
cfu/ml。利用超速离心机对发酵后的菌液进行离心，在转速为4000
‑
6000r/min的条件下离心10min，去上清收集沉积物。
[0009]将收集到的沉积物加入至复配保护剂，保护剂配方为：海藻糖8％、竹笋全粉纳米颗粒2％、牛血清蛋白6％、脱脂乳2％、赖氨酸1％(各成分所占百分比皆为占沉积物的质量百分比)。用振荡器混匀，制成菌悬液。再将其盛入冷冻平皿中，随后先置4℃冰箱平衡30min后，移入
‑
30℃冰箱60min，然后置
‑
80℃冰箱60min，再在冷冻真空干燥机上冷冻干燥14h(冻干仪腔体温度为
‑
60℃
‑
70℃，压力为0.006Pa)，测得该发酵乳杆菌菌株(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01冻干粉活菌数为10
11
cfu/g，将冻干粉密封保存于4℃冰箱中备用。
[0010]本专利技术还提供了上述菌株/菌剂在清水罐头竹笋产品废弃竹笋液中的应用方法。将上述发酵乳杆菌菌株(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01冻干粉按1
‑
4％的接种量接入调糖后的废弃竹笋液中。竹笋液调糖方法是加入1
‑
2％的葡萄糖或乳糖。将接好冻干菌粉的竹笋液在37℃发酵36
‑
72h，与调糖自然发酵、新开罐竹笋液比较，该发酵乳杆菌菌株(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01冻干粉发酵竹笋液风物物质丰富、口感好、抗氧化性强。
附图说明
[0011]图1竹笋源发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01革兰氏染色特征；
[0012]图2竹笋源发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01在MRS培养基中的菌落形态；
[0013]图3发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)菌株TJJ
‑
01的系统进化树；
[0014]图4挥发性风味物质种类柱状图；
[0015]图5各实施例的DPPH
·
自由基清除能力；
[0016]图6各实施例的羟基自由基清除能力；
[0017]图7实施例的总还原能力。
具体实施方式
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株发酵乳杆菌，其特征在于，所述发酵乳杆菌为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M 20211688。2.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂含有权利要求1所述的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01。3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂还含有培养基。4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述培养基包含液体增殖培养基和冻干保护剂。5.根据权利要求4所述的菌剂，其特征在于，所述发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01在液体增殖培养基中的含量为1.0
×
106‑
10
10
CFU/mL；所述发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)TJJ
‑
01在冻干保护剂中含量为1.0
×
10
11
CFU/mL。6.根据权利要求4或5所述的菌剂，其特征在于，所述液体增殖培养基的配制方法：称取蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母膏5.0g，柠檬酸氢二铵2.0g，葡萄糖20.0g，乙酸钠5.0g，磷酸氢二钾2.0g，硫酸镁0.50g，硫酸锰0.25g，吐温80量取1.0mL，800mL清水罐头竹笋产品的废弃竹笋液加入200mL蒸馏水。7.根据权利要求6所述的菌剂，其特征在于，所述冻干保护剂的配方为海藻糖8％、竹笋全粉纳米颗粒2％、牛血清蛋白6％、脱脂乳2％、...

【专利技术属性】
技术研发人员：李珂，李宗军，侯爱香，王远亮，
申请(专利权)人：湖南农业大学，
类型：发明
国别省市：