一株具有预防或治疗龋齿和牙周病功效的植物乳植杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及益生菌筛选与应用技术领域，具体涉及一株具有预防或治疗龋齿和牙周病的植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）及其应用。该菌株是从发酵泡菜中筛选到的，能够显著抑制变异链球菌、牙龈卟啉单胞菌，半放线聚集杆菌等口腔病原菌的生长繁殖，并能在口腔内有效定植，已于2022年3月1日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：M2022174。该菌株可广泛用于制备保健品、药品，以及漱口水、牙膏等口腔护理用品，有效预防或治疗龋齿、牙周病等口腔疾病，促进口腔菌群平衡的恢复。进口腔菌群平衡的恢复。

【技术实现步骤摘要】
一株具有预防或治疗龋齿和牙周病功效的植物乳植杆菌及其应用


[0001]本专利技术涉及功能益生菌筛选与应用
，具体涉及一株具有预防或治疗龋齿和牙周病功效的植物乳植杆菌及其应用。

技术介绍

[0002]口腔是消化系统和呼吸系统的入口，是人体的一个免疫器官，口腔内存在多种厌氧和好氧微生物，如唾液链球菌，发酵乳杆菌，变异链球菌，血链球菌等，这样微生物相互之间制衡，维持健康，一旦致病的微生物大量繁殖，就会导致各种口腔疾病，如龋病、牙周疾病，口腔溃疡，口臭等。病原微生物是主要致病因素，变异链球菌是现今公认的龋病主要致病菌，牙龈卟啉单胞菌和伴放线聚集放线菌等是引起牙周病的主要病原菌。
[0003]益生菌是一类通过改善宿主肠道微生物菌群的平衡而发挥作用的活性微生物，能够产生确切的健康功效从而改善宿主的微生态平衡，发挥有益作用。2001 年， 联合国粮农组织（FAO） 和世界卫生组织（WHO）对益生菌做了如下定义：在摄入足够数量的情况下，对宿主产生健康益处的活性微生物。
[0004]越来越多的证据表明，益生菌对于人体的健康影响不仅局限于肠道，还有更广泛的作用范围，如内分泌平衡调节、免疫平衡调节、神经系统调节、呼吸系统调剂等。益生菌还可以与口腔病原微生物粘附，阻止病原微生物的在口腔定植，起着占位、争夺营养或拮抗作用，从而抑制病原菌生物膜的形成，有效预防口腔疾病，在口腔微生态系统中起着非常重要的作用。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一株植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）及其在口腔疾病防治中的应用。该菌株是从发酵泡菜中筛选到的，能够显著抑制变异链球菌、牙龈卟啉单胞菌，半放线聚集杆菌等口腔病原菌的生长繁殖，并能在口腔内有效定植，有利于恢复菌群平衡，可广泛用于预防或治疗龋齿、牙周炎等口腔疾病。
[0006]本专利技术一方面提供了一种植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）VHProbi O10株，已于2022年3月1日保藏于中国武汉 武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：M2022174。
[0007]所述植物乳植杆菌VHProbi O10株的16s rDNA序列为SEQ ID NO:1。
[0008]所述植物乳植杆菌VHProbi O10株，其Riboprinter 指纹图谱如图1所示；其蛋白质谱如图2所示。
[0009]本专利技术所提供的植物乳植杆菌VHProbi O10株在制备具有抗氧化功能的制品中的应用。
[0010]本专利技术所提供的植物乳植杆菌VHProbi O10株在制备具有预防或治疗龋齿功能的制品中的应用。
[0011]本专利技术所提供的植物乳植杆菌VHProbi O10株在制备具有预防或治疗牙周病功能的制品中的应用。
[0012]所述的制品为保健品、药品或口腔护理用品。
[0013]所述的口腔护理用品，为牙用凝胶、牙粉、牙膏、口香糖、牙线、牙齿清洁液、漱口剂、口喷剂、牙齿清洁泡沫中的任意一种。
[0014]本专利技术还提供了一种口腔护理用品，包含植物乳植杆菌VHProbi O10株的裂解液。
[0015]所述的裂解液是通过将植物乳植杆菌VHProbi O10新鲜菌液超声破碎后，再进行热灭活得到的。
[0016]本专利技术提供的植物乳植杆菌VHProbi O10筛选自发酵泡菜，生物安全性好，对人工胃肠液耐受性强，且具有较强的抗氧化性能，对羟基自由基和DPPH自由基的清除率分别为18.1%和25.6%。
[0017]植物乳植杆菌VHProbi O10对变异链球菌、粘性放线菌、牙龈卟啉单胞菌、伴放线聚集杆菌和具核梭状杆菌这五种口腔病原菌都有明显的抑制效果，其中，该菌株的发酵菌液对变异链球菌和粘性放线菌的抑菌效果最强，抑菌圈直径分别达到25mm和22.5mm，且发酵菌液的抑菌效果要略优于裂解液，取得了意料不到的技术效果。
[0018]植物乳植杆菌VHProbi O10能够在口腔中有效定植，6h时的自凝集率达到44.3%；可与变异链球菌、具核梭状杆菌、牙龈卟啉单胞菌和半放线聚集杆菌四种常见的口腔病原菌高效结合，显著抑制其粘附到牙齿或者牙龈上，其中，植物乳植杆菌VHProbi O10对变异链球菌和半放线聚集杆菌的共凝集效果最好，6h时的共凝集率高达62.37%和55.59%，取得了意料不到的技术效果。
[0019]植物乳植杆菌VHProbi O10裂解液能够有效抑制变异链球菌的增殖，其中，对照组的变异链球菌在接种10 h后开始快速增长，生长20 h左右达到稳定期；而添加了植物乳植杆菌VHProbi O10裂解液上清的实验组，变异链球菌在24 h内几乎没有增长，效果显著。
[0020]植物乳植杆菌VHProbi O10不仅能有效抑制变异链球菌粘附到牙齿上，还能高效去除变异链球菌形成的生物膜。其中，菌悬液即单纯的菌体对生物膜的去除率高达66.06%，说明菌体细胞膜上有变异链球菌的结合位点，单纯的菌体自身也能够与变异链球菌结合，短时间内去除部分生物膜；而发酵液和裂解液中除了含有菌体自身外，还含有较多的代谢物质，能够更高效去除变异链球菌形成的生物膜，去除率达100%，取得了意料不到的技术效果。
[0021]细胞实验结果进一步证实，植物乳植杆菌VHProbi O10对人正常牙龈上皮细胞没有毒性，对细胞的粘附力强，能在口腔内实现有效定植。植物乳植杆菌VHProbi O10裂解液还能显著抑制牙周致病菌在人正常牙龈上皮细胞上的粘附生长，有效预防和改善所述致病菌引起的牙周炎，牙龈出血等症状。
[0022]所述植物乳植杆菌VHProbi O10可广泛用于制备保健品、药品，以及漱口水、牙膏等口腔护理用品，有效预防或治疗龋齿、牙周病等口腔疾病，促进口腔菌群平衡的恢复。
[0023]附图说明
[0024]图1为植物乳植杆菌VHProbi O10的Riboprinter指纹图谱；
图2为植物乳植杆菌VHProbi O10的蛋白质谱图；图3为植物乳植杆菌VHProbi O10与四株致病菌的凝集试验；其中，A为植物乳植杆菌对照，B为植物乳植杆菌+变异链球菌；C为植物乳植杆菌+牙龈单胞卟啉菌；D为植物乳植杆菌+具核梭状杆菌；E为植物乳植杆菌+半放线聚集杆菌；图4为植物乳植杆菌VHProbi O10对变异链球菌的抑制生长曲线；图5为植物乳植杆菌VHProbi O10对变异链球菌的抑制粘附试验；其中，A为对照组，B为实验组；图6为植物乳植杆菌VHProbi O10抑制牙龈卟啉单胞菌粘附到人正常牙龈上皮细胞图片；其中，A为对照组，B为实验组；图7为植物乳植杆菌VHProbi O10抑制具核梭状杆菌粘附到人正常牙龈上皮细胞图片；其中，A为对照组，B为实验组；图8为植物乳植杆菌VHProbi O10抑制半放线聚集杆菌粘附到牙龈上皮细胞图片；其中，A为对照组，B为实验组。
具体实施方式
[0025]本专利技术提供的植物乳植杆菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种植物乳植杆菌，其特征在于，所述的植物乳植杆菌的保藏号为CCTCC NO：M2022174。2.如权利要求1所述的植物乳植杆菌，其特征在于，所述的植物乳植杆菌的16s rDNA序列为SEQ ID NO:1。3.如权利要求1所述的植物乳植杆菌，其特征在于，所述的植物乳植杆菌的Riboprinter 指纹图谱如图1所示，蛋白质谱如图2所示。4.权利要求1所述的植物乳植杆菌在制备具有抗氧化功能的制品中的应用。5.权利要求1所述的植物乳植杆菌在制备具有预防或治疗龋齿功能的制品中的应用。6.权利要求1所述的植物乳植杆菌在制备具有预防或治...

【专利技术属性】
技术研发人员：倪海平，段治，张景燕，刘金，程淑敏，郭超群，崔洪昌，吴松洁，
申请(专利权)人：山东百沃生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：