一种鱼皮胶原蛋白及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种鱼皮胶原蛋白及其制备方法，属于海洋生物工程技术领域。所述的制备方法中包括使用复合酶体系进行酶解；所述的复合酶由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶、沙雷肽酶组成；所述的复合酶体系中风味蛋白酶：菠萝蛋白酶：沙雷肽酶的总比活的比值为20

【技术实现步骤摘要】
一种鱼皮胶原蛋白及其制备方法


[0001]本专利技术属于海洋生物工程
，具体涉及一种鱼皮胶原蛋白及其制备方法。

技术介绍

[0002]鱼皮胶原蛋白，就是以鱼皮为原料提取的胶原蛋白。深海鱼由于生活环境的低温低压，使其鱼皮胶原蛋白具有着普通的陆生动物胶原蛋白和淡水鱼、浅海鱼胶原蛋白所不具备的特殊性质。
[0003]深海鱼皮胶原蛋白具有很好的美容作用，其良好的保水能力使皮肤水润亮泽，还能增加皮肤紧密度，产生皮肤张力，缩小毛孔，使皮肤富有弹性。此外，深海胶原蛋白能有效加速真皮层细胞生长，活化表皮细胞，防止皱纹出现。深海鱼皮胶原蛋白与人体皮肤的蛋白质相似，对皮肤的渗透性强，可透过角质层与皮肤上皮细胞结合，参与和改善皮肤细胞的代谢，使皮肤中的胶原蛋白活性加强。细胞氧化产生游离自由基，促使肌肤的进一步老化，胶原蛋白因具有抗氧化作用，因此也可以起到一定的防护作用。不断开发深海鱼皮胶原蛋白，优化制备提取方法，能够为深海鱼皮胶原蛋白的应用提供更好的基础。
[0004]现有技术中对于深海鱼皮胶原蛋白的制备方法包括酶解和发酵等方式，其中酶解由于产物更易纯化而广为应用。现有酶解体系有酸性酶解体系如胃蛋白酶体系、碱性酶解体系如碱性蛋白酶体系。
[0005]中国专利申请202110941440.7中公开了一种低免疫原性鱼皮胶原及其制备方法。所述制备方法以鱼皮为原料，经过鱼皮预处理、除杂脱脂、胶原蛋白的粗提及端肽的去除、胶原蛋白的精制及干燥、内毒素灭活等方式得到杂蛋白、脂肪、端肽、内毒素含量明显降低的胶原蛋白。在鱼皮预处理阶段利用过氧化氢、氢氧化钠处理，在一定时间点换液可使鱼皮预处理效果更佳；在提取及进一步脱除免疫原阶段利用乙酸和蛋白酶进行酶切端肽处理，精制冻干得到胶原蛋白成品后通过辐照灭活内毒素。提取方法简单，提取效率较高，得到的胶原蛋白免疫原物质含量低、纯度较高，有效降低胶原蛋白在医用过程中的不良反应，进一步扩大胶原蛋白的应用领域。但其针对的鱼皮类型为巴沙鱼，实际应用于深海鱼时有很多不必要的步骤，条件上也有优化空间。
[0006]中国专利申请202110938911.9中公开了了一种高纯度小分子鱼皮胶原蛋白肽的制备方法，它是以鱼皮为原料，包括：鱼皮预处理、胃蛋白酶提取胶原蛋白、调节等电点、双水相萃取纯化胶原蛋白、碱性蛋白酶酶解成胶原蛋白肽、葡聚糖凝胶分离小分子鱼皮胶原蛋白肽。制得的鱼皮胶原蛋白肽分子量小，纯度高，且无色无味，比大分子多肽更利于人体吸收。但其实际操作时收率较低。
[0007]三文鱼又名大马哈鱼、鲑鱼、撒蒙鱼，属硬骨鱼纲、鲑形目、鲑属，主要分布在大西洋与太平洋、北冰洋交界的水域，属于冷水性的高度洄游鱼类。2000米以下深海三文鱼鱼皮制备得到的胶原蛋白，避免了陆地上生物的激素饲养，也没有动物疫情对于鱼肉污染的担忧，其所受到的生物性污染也更小；通过对铅镉汞等重金属的分析检测结果显示：深海三文鱼鱼皮比陆地养生动物所受的化学污染要少得多；同时极寒气候造就了更高的营养价值。
三文鱼鱼皮胶原蛋白与人体高度同源，在应用时更安全、更有效。

技术实现思路

[0008]为了解决现有技术中对深海鱼鱼皮胶原蛋白提取方法产率低、得到的产品功效不好等问题，本专利技术提供了一种鱼皮胶原蛋白的制备方法，通过优化酶解条件提取三文鱼鱼皮中的胶原蛋白，以期提高产率和胶原蛋白性能。
[0009]一方面，本专利技术提供了一种鱼皮胶原蛋白的制备方法。
[0010]具体地，包括使用复合酶体系进行酶解。
[0011]所述的复合酶由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶、沙雷肽酶组成。
[0012]所述的复合酶体系中风味蛋白酶：菠萝蛋白酶：沙雷肽酶的总比活的比值为20
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30：50
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100：120
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360。
[0013]优选地，所述的比值为24：50：120
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270。
[0014]进一步优选地，所述的比值为24：50：135
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270。
[0015]更进一步地，所述的比值为24：50：180
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270。
[0016]在一些实施例中，所述的比值为24：50：180或24：50：270或24：50：135或24：100：360。
[0017]优选地，所述的复合酶用量为600
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700U/g，所述的用量为相对于底物鱼皮质量的比活。
[0018]所述的底物鱼皮为经过去脂处理的三文鱼鱼皮。
[0019]所述的复合酶用量可以是610
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690U/g、620
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690U/g、620
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680U/g、620
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650U/g、630
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690U/g、640
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680U/g、650
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690U/g、670
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690U/g、680
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700U/g、680
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690U/g、690
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700U/g、645
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685U/g或668
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692U/g。
[0020]优选地，所述的复合酶用量为635
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691U/g，可以是635
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688U/g、635
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656U/g、656
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691U/g、656
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688U/g或688
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691U/g。
[0021]在一些实施例中，所述的复合酶用量为635U/g、656U/g、688U/g或691U/g。
[0022]具体地，所述的复合酶的缓冲体系为80
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120mMNaCl，8
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12mMKCl，2
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4mMNaH2PO4，4
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8mMNa2HPO4，1
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3mM柠檬酸钠，pH6.8
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7.2。
[0023]优选地，所述的柠檬酸钠添加量为2mM。
[0024]优选地，所述的pH为7。
[0025]优选地，所述的复合酶的缓冲体系为100
‑
120mMNaCl，10
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12mMKCl，2
‑
4mMNaH2PO4，4
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8mMNa2HPO4，2
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3mM柠檬酸钠，pH7
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7.2。
[0026]所述的酶解的反应条件为25
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35℃，低速搅拌，反应18
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36h。
[0027]优选地，所述的酶解的反应条件为30℃，低速搅拌，反应24h。
[0028]优选地，所述的制备方法中还包括鱼皮预处理步骤、胶原蛋白盐析步骤和透析纯化步骤。
[0029]具体地，所述的制备方法包括以下步骤：（1）鱼皮预处理；（2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鱼皮胶原蛋白的制备方法，其特征在于，包括使用复合酶体系进行酶解；所述的复合酶由风味蛋白酶、菠萝蛋白酶、沙雷肽酶组成；所述的复合酶体系中风味蛋白酶：菠萝蛋白酶：沙雷肽酶的总比活的比值为20
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30：50
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100：120
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360。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的比值为24：50：120
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270。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的比值为24：50：180。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的复合酶用量为600
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700U/g，所述的用量为相对于底物鱼皮质量的比活。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述的底物鱼皮为经过去脂处理的三文鱼鱼皮。6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述的复合酶的缓冲体系为80
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120mM NaCl，8
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12mM KCl，2
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4mM ...

【专利技术属性】
技术研发人员：董书萍，王绪敏，李艳燕，
申请(专利权)人：瑞吉明山东生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：