LAMP2A在强直性脊柱炎中的用途制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，公开了一种LAMP2A在强直性脊柱炎中的用途。本发明专利技术通过检测正常健康人和强直性脊柱炎患者骨髓间充质干细胞中LAMP2A的表达水平发现，LAMP2A在强直性脊柱炎患者中表达水平明显上调，LAMP2A对人间充质干细胞的成骨分化具有正调控作用LAMP2A表达增加是导致强直性脊柱炎患者异常病理性成骨的重要原因。本发明专利技术将LAMP2A作为新的治疗强直性脊柱炎症的靶点，能缓解强直性脊柱炎患者病理性成骨的情况，对控制强直性脊柱炎患者骨赘异常形成及脊柱畸形的发生具有良好的效果。好的效果。好的效果。

【技术实现步骤摘要】
LAMP2A在强直性脊柱炎中的用途


[0001]本专利技术涉及生物医学
，具体涉及一种LAMP2A在强直性脊柱炎中的用途。

技术介绍

[0002]强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis，AS)是常见的骨免疫相关疾病，以关节和脊柱慢性炎症为主的自身免疫性疾病。目前尚缺乏行之有效的早期诊断方法缺乏有效的早期诊治手段，也无完全治愈该疾病的措施。随着疾病进展，患者将逐渐出现脊柱、关节畸形，严重影响患者的生活和劳动能力，造成患者极大的身心痛苦，还造成极大的社会、经济负担。
[0003]慢性炎症与病理性成骨是强直性脊柱炎的两大特征。近年来关于强直性脊柱炎慢性炎症的基础研究突飞猛进，提出了非折叠蛋白反应、细菌感染、炎症细胞与因子等多种学说，有些研究成果正逐步向临床转化。而强直性脊柱炎的另一核心特征病理性成骨却较少受到关注，其具体分子机制仍未阐明，给强直性脊柱炎的早期诊断和治疗带来极大的困难。现有的诊断技术难以预测病理性成骨的进展速度及严重程度，且现有的治疗方法也难以有效地逆转和延缓病理性成骨，最终使强直性脊柱炎患者出现严重的关节僵硬、强直。
[0004]因此，深入研究强直性脊柱炎病理性成骨的发生和发展机制，探索新的诊疗靶点显得尤为重要，以期为强直性脊柱炎的早期诊治和临床治疗提供了新的理论依据。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种LAMP2A在强直性脊柱炎中的用途。以期通过LAMP2A为治疗靶点开发研制出新型的强直性脊柱炎症治疗药物，为临床控制强直性脊柱炎患者骨量进行性减少及防止病理性骨折的产生提供新的诊疗方法。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：
[0007]第一方面，本专利技术将检测骨髓间充质干细胞中LAMP2A表达水平的试剂在制备用于辅助诊断强直性脊柱炎中应用。
[0008]本专利技术通过检测正常健康人和强直性脊柱炎患者骨髓间充质干细胞中LAMP2A的表达水平发现，与正常健康人相比，LAMP2A在强直性脊柱炎患者中表达水平明显上调。通过干预LAMP2A的水平，发现LAMP2A对人间充质干细胞的成骨分化具有正调控作用，进一步研究表明LAMP2A表达增加是导致强直性脊柱炎患者异常病理性成骨的重要原因。
[0009]作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述LAMP2A的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；与健康对照相比，所述LAMP2A表达水平上调。
[0010]第二方面，本专利技术提供一种治疗强直性脊柱炎的药物组合物，包括LAMP2A表达抑制剂。
[0011]本专利技术构建了强制性脊柱炎疾病模型SKG小鼠，并尾静脉注射LAMP2A敲除的shRNA腺相关病毒，Micro
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CT对小鼠脊柱骨赘生成情况进行进一步的分析发现强直性脊柱炎组脊柱发生明显的病理性成骨，有大量骨赘生成，说明强直性脊柱炎小鼠模型造模成功，而强直
性脊柱炎小鼠的LAMP2A敲除组的骨赘明显减少，与正常对照组相近，说明LAMP2A敲除能有效缓解强直性脊柱炎小鼠动物模型中病理性成骨的情况，提示了LAMP2A是治疗强直性脊柱炎症的重要靶点。
[0012]作为本专利技术所述治疗强直性脊柱炎的药物组合物的优选实施方式，所述LAMP2A表达抑制剂为gRNA、shRNA、siRNA、dsRNA、miRNA、cDNA、反义RNA/DNA、低分子化合物、肽、抗体中的至少一种。
[0013]进一步的，所述siRNA的碱基序列如SEQ ID No.2和3所示。
[0014]作为本专利技术所述治疗强直性脊柱炎的药物组合物的优选实施方式，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体。
[0015]第三方面，本专利技术将LAMP2A表达抑制剂在制备治疗和/或预防异常病理性成骨的药物中应用。
[0016]本专利技术的LAMP2A可作为新的治疗强直性脊柱炎症的靶点，能缓解强直性脊柱炎患者病理性成骨的情况，对控制强直性脊柱炎患者骨赘异常形成及脊柱畸形的发生具有良好的效果。
[0017]第四方面，本专利技术将LAMP2A表达抑制剂在制备治疗和/或预防强直性脊柱炎的药物中应用。
[0018]通过LAMP2A为治疗靶点开发研制出新型的强直性脊柱炎症治疗药物，可以控制骨量进行性减少及防止病理性骨折的产生。
[0019]作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述LAMP2A表达抑制剂为gRNA、shRNA、siRNA、dsRNA、miRNA、cDNA、反义RNA/DNA、低分子化合物、肽、抗体中的至少一种。
[0020]进一步的，所述siRNA的碱基序列如SEQ ID No.2和3所示。
[0021]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0022]本专利技术发现与正常健康人相比，发现LAMP2A在强直性脊柱炎患者中表达水平明显上调，且LAMP2A对人间充质干细胞的成骨分化具有正调控作用，进一步研究表明LAMP2A表达增加是导致强直性脊柱炎患者异常病理性成骨的重要原因。LAMP2A敲除能有效缓解强直性脊柱炎小鼠动物模型中病理性成骨的情况。LAMP2A可作为新的治疗强直性脊柱炎症的靶点，能缓解强直性脊柱炎患者病理性成骨的情况，对控制强直性脊柱炎患者骨赘异常形成及脊柱畸形的发生具有良好的效果。通过LAMP2A为治疗靶点开发研制出新型的强直性脊柱炎症治疗药物，可以控制骨量进行性减少及防止病理性骨折的产生。
附图说明
[0023]图1为免疫荧光检测正常人与AS患者hMSC中的LAMP2A水平。
[0024]图2为Western blot检测正常人与AS患者hMSC的蛋白水平。
[0025]图3为茜素红染色与定量分析成骨分化；
[0026]图4为碱性磷酸酶检测成骨分化水平；
[0027]图3和图4中，si组均表示siRNA敲减，oe组均表示慢病毒过表达。
[0028]图5为强直性脊柱炎小鼠动物模型SKG小鼠分组处理示意图。
[0029]图6为小鼠脊柱三维重建图。
具体实施方式
[0030]为更好地说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。本领域技术人员应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0031]实施例中所用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0032]实施例1：
[0033]检测正常人和强直性脊柱炎患者骨髓间充质干细胞(hMSCs)中LAMP2A的表达水平。从临床科室获得强直性脊柱炎患者骨髓间充质干细胞(hMSCs)，健康对照的骨髓间充质干细胞(hMSCs)来源门诊健康体检人群。强直性脊柱炎患者和健康对照均签署知情同意书。
[0034]LAMP2A的氨基酸序列为：
[0035]MVCFRLFPVPGSGLVLVCLVLGAVRSYALELNLTDSENATCLYAKWQMNFT本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测骨髓间充质干细胞中LAMP2A表达水平的试剂在制备用于辅助诊断强直性脊柱炎中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述LAMP2A的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；与健康对照相比，所述LAMP2A表达水平上调。3.一种治疗强直性脊柱炎的药物组合物，其特征在于，包括LAMP2A表达抑制剂。4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述LAMP2A表达抑制剂为gRNA、shRNA、siRNA、dsRNA、miRNA、cDNA、反义RNA/DNA、低分子化合物、肽、抗体中的至少一种。5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述siRNA的碱基序...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈慧勇，吴燕峰，王鹏，刘文杰，袁伟权，张韫晖，李权锋，王星朗，许辰昊，
申请(专利权)人：中山大学附属第八医院深圳福田，
类型：发明
国别省市：