一种宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒及其检测方法技术

本发明专利技术提供一种宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒及其检测方法，摆动组件还包括气囊、变形层、衬板、托板、转轴、连杆和滑轨，气囊镶嵌于滑块远离套管的一端，变形层镶嵌于气囊远离滑块的一端，衬板摆动于变形层远离气囊的一侧，托板滑动于衬板的上端，转轴铰接于托板下端的两侧，自研发抗体抗原应用基因重组和杂交瘤技术，将E7蛋白进行了原核表达和纯化，以此作为免疫原制备E7蛋白单克隆抗体，并进行初步鉴定，用于检测样品中的病毒，吸附层对试纸卡内部向下滴落的样本进行吸附，避免液体样本流动至底托的内部，影响底托重复利用，使得该种检测盒能够在试纸卡未使用时，避免试纸卡的表面被污染。表面被污染。表面被污染。

【技术实现步骤摘要】
一种宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒及其检测方法


[0001]本专利技术涉及抗体抗原检测
，尤其涉及一种宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒及其检测方法。

技术介绍

[0002]E7是致癌基因，通过大量表达而产生E7癌蛋白，导致细胞发生高级别癌前病变直至癌变，癌前病变的正确处理是宫颈癌筛查质量保证的关键，癌前病变的正确处理是宫颈癌筛查质量保证的关键，因为宫颈癌筛查的重要目的不仅是找出宫颈癌，而且是及时发现癌前病变并阻断其进展为宫颈癌。不同级别的癌前病变都有三种发展趋势：转归、持续、进展，正确判定癌前病变的发展趋势，是高质量筛查治疗的关键，针对于检测盒的技术启示；对于检测盒的研究发现了以下问题：1.通过将宫颈刷对女性宫颈口刮取分泌物，因宫颈刷在宫颈中提取的分泌物中杂质太多，需要用抗原提取出来，而检测盒所用试剂在制备后，对稀释后的宫颈细胞进行检测，导致现有检测方法无法有效的检测病变细胞；2.检测盒通过内部放置试纸卡对抗原样本进行检测，在检测盒内部放置试纸卡后，检测盒无法避免试纸卡表面被污染，且由于试纸卡为一次性用品，检测盒需要重复使用，而抗原样本通常为液体样本，液体样本在滴落至试纸卡的内部后，多余样本易流动至检测盒的内部，污染检测盒的内部，进而影响检测盒下次使用，从而导致该种检测盒无法在安装时方便对多余液体样本进行吸收；目前，现有技术中的CN201911002446.7一种用于早期宫颈癌检测的组合物及试剂盒，公开了试剂盒，该专利技术进一步提高了灵敏度和精准性，整个检测过程无创伤、操作简便、易于判读，通用设备即可满足检测，PCR过程采用全封闭形式，避免了交叉污染的可能，同时对两个标志物的三个区段进行检测，结果更加精准，综上因素使该专利技术具有社会推广性，该检测的高灵敏性适用于无创宫颈癌早期筛查；本专利技术主要能够解决检测盒无法在安装时方便对多余液体样本进行吸收的问题。

技术实现思路

[0003]为解决上述技术问题，本专利技术提供一种宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒及其检测方法，以解决上述
技术介绍
中描述问题。
[0004]本专利技术一种宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒及其检测方法，由以下具体技术手段达成：本专利技术涉及一种宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒，包括顶盖和底托，底托与顶盖活动嵌套连接，所述顶盖和底托的夹层内部活动嵌套有试纸卡，所述底托的内侧活动贯穿有吸附层。
[0005]进一步的，所述顶盖的内部贯穿有观察口，底托的内部贯穿有孔洞，孔洞长度大于底托长度的二分之一，底托靠近顶盖的一侧开设有凹槽，试纸卡活动嵌套于凹槽的内部，底
托的内侧设有快速托举的摆动组件。
[0006]进一步的，所述试纸卡的表面设有检测线和质控线，试纸卡为E7蛋白检测试纸卡，试纸卡上的测试试剂中含有抗体、抗原，用于检测样品中的病毒，试纸卡配套设有试管。
[0007]其中，试纸卡中的抗原的由来：样本释放剂中含有抗原，用于提取分泌物中的检测品，因为宫颈刷在宫颈中提取的分泌物中杂质太多，需要用抗原提取出来，最终放到试纸卡中检测。
[0008]进一步的，所述吸附层与试纸卡呈垂直贴合设置，吸附层厚度为0.2
‑
0.8cm，吸附层为海绵材质制成。
[0009]进一步的，所述摆动组件包括套管、滑块、卡块和斜板，套管设于底托的两侧，滑块滑动并延伸至底托的内部，卡块设于顶盖的两侧，斜板镶嵌于卡块的两侧。
[0010]进一步的，所述套管呈圆环状设置，套管嵌入于底托的内侧，套管与卡块滑动嵌套，套管与滑块配套设置。
[0011]进一步的，所述滑块于套管的内部滑动嵌套，滑块呈垂直滑动，滑块的外侧壁与套管内壁滑动贴合。
[0012]进一步的，所述卡块与套管配套设置，卡块侧面呈梯形设置，顶盖通过卡块与套管滑动嵌套。
[0013]进一步的，所述斜板呈倾斜15
‑
35
°
设置，斜板与套管的内壁滑动挤压贴合，斜板与卡块整体组合直径大于套管内部直径0.5
‑
1cm，斜板为可变形材质制成，如橡胶材质。
[0014]进一步的，所述摆动组件还包括气囊、变形层、衬板、托板、转轴、连杆和滑轨，气囊镶嵌于滑块远离套管的一端，变形层镶嵌于气囊远离滑块的一端，衬板摆动于变形层远离气囊的一侧，托板滑动于衬板的上端，转轴铰接于托板下端的两侧，连杆摆动于转轴的一端，滑轨设于托板下方的两侧。
[0015]进一步的，所述气囊、变形层、衬板、托板、转轴、连杆和滑轨均设于底托的内部，气囊内壁厚度为0.5
‑
1cm，而变形层厚度为0.2
‑
0.4cm，气囊呈不规则形状设置。
[0016]进一步的，所述变形层与衬板配套设置，衬板呈向下倾斜15
‑
35
°
设置，变形层呈半圆弧状设置，半圆弧角度为90
°
，衬板环绕有2
‑
4个于变形层的侧面，变形层材质与斜板材质相同。
[0017]进一步的，所述托板的一端延伸至底托的内侧，同时托板的一端延伸至吸附层的下端，托板分布于吸附层下端的两侧，托板于底托的内侧呈垂直滑动。
[0018]进一步的，所述连杆远离转轴的一端滑动于滑轨的内部，托板处于静止状态时，连杆的一端处于滑轨的最下端，而托板整体向上滑动时，连杆于滑轨的内部向上滑动。
[0019]进一步的，所述滑轨呈倾斜35
‑
50
°
设置，滑轨靠近连杆的一端开设有凹槽，滑轨整体呈半圆环状设置。
[0020]本专利技术还涉及前述试剂盒的检测方法，包括如下步骤：S1：首先构建包含E7编码序列的PET
‑
32a表达质粒，转化大肠杆菌表达菌BL21（DE3），收集菌体，通过Ni柱纯化得到纯化后的E7重组蛋白；用制备的E7重组蛋白作为免疫原对Balb/c小鼠进行免疫，ELISA间接法检测小鼠血清效价超过1/8K后，取免疫小鼠脾脏与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合，杂交瘤细胞通过ELISA间接法进行亚克隆筛选，得到分泌抗E7的单克隆杂交瘤细胞；将杂交瘤细胞注射小鼠腹腔，收集腹水经过纯化后得到抗E7蛋白特
异性单克隆抗体；S2：基因组不稳定时，E7就混入基因组中，E7破坏细胞时，会产生E7癌蛋白，E7大量活动时，才会引起癌变，E7基因编码的致癌蛋白是导致宫颈上皮癌变的重要因子，这种蛋白通过抑制视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)使被感染的细胞可无限增殖并恶性转变；S3：pRb是抑癌蛋白，正常情况下，非磷酸化的pRb与核转录因子E2F特异性结合，形成二者化合物后，抑制E2F对靶基因的转录，从而使细胞停留在G1期，细胞不能增殖，而高危型HPVE7蛋白通过其CR区的结构与pRb的649
‑
72口袋结构特异性结合，从而释放E2F因子，促使细胞从G1期进入S期，同时E7促使pRb进入泛素依赖的途径降解，E7蛋白被认为在细胞转化和肿瘤行程中起重要作用；S4：HPV进入人体后能够长期隐匿并大量复制和机体免疫力低下有关本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒，包括：顶盖（1）和底托（101），其特征在于，底托（101）与顶盖（1）活动嵌套连接，所述顶盖（1）和底托（101）的夹层内部活动嵌套有试纸卡（102），所述底托（101）的内侧活动贯穿有吸附层（104）。2.根据权利要求1所述的宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒，其特征在于，所述顶盖（1）的内部贯穿有观察口，底托（101）的内部贯穿有孔洞，底托（101）靠近顶盖（1）的一侧开设有凹槽，试纸卡（102）活动嵌套于凹槽的内部，底托（101）的内侧设有托举的摆动组件；所述试纸卡（102）的表面设有检测线和质控线，试纸卡（102）为E7蛋白检测试纸卡，试纸卡（102）的检测试剂中含有抗体、抗原，用于检测样品中的病毒，试纸卡（102）配套设有试管（103）；所述吸附层（104）与试纸卡（102）垂直贴合设置，吸附层（104）厚度为0.2
‑
0.8cm。3.根据权利要求2所述的宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒，其特征在于，所述摆动组件包括：套管（2）、滑块（201）、卡块（202）和斜板（203），套管（2）设于底托（101）的两侧，滑块（201）与底托（101）滑动连接且延伸至底托（101）的内部，卡块（202）设于顶盖（1）的两侧，斜板（203）镶嵌于卡块（202）的两侧。4.根据权利要求3所述的宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒，其特征在于，所述套管（2）呈圆环状设置，套管（2）嵌入于底托（101）的内侧，套管（2）与卡块（202）滑动嵌套连接，套管（2）与滑块（201）配套设置；滑块（201）于套管（2）的内部滑动嵌套，滑块（201）的外侧壁与套管（2）的内壁滑动贴合设置。5.根据权利要求3所述的宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒，其特征在于，所述卡块（202）与套管（2）配套设置，卡块（202）的侧面呈梯形设置，顶盖（1）通过卡块（202）与套管（2）滑动嵌套；斜板（203）呈倾斜15
‑
35
°
设置，斜板（203）与套管（2）的内壁滑动挤压贴合设置，斜板（203）为由可变形材质制成。6.根据权利要求2所述的宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒，其特征在于，所述摆动组件还包括：气囊（3）、变形层（301）、衬板（302）、托板（4）、转轴（401）、连杆（402）和滑轨（403）；其中，气囊（3）镶嵌于滑块（201）远离套管（2）的一端，变形层（301）镶嵌于气囊（3）远离滑块（201）的一端，衬板（302）摆动于变形层（301）远离气囊（3）的一侧，托板（4）滑动于衬板（302）的上端，转轴（401）铰接于托板（4）下端的两侧，连杆（402）摆动于转轴（401）的一端，滑轨（403）设于托板（4）下方的两侧。7.根据权利要求6所述的宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒，其特征在于，所述气囊（3）、变形层（301）、衬板（302）、托板（4）、转轴（401）、连杆（402）和滑轨（403）均设于底托（101）的内部，气囊（3）内壁厚度为0.5
‑
1cm，变形层（301）厚度为0.2
‑
0.4cm。8.根据权利要求6所述的宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒，其特征在于，所述变形层（301）与衬板（302）配套设置，衬板（302）呈向下倾斜15
‑
35
°
设置，变形层（301）呈半圆弧状，衬板（302）环绕有2
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4个于变形层（301）的侧面，变形层（301）材质与斜板（203）材质相同；托板（4）的一端延伸至底托（101）的内侧，托板（4）的另一端延伸至吸附层（104）的下端，托板（4）分布于吸附层（104）下端的两侧，托板（4）于底托（101）的内侧垂直滑动。
9.根据权利要求6所述的宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒，其特征在于，所述连杆（402）远离转轴（401）的一端滑动于滑轨（403）的内部，托板（4）处于静止状态时，连杆（402）的一端处于滑轨（403）的底端，托板（4）整体向上滑动时，连杆（402）于滑轨（403）的内部向上滑动；滑轨（403）呈倾斜35
‑
50
°
设置，滑轨（403）靠近连杆（402）的一端开设有凹槽。10.一种根据权利要求1
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9任一项中所述宫颈癌E7蛋白检测抗体抗原的检测盒的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗进超，
申请(专利权)人：弗雷米德生物医药技术天津有限公司，
类型：发明
国别省市：