一种基于制麦过程大麦基因表达的麦芽PYF性能预测方法及其应用技术

本发明专利技术提出一种基于制麦过程大麦基因表达的麦芽PYF性能预测方法及其应用，属于生物领域，能够解决传统麦芽PYF检测方法存在操作步骤繁琐、耗时长且适用范围较窄等的技术问题。该预测方法具体包括：候选基因筛选、跟踪基因筛选、逆转录反应、多重PCR反应引物设计、RNA提取、逆转录制备cDNA模板、多重PCR反应、PCR扩增产物电泳与表达量分析以及麦芽PYF性能预测等步骤。本发明专利技术通过比对标准麦芽与PYF麦芽在制麦过程中的基因表达差异结合大生产过程选出跟踪基因，再通过比对标准麦芽与待测麦芽的表达量情况结合评价标准的方式，最终实现麦芽PYF性能快速、准确分析。本发明专利技术能够应用于麦芽PYF性能预测方面。PYF性能预测方面。

【技术实现步骤摘要】
一种基于制麦过程大麦基因表达的麦芽PYF性能预测方法及其应用


[0001]本专利技术属于生物工程领域，尤其涉及一种基于制麦过程大麦基因表达的麦芽PYF性能预测方法及其应用。

技术介绍

[0002]酵母提前絮凝(英文名称为Premature Yeast Flocculation，简称为PYF)，是指在啤酒发酵阶段，还没有达到足够的发酵时间，酵母就絮凝沉降的现象。这种现象会造成发酵过程中糖分降解缓慢、乙醛还原慢，导致成品酒成熟度差，从而影响到啤酒的发酵质量，进而造成啤酒质量问题。PYF问题是啤酒行业特有的质量问题，起因是由于麦芽中存在引起酵母提前絮凝的因子物质。因此，对于麦芽PYF性能的检测，是啤酒行业常备的检测指标。
[0003]目前，对于麦芽PYF的检测一般采用将麦芽制备成麦汁，之后添加酵母进行发酵，而后检测发酵液中悬浮酵母数的方式。该方式需要40
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48个小时的发酵时间，加上制备麦汁和酵母数检测，总共需要3
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4天的检测时间，检测时间较长。同时，该方法检测的是成品麦芽，对于麦芽生产过程缺乏预判性，无本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于制麦过程大麦基因表达的麦芽PYF性能预测方法，其特征在于，包括以下步骤：通过转录组分析标准麦芽与PYF麦芽在制麦过程中的基因表达差异，从中选出多个表达差异较大的基因，作为候选基因；追踪所述标准麦芽和PYF麦芽的大生产过程，从所述候选基因中进一步选出变化趋势最明显的作为跟踪基因；根据所述跟踪基因序列设计逆转录反应引物组和多重PCR反应引物组；待测麦芽和标准麦芽总RNA提取；以提取得到的总RNA作为模板，所述逆转录反应引物组作为引物进行逆转录反应制备cDNA模板；以逆转录反应产物作为模板，所述多重PCR反应引物组作为引物进行多重PCR反应，并对待测麦芽和标准麦芽的多重PCR反应产物进行电泳及表达量分析，以预测麦芽PYF性能。2.根据权利要求1所述的基于制麦过程大麦基因表达的麦芽PYF性能预测方法，其特征在于，所述候选基因的筛选是通过转录组分析标准麦芽与PYF麦芽在制麦过程中萌芽过程的基因表达差异。3.根据权利要求1所述的基于制麦过程大麦基因表达的麦芽PYF性能预测方法，其特征在于，所述跟踪基因的筛选标准为：基因表达变化幅度大于等于2.0或小于0.5；其中，所述基因表达变化幅度为PYF麦芽基因表达主成分得分与标准麦芽基因表达主成分得分的比值。4.根据权利要求1所述的基于制麦过程大麦基因表达的麦芽PYF性能预测方法，其特征在于，所述跟踪基因包括AP1、WRKY70、OSM1、GA2ox3、thioredoxin、serpin、RPP13、RbohE、RbohB2、A2、IAA16、BGU17以及WRKY5在内的13个基因。5.根据权利要求4所述的基于制麦过程大麦基因表达的麦芽PYF性能预测方法，其特征在于，所述逆转录反应引物组针对13个跟踪基因AP1、WRKY70、OSM1、GA2ox3、thioredoxin、serpin、RPP13、RbohE、RbohB2、A2、IAA16、BGU17以及WRKY5设计得到13条引物，分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.18...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹花，刘佳，胡淑敏，黄淑霞，秦青青，贺扬，张磊，
申请(专利权)人：青岛啤酒股份有限公司，
类型：发明
国别省市：