一种基于微生物菌群丰度及多样性的淡豆豉发酵工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种基于微生物菌群丰度及多样性的淡豆豉发酵工艺，本发明专利技术从微生物菌群丰度及多样性的角度优化淡豆豉的发酵工艺，包括发酵温度、蒸制时间、水浸时间和药浸时间等影响因素，发酵方法操作简单，成本低廉，采用16SrDNA基因测序技术确定淡豆豉中微生物菌群的丰度和多样性，精准控制发酵程度，避免了由于发酵异常导致的伪劣淡豆豉的产生，从根源上改善淡豆豉药材市场多伪品劣品的情况。同时，微生物菌群结构和组成对淡豆豉中活性成分存在有利影响，提高了淡豆豉的药用价值。提高了淡豆豉的药用价值。提高了淡豆豉的药用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种基于微生物菌群丰度及多样性的淡豆豉发酵工艺


[0001]本专利技术属于医药
，具体地说，涉及一种基于微生物菌群丰度及多样性的淡豆豉发酵工艺。

技术介绍

[0002]淡豆豉为豆科大豆属植物黑豆的成熟种子的发酵加工品，其性味苦寒，具有解表，除烦，宣郁，解毒之等功效，治疗伤寒热病，寒热，头痛，烦躁，胸闷、抑郁症、高血脂、糖尿病和冠心病等疾病。《中国药典》2020年版中对淡豆豉的制备方法要求较简略，没有明确规定发酵温度、发酵湿度、黑豆处理方法和蒸制时间等发酵工艺参数。淡豆豉是天然微生物发酵的药食同源物质，存在于空气、黑豆、桑叶、青蒿和加工器具中的多种微生物共同参与了发酵过程，在淡豆豉特殊的工艺影响下，形成复杂的微生物体系。然而，自然环境中的微生物种类繁多，地区环境及气候的改变也会引起菌群的变化，使参与淡豆豉发酵过程的微生物菌群也有所差异。此外，企业生产淡豆豉时，主要凭个人经验进行操作，药工一般根据经验判断好煮豆时的软硬程度、加入材料的比例和掌控发酵的程度，即仅通过外观性状的主观判断确定淡豆豉发酵程度。因此市场上销售的淡豆豉发酵程度相差较大，质本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于微生物菌群丰度及多样性的淡豆豉发酵工艺，其特征在于，包括以下步骤：第一步，浸润：将黑豆用水浸泡0～12h；第二步，提取：取青蒿、桑叶饮片，按质量比1:1，两者总质量为黑豆的4～6倍，加入青蒿和桑叶总质量的6～10倍水，煎煮1～2h；将煎液用三层纱布过滤，获得煎液和药渣；第三步，浸泡：将第一步的黑豆放入第二步的煎液中，浸泡1～19h；浸泡时的吸收率为20％～100％；第四步，蒸制：将第三步获得的黑豆蒸煮1～2h，取出稍晾；第五步，发酵：将第四步获得的黑豆放入玻璃器皿中，盖上1～3cm厚的第二步获得的药渣，温度为20～35℃的条件下发酵5～6日，将发酵过的黑豆取出，除去药渣，洗净，晾干表面水分，再盖上1～3cm厚的第二步获得的药渣，温度为20～35℃的条件下继续发酵10～20日，获得淡豆豉；第六步，菌落检测：提取淡豆豉DNA后，采用16S rDNA扩增子测序，利用保守区设计通用引物进行PCR扩增，然后对高变区进行测序分析和菌种鉴定；所述第六步具体包括以下步骤：基因组DNA的提取和PCR扩增采用CTAB或SDS方法对样本的基因组DNA进行提取，之后利用琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度和浓度，取PCR产物使用2％浓度的琼脂糖凝胶进行电泳检测，使用TruSeq DNA PCR
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Free SampePreparation Kit建库试剂盒进行文库构建，构建好的文库经过Qubit和Q
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PCR以稀释后的基因组DNA为模板，根据测序区域的选择，使用带Barcode的特异引物，New EnglandBiolabs公司的电泳检测PCR产物，对目的条带使用qiagen公司提供的胶回收试剂盒回收产物，用Phusion High
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Fidelity PCRMaster Mix with GC Buffer和高效高保真酶进行PCR，确保扩增效率和准确性。2.根据权利要求1所述的基于微生物菌群丰度及多样性的淡豆豉发酵工艺，其特征在于，所述黑豆洗净，无尘...

【专利技术属性】
技术研发人员：周婷婷，高玉烨，张玉佳，欧炀育，高葱葱，江玥曈，葛稳，闻俊，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军军医大学，
类型：发明
国别省市：