一种基于微小RNA的疾病预后判断方法技术

本发明专利技术公开了一种基于微小RNA的疾病预后判断方法，属于疾病预后判断方法技术领域，本方案通过利用miR

【技术实现步骤摘要】
一种基于微小RNA的疾病预后判断方法


[0001]本专利技术涉及疾病预后判断方法
，更具体地说，涉及一种基于微小RNA的疾病预后判断方法。

技术介绍

[0002]自人类在1993年发现第一种微小RNA后，现在已被发现的miRNA数量已超过1000种，现阶段对miRNA的研究方向主要集中在机体中与某些疾病的联系，随着对这一领域的不断深入，使得miRNA与疾病之间的相互关系更趋于明朗化，从而使得更好的应用于对疾病的诊断、治疗以及预后判断。
[0003]慢性乙型肝炎(乙肝HBV)和丙型肝炎(丙肝HCV)是肝纤维化及肝硬化的重要致病因素，而早期诊断和有效治疗是阻止病情进展并降低患者病死率的重要手段，现有对于丙型肝炎的预后判断方法大部分采用抗
‑
HCV检测方法，该方法存在对于一些特殊人群例如血透病人进行检测判断时存在一定的局限性，从而导致其判断结果对于特殊人群来说存在一定的不准确性，导致患者有效地治疗时间被延长，从而加剧了病情蔓延。
[0004]因此，针对上述问题提出一种基于微小RNA的疾病预后判断方法。

技术实现思路

[0005]1.要解决的技术问题
[0006]针对现有技术中存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种基于微小RNA的疾病预后判断方法，可以通过将感染miRNA表达谱和对照miRNA表达谱与正常miRNA表达谱相比较，从而判断患者体内是否持续进行HCV蛋白的翻译判断其是否感染HCV，有利于对于一些特殊人群例如血透病人进行检测判断时更准确，从而预防判断结果导致患者有效地治疗时间被延长，从而加剧了病情蔓延。
[0007]2.技术方案
[0008]为解决上述问题，本专利技术采用如下的技术方案。
[0009]一种基于微小RNA的疾病预后判断方法，包括以下步骤：
[0010]S1:提取检测者血清放入培养皿内培养特定的时间，并提取血清内miRNA中miR
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122进行染色标记；
[0011]S2:在培养时每间隔一段特定的时间对其染色区域进行观测并针对区域的变化构建感染模型；
[0012]S3：对培养皿添加一种基于反义寡核苷酸技术的miRNA抑制剂，并再次对其染色的区域进行观测，并针对区域的变化构建对照模型；
[0013]S4：依据感染模型和对照模型构建出感染miRNA表达谱和对照miRNA表达谱，通过将感染miRNA表达谱与正常miRNA表达谱相比较，再通过对照miRNA确认其检测结果。
[0014]进一步的，所述S1中miRNA广泛存在于人体肝脏中，而miR
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122基因定位于18号染色体，位于一个非编码RNA外显子，miR
‑
122能促进HCV的复制。
[0015]进一步的，所述S1中在血清内提取miRNA的方法步骤可通过高效裂解细胞或组织、变性核蛋白复合物、灭活内源性的RNase活性、纯化RNA操作步骤实现。
[0016]进一步的，所述S1中对miRNA中miR
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122进行染色标记可采用甲基绿－派咯宁染色法原理。
[0017]进一步的，所述S2中对观测区域的变化构建感染模型时包括观测时间、记录周期、区域变化范围图。
[0018]进一步的，所述S3中一种基于反义寡核苷酸技术的miRNA抑制剂通过抑制miR
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122，从而达到抑制HCV自我复制。
[0019]进一步的，所述S4中感染模型和对照模型在构建感染miRNA表达谱和对照miRNA表达谱时需要纯化mRNA，再进行建库测序。
[0020]进一步的，所述S4中S4中感染模型和对照模型在构建感染miRNA表达谱和对照miRNA表达谱时可采用RT
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PCR方法建立。
[0021]3.有益效果
[0022]相比于现有技术，本专利技术的优点在于：
[0023]本方案通过利用miR
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122与HCV的5
′
非编码区结合，从而促进HCV蛋白的翻译，从而对miR
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122区域进行标记并且对其进行培养，通过将感染miRNA表达谱和对照miRNA表达谱与正常miRNA表达谱相比较，从而判断患者体内是否持续进行HCV蛋白的翻译判断其是否感染HCV，有利于对于一些特殊人群例如血透病人进行检测判断时更准确，从而预防判断结果导致患者有效地治疗时间被延长，从而加剧了病情蔓延。
附图说明
[0024]图1为本专利技术的预后判断方法示意图。
具体实施方式
[0025]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述；显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0026]在本专利技术的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”、“内”、“外”、“顶/底端”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本专利技术和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本专利技术的限制。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
[0027]在本专利技术的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“设置有”、“套设/接”、“连接”等，应做广义理解，例如“连接”，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体的连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本专利技术中的具体含义。
[0028]实施例1：
[0029]请参阅图1，一种基于微小RNA的疾病预后判断方法，包括以下步骤：
[0030]S1：提取检测者血清放入培养皿内培养特定的时间，并提取血清内miRNA中miR
‑
122进行染色标记；
[0031]S2：在培养时每间隔一段特定的时间对其染色区域进行观测并针对区域的变化构建感染模型；
[0032]S3：对培养皿添加一种基于反义寡核苷酸技术的miRNA抑制剂，并再次对其染色的区域进行观测，并针对区域的变化构建对照模型；
[0033]S4：依据感染模型和对照模型构建出感染miRNA表达谱和对照miRNA表达谱，通过将感染miRNA表达谱与正常miRNA表达谱相比较，再通过对照miRNA确认其检测结果。
[0034]本方案通过利用miR
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122在肝脏中很丰富，而且是肝脏中最主要的miRNA，但在其他组织中不存在这一特性，且miR
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122能促进HCV的复制，其可能机制是miR
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122与HCV的5
′
非编码区结合，从而促进HCV本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于微小RNA的疾病预后判断方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：提取检测者血清放入培养皿内培养特定的时间，并提取血清内miRNA中miR
‑
122进行染色标记；S2：在培养时每间隔一段特定的时间对其染色区域进行观测并针对区域的变化构建感染模型；S3：对培养皿添加一种基于反义寡核苷酸技术的miRNA抑制剂，并再次对其染色的区域进行观测，并针对区域的变化构建对照模型；S4：依据感染模型和对照模型构建出感染miRNA表达谱和对照miRNA表达谱，通过将感染miRNA表达谱与正常miRNA表达谱相比较，再通过对照miRNA确认其检测结果。2.根据权利要求1所述的一种基于微小RNA的疾病预后判断方法，其特征在于：所述S1中miRNA广泛存在于人体肝脏中，而miR
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122基因定位于18号染色体，位于一个非编码RNA外显子，miR
‑
122能促进HCV的复制。3.根据权利要求1所述的一种基于微小RNA的疾病预后判断方法，其特征在于：所述S1中在血清内提取miRNA的方法步骤可通过高效裂解细胞或组织、变性核蛋白复合物、灭...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵强，李兴广，
申请(专利权)人：天津市肿瘤医院空港医院，
类型：发明
国别省市：