一种应用于间接法免疫检测的样本稀释液制造技术

本发明专利技术公开了一种应用于间接法免疫检测的样本稀释液，涉及免疫检测技术领域。本发明专利技术的样本稀释液中包括两性离子表面活性剂、血清和人IgG/IgM的结构类似物。两性离子表面活性剂的重量比为1

【技术实现步骤摘要】
一种应用于间接法免疫检测的样本稀释液


[0001]本专利技术涉及免疫检测
，具体涉及一种应用于间接法免疫检测的样本稀释液。

技术介绍

[0002]间接法免疫检测是将特异性的重组或天然抗原偶联至固相载体(常见的固相载体有磁微粒、96孔板等)，该抗原可以识别并结合人血清/血浆样本中项目特异的IgG/IgM。此外，标记了示踪物(如碱性磷酸酶、吖啶酯)的抗人抗体可与人IgG/IgM发生免疫反应，与上述免疫反应物结合形成免疫反应复合物，加入底物后可产生光信号，信号值的高低即反映了样本中待测物的浓度水平。间接法免疫检测，主要应用于传染病抗体项目的检测，如抗丙肝抗体、抗梅毒抗体等项目。
[0003]间接法的特点是，标记示踪物的抗人抗体(抗人IgG/IgM)不能特异地识别某一疾病的抗体，而是识别所有人源的IgG/IgM。这就会导致样本检测时，由于在样本中浓度极高而非特异性吸附到固相载体表面的人IgG/IgM也会产生信号值，造成的结果就是，本底升高，灵敏度降低，严重者会影响阴阳误判，造成大量假阳性的结果。
[0004]为解决这一问题，常规的做法是将样本进行预稀释，以降低其中的IgG/IgM浓度，进而降低非特异性吸附。
[0005]常用的样本稀释液，成分为缓冲体系和蛋白，仅能发挥稀释作用。
[0006]中国专利CN201611095552.0公开了一种检测尿微量白蛋白的斑点金渗滤试剂盒及其应用，包括：样本稀释液、洗涤液、胶体金标记人血清白蛋白抗体、尿微量白蛋白层析器和定标卡。其中所述样本稀释液包括防腐剂Triton
‑
100、磷酸盐缓冲溶液和Tris缓冲液溶剂。该专利技术的样本稀释液包括防腐剂和缓冲体系，不能对样本中的非特异性吸附进行抑制。
[0007]中国专利CN202210416061.0公开了一种免疫层析检测通用的样本稀释液及其制备方法，免疫层析检测通用的样本稀释液包括以下质量/体积比的组分：6％
‑
12％酪蛋白，2％
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20％表面活性剂，1％
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20％防腐剂，5％
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20％海藻糖，0.5％
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1％氯化钠，1％
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10％阻断剂，所述样本稀释液还包括0.04mol/L
‑
0.06mol/L HEPES缓冲溶液。该专利技术的样本稀释液可通用于不同的检测项目，具有通用性强、检测灵敏度高的优点，制备方法简单方便，可用于大规模工业化生产。虽然酪蛋白在一定程度上可以竞争性地结合到固相载体表面，但是其与人IgG/IgM的结构存在较大差异，竞争性弱。
[0008]因此，间接法免疫检测过程中亟需一种样本稀释液，能够明显的减少或消除对固/液面非特异性吸附，进一步达到降本底、减少假阳性，提高灵敏度的效果。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的提供一种用于间接法免疫检测的样本稀释液。本专利技术的样本稀释液，在样本稀释的基础上，通过添加特定量的两性离子表面活性剂以及人IgG/IgM的结构类似物，进一步降低样本中IgG/IgM对固相载体的非特异性吸附，从而降低本底、减少假阳性。
[0010]为实现上述专利技术目的，本专利技术技术方案如下：
[0011]一方面，本专利技术提供了一种样本稀释液，所述的样本稀释液包括两性离子表面活性剂、血清和人IgG/IgM的结构类似物。
[0012]具体的，所述的两性离子表面活性剂为甜菜碱或其类似物。
[0013]进一步具体的，所述甜菜碱或其类似物的成分包括强心甙和其他甾类成分。
[0014]更具体的，所述的甜菜碱或其类似物选自甜菜碱、月桂基甜菜碱、十四烷基二甲基甜菜碱、十八烷基二甲基甜菜碱、十二烷基二羟乙基甜菜碱、十八烷基二羟乙基甜菜碱中的一种或多种。
[0015]进一步具体的，所述的甜菜碱，化学名称为1
‑
羧基
‑
N,N,N
‑
三甲氨基乙内酯。
[0016]进一步具体的，所述的月桂基甜菜碱，化学名称为N
‑
羧甲基
‑
N,N
‑
二甲基
‑
十二烷基铵内盐。
[0017]进一步具体的，所述的十四烷基二甲基甜菜碱的化学名称为N
‑
羧甲基
‑
N,N
‑
二甲基
‑1‑
十四烷铵内盐。
[0018]进一步具体的，所述的十八烷基二甲基甜菜碱的分子式为C
18
H
37
N(CH3)2CH2COO。
[0019]进一步具体的，所述的十二烷基二羟乙基甜菜碱的分子式为C
18
H
37
NO4‑
C
20
H
41
NO4。
[0020]进一步具体的，所述的十八烷基二羟乙基甜菜碱的分子式为C
25
H
51
NO4。
[0021]在一些实施方案中，所述的甜菜碱或其类似物由商业途径购买获得；在另一些实施方案中，所述的甜菜碱或其类似物可根据结构合成得到。应当说明的是，对于本领域技术人员而言，甜菜碱或其类似物为结构已知的物质，其获得方式可以为本领域当前常规方式或未来可能的获得方式，其获得方式不应当作为对本专利技术的限制性限定，即无论何种方式获得的甜菜碱或其类似物，均应在本专利技术的保护范围内。
[0022]具体的，所述的甜菜碱或其类似物的重量比为1
‑
10g/kg；优选地，所述的甜菜碱或其类似物的重量比为1
‑
5g/kg；进一步优选地，所述的甜菜碱或其类似物的重量比为1
‑
2g/kg；更进一步优选地，所述的甜菜碱或其类似物的重量比为2g/kg。
[0023]在一些实施方案中，所述的甜菜碱或其类似物的重量比为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10及其之间的任意非整数。
[0024]更进一步具体的，所述的甜菜碱或其类似物为月桂基甜菜碱。
[0025]在一些具体的实施方案中，所述的月桂基甜菜碱的重量比为2g/kg。
[0026]具体的，所述血清选自胎牛血清、新生牛血清、山羊血清、兔血清、鸡血清、猪血清、供体马血清中的至少一种。
[0027]进一步具体地，所述血清是指一种纯天然培养基，含有细胞生长繁殖所需的多种营养成分，如蛋白质、多肽等。
[0028]更进一步具体地，胎牛血清是在屠宰怀孕母牛的时候，通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。
[0029]更进一步具体地，所述新生牛血清是指采出生12
‑
24小时新生牛静脉采血。
[0030]更进一步具体地，所述山羊血清、兔血清、鸡血清、猪血清、供体马血清分别来源于非免疫的山羊、兔、鸡、猪、供体马宿主，经过采集、分离、微孔过滤加工制成。
[0031]具体的，所述血清的重量比为100
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种样本稀释液，其特征在于，所述样本稀释液包括两性离子表面活性剂、血清和人IgG/IgM的结构类似物；所述的两性离子表面活性剂包括甜菜碱或其衍生物；所述的人IgG/IgM的结构类似物包括免疫球蛋白。2.根据权利要求1所述的样本稀释液，其特征在于，所述甜菜碱或其衍生物的重量比为1
‑
10g/kg。3.根据权利要求2所述的样本稀释液，其特征在于，所述甜菜碱或其衍生物的重量比为2g/kg。4.根据权利要求1所述的样本稀释液，其特征在于，所述免疫球蛋白的重量比为1
‑
10mg/kg。5.根据权利要求4所述的样本稀释液，其特征在于，所述免疫球蛋白的重量比为5mg/kg。6.根据权利要求1所述的样本稀释液，其特征在于，所述血清的重量比为100
‑
500g/kg。7.根据权利要求6所述的样本稀释液，其特征在于，所述血清的重量比为200g/kg。8.根据权利要求1所述的样本稀释液，其特征在于，所述甜菜碱或其衍生物选自月桂基甜菜碱、十四烷基二甲基甜菜碱、十八烷...

【专利技术属性】
技术研发人员：于会理，冯涛，
申请(专利权)人：苏州颐坤生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：