一种脱细胞猪带瓣血管的制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及心血管疾病技术领域，且公开了一种脱细胞猪带瓣血管的制备方法和应用，包括原材料的准备、实验仪器的准备、实验进程的监测、试验结果的分析以及实验成品的获取。该脱细胞猪带瓣血管的制备方法在应用裁剪合适大小或形状作为主动脉瓣膜或者主动脉带瓣血管的的替代物，此进程中脱细胞方法脱细胞干净，对胶原破坏小，试剂相对简单容易获取，脱细胞后去细胞基质带瓣血管可以用于主动瓣和肺动脉瓣等的置换，此技术用猪升主动脉带瓣膜血管作为去细胞基质材料，材料来源容易，进而解决了人工瓣膜容易感染，长血栓，或需要长期抗凝，或容易衰败，自身组织不可相容，无自我生长修复的问题。复的问题。复的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种脱细胞猪带瓣血管的制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及心血管疾病
，具体为一种脱细胞猪带瓣血管的制备方法和应用。

技术介绍

[0002]心血管疾病是威胁人类健康的主要疾病之一，在疾病的终末期，组织或器官的替换是重要方法，心血管疾病中的发生主动脉和主动脉瓣损伤通常使用外源性人工瓣膜代替患者本身的血管和瓣膜，目前临床应用的机械瓣需要抗凝。机械瓣需要终身服用抗凝药，易导致出血和瓣膜机械功能障碍，生物瓣耐久性差，平均寿命仅6
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15年，另外瓣膜植入后容易感染，长血栓，与自身组织不可相容，无自我生长修复的弊端，本法专利技术制备一种去细胞基质带瓣膜血管主动脉瓣膜损伤需要置换时候使用，此种血管除去了外源性细胞等免疫物质，另外具有组织细胞再生功能，现提出一种脱细胞猪带瓣血管的制备方法和应用。

技术实现思路

[0003](一)解决的技术问题
[0004]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种脱细胞猪带瓣血管的制备方法和应用，具备制备一种去细胞基质带瓣血管供主动脉和主动脉瓣置换使用，此种血管除去了外源性细胞等免疫物质，另外具有组织细胞再生功能的优点，解决了人工带瓣血管容易感染，长血栓，与自身组织不可相容，无自我生长修复的问题。
[0005](二)技术方案
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种脱细胞猪带瓣血管的制备方法和应用，包括原材料的准备、实验仪器的准备、实验进程的监测、试验结果的分析以及实验成品的获取；
[0007]具体操作步骤如下：
[0008]S100、准备猪上充分游离升主动脉，得到猪含有主动脉瓣的血管留作备用；
[0009]S101、准备玻璃容器与灭菌蒸馏水；
[0010]S102、将上述血管放入玻璃容器中并向其中加入灭菌蒸馏水；
[0011]S103、将容器置于调速多用振荡器中震荡6小时后倒掉容器中的液体，用蒸馏水冲洗20次；
[0012]S104、再向容器中加入1％triton
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100震荡6小时，加入新的灭菌蒸馏水继续振荡6小时，如此循环往复7天；
[0013]S105、7天后取部分样本行HE染色，检测细胞等免疫物质是否脱离干净；
[0014]S106、再利用环氧乙烷进行灭菌；
[0015]S107、然后取出脱离细胞后去细胞基质血管置于－20
°
冰箱保存备用；
[0016]S108、最终裁剪合适大小或形状作为主动脉瓣膜或肺动脉瓣的替代物。
[0017]优选的，所述步骤S100中在取出主动脉瓣的血管前需要将猪上充分游离升主动脉
周围的脂肪、心包膜、心包等多余的组织去除。
[0018]优选的，所述步骤S105中采用伊红为细胞进行染色，伊红为，主要使细胞质和中的成分着红色。
[0019]优选的，所述步骤S106采用环氧乙烷灭菌时需要注意温度、浓度的控制，需要将温度控制在4℃左右，且所述环氧乙烷灭菌过程中环氧乙烷浓度应不超过1.82mg/m3(1ppm)。
[0020]与现有技术相比，本专利技术提供了一种脱细胞猪带瓣血管的制备方法和应用，具备以下有益效果：
[0021]1、该脱细胞猪带瓣血管的制备方法在应用裁剪合适大小或形状作为主动脉瓣膜或肺动脉瓣的替代物，此进程中脱细胞方法脱细胞干净，对胶原破坏小，试剂相对简单容易获取，脱细胞后去细胞基质血管可以用于血管的置换，同时可以裁剪合适的形状，作为创面的敷料使用，此技术用猪主动脉作为去细胞基质材料，材料来源容易，进而解决了人工带瓣血管容易感染，长血栓，与自身组织不可相容，无自我生长修复的问题。
附图说明
[0022]图1为本专利技术细胞猪带瓣血管制备流程示意图。
具体实施方式
[0023]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0024]请参阅图1，一种脱细胞猪带瓣血管的制备方法和应用，包括原材料的准备、实验仪器的准备、实验进程的监测、试验结果的分析以及实验成品的获取；
[0025]具体操作步骤如下：
[0026]S100、准备猪上充分游离升主动脉，得到猪含有主动脉瓣的血管留作备用；
[0027]S101、准备玻璃容器与灭菌蒸馏水；
[0028]S102、将上述血管放入玻璃容器中并向其中加入灭菌蒸馏水；
[0029]S103、将容器置于调速多用振荡器中震荡6小时后倒掉容器中的液体，用蒸馏水冲洗20次，每次3分钟；
[0030]S104、再向容器中加入1％triton
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100震荡6小时后，用蒸馏水冲洗20次，每次3分钟，加入新的灭菌蒸馏水继续振荡6小时，如此循环往复7天；
[0031]S105、7天后取部分样本行HE染色，检测细胞等免疫物质是否脱离干净；
[0032]S106、再利用环氧乙烷进行灭菌；
[0033]S107、然后取出脱离细胞后去细胞基质血管置于－20
°
冰箱保存备用；
[0034]S108、最终裁选择合适管道大小作为主动脉瓣膜或肺动脉瓣的替代物。
[0035]进一步的，所述步骤S100中在取出主动脉瓣的血管前需要将猪上充分游离升主动脉周围的脂肪、心包膜、心包等多余的组织去除。
[0036]进一步的，所述步骤S105中采用伊红为细胞进行染色，伊红为，主要使细胞质和中的成分着红色。
[0037]进一步的，所述步骤S106采用环氧乙烷灭菌时需要注意温度、浓度的控制，需要将温度控制在4℃左右，且所述环氧乙烷灭菌过程中环氧乙烷浓度应不超过1.82mg/m3(1ppm)。
[0038]工作原理：该脱细胞猪带瓣血管的制备方法在应用制备时，在猪上充分游离升主动脉，除去周围的脂肪，心包膜，心包等多余组织，取出猪含有主动脉瓣的血管，收集好后在玻璃容器中备用，制备好20％氯化钠溶液，加入到含有带瓣血管的玻璃容器中，然后盖上瓶盖，容器置于调速多用振荡器中震荡6小时后倒掉容器中的液体，用蒸馏水冲洗20次，每次3分钟，加入1％triton
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100震荡6小时，倒掉容器中的液体，用蒸馏水冲洗20次，每次3分钟，加入新的20％氯化钠溶液继续振荡6小时，如此循环往复7天，7天后取部分样本行HE染色，检测细胞等免疫物质是否脱离干净，环氧乙烷灭菌，取出脱离细胞后去细胞基质血管置于－20
°
冰箱保存备用，裁剪合适大小口径或形状作为主动脉瓣膜或肺动脉瓣的替代物，此进程中脱细胞方法脱细胞干净，对胶原破坏小，试剂相对简单容易获取，此技术用猪带瓣膜主动脉作为去细胞基质材料，材料来源容易，进而解决了人工带瓣血管需要终身抗凝，血栓，与自身组织不可相容，无自我生长修复的问题。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脱细胞猪带瓣血管的制备方法和应用，其特征在于：包括原材料的准备、实验仪器的准备、实验进程的监测、试验结果的分析以及实验成品的获取；具体操作步骤如下：S100、准备猪上充分游离升主动脉，得到猪含有主动脉瓣的血管留作备用；S101、准备玻璃容器与灭菌蒸馏水；S102、将上述血管放入玻璃容器中并向其中加入灭菌蒸馏水；S103、将容器置于调速多用振荡器中震荡6小时后倒掉容器中的液体，用蒸馏水冲洗20次；S104、再向容器中加入1％triton
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100震荡6小时，加入新的灭菌蒸馏水继续振荡6小时，如此循环往复7天；S105、7天后取部分样本行HE染色，检测细胞等免疫物质是否脱离干净；S106、再利用环氧乙烷进行灭菌；S107、然后取出脱离细胞后去细胞基质血管置于－20...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢霆，蔡兴赳，项梅，柳德斌，黎檀香，郭玉娟，
申请(专利权)人：海南省人民医院，
类型：发明
国别省市：