【技术实现步骤摘要】
用于表达黏蛋白型O
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糖基化蛋白的原核载体和系统、黏蛋白型O
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糖基化蛋白的制备方法
[0001]本专利技术属于生物
,特别是涉及用于表达黏蛋白型O
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糖基化蛋白的原核载体和系统、黏蛋白型O
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糖基化蛋白的制备方法。
技术介绍
[0002]黏蛋白型O
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糖基化蛋白(又称O
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GalNAc糖基化蛋白),是在蛋白质的丝氨酸或苏氨酸的侧链羟基结合N
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乙酰氨基半乳糖基(GalNAc)为基础的糖基化修饰蛋白。黏蛋白型O
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糖基化修饰蛋白包括(1)黏蛋白(Mucin),(2)治疗型蛋白,如细胞因子白介素(IL
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2)、粒细胞集落刺激因子(G
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CSF)等,(3)抗体蛋白,如IgA,(4)除Mucin以外的其他的肿瘤相关抗原蛋白等。
[0003]黏蛋白作为黏蛋白型O
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糖基化蛋白的典型代表,在各种不同肿瘤中的过度表达和异常糖基化 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.用于表达黏蛋白型O
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糖基化蛋白的原核表达载体,其特征在于,其包含编码以下酶或蛋白的表达框:糖基转移酶;合成N
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乙酰基半乳糖胺的差向异构酶;含有丝氨酸或苏氨酸的糖基受体;和折叠酶。2.如权利要求1所述的原核表达载体,其特征在于,所述糖基转移酶选自ppGalNAc
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Ts酶;优选地,所述糖基转移酶选自ppGalNAc
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T1酶、ppGalNAc
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T2酶、ppGalNAc
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T3酶、ppGalNAc
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T4酶、ppGalNAc
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T5酶、ppGalNAc
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T6酶、ppGalNAc
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T7酶、ppGalNAc
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T8酶、ppGalNAc
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T9酶、ppGalNAc
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T10酶、ppGalNAc
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T11酶、ppGalNAc
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T12酶、ppGalNAc
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T13酶、ppGalNAc
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T14酶、ppGalNAc
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T15酶、ppGalNAc
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T16酶、ppGalNAc
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T17酶、ppGalNAc
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T18酶、ppGalNAc
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T19酶或ppGalNAc
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T20酶;更优选地,所述糖基转移酶为ppGalNAc
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T2酶;和/或,所述差向异构酶为UDP
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葡萄糖
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差向异构酶;和/或,所述糖基受体选自Mucin蛋白、治疗蛋白、抗体蛋白或肿瘤抗原蛋白;优选地,所述Mucin蛋白选自MUC 1蛋白、MUC 2蛋白、MUC 3蛋白、MUC 4蛋白、MUC 5AC蛋白、MUC 5B蛋白、MUC 6蛋白、MUC 7蛋白、MUC 8蛋白、MUC 9蛋白、MUC 10蛋白、MUC 11蛋白、MUC 12蛋白、MUC 13蛋白、MUC 14蛋白、MUC 15蛋白、MUC 16蛋白、MUC 17蛋白、MUC 18蛋白、MUC 19蛋白、MUC 20蛋白...
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