【技术实现步骤摘要】
一种高丰度粪便微生物基因组DNA提取的方法及设备
[0001]本专利技术涉及一种基因提取领域，具体是一种高丰度粪便微生物基因组DNA提取的方法及设备。
技术介绍
[0002]微生物是地球最早出现的生命形式，这种简单而古老的生命决定了地球演化的方向和进程，孕育了人类的文明。以各种形式存在的巨大微生物多样性，也被称为地球关键元素循环过程的引擎，是联系大气圈、水圈、岩石圈及生物圈等物质与能量交换的重要纽带，维系着人类和地球生态系统的可持续发展
[0003]作为一切分子生物学研究的基础，核酸的提取永远是开展一项研究的第一步，提取核酸的质量高低是下游分子生物学实验成败的关键，DNA提取一般有以下几种方法，第一种为快速抽提法，其所用试剂少，步骤简略，实验时间较短；第二种为蛋白酶法，是实验室最常用方法之一；第三种为离心柱纯化，该方法受人为操作因素影响小，提取DNA的纯度稳定性很高；第四种为磁珠法，该方法价格很高，不利于常规实验。
[0004]就蛋白酶法而言，是利用酚氯仿对裂解体系进行反复抽提以去除蛋白质，实现DNA与蛋白质...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种高丰度粪便微生物基因组DNA提取的方法，其特征在于，所述高丰度粪便微生物基因组DNA提取的方法包括以下步骤：步骤一：取相应样品1
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2g，并对其进行破碎处理，加入一定量组织匀浆缓冲液混合形成匀浆液，取一定量匀浆液与试管中进行离心处理，并弃去上层清液，再向沉淀中加入定量无菌水，迅速重悬后加入消化缓冲液混合；步骤三：向悬液中加入40ml的10％SDS和10ml蛋白酶K(20mg/ml)，振荡混合后，置于50～55℃水浴消化一定时间，并在水浴过程中不时对其晃动，确保液体混匀；步骤四：离心处理：将处理后的液体取出并置于提取设备中，在提取设备的作用下，自动向液体中加入抽提所需的酚、氯仿、异戊醇，并对液体进行多次离心处理，每次离心完成后，提取设备可自动将所需上层清液排出；步骤五：将所得上层清液从离心抽提设备中取出并置于试管内，向其中加入无水乙醇，使其质粒沉淀，再次离心并除去上层清液，并加入70％乙醇清洗DNA沉淀，清洗两次左右，最后将DNA沉淀溶于ddH2O中。2.一种高丰度粪便微生物基因组DNA提取设备，其特征在于，用于实现如权利要求1所述的离心处理，包括：基台(1)，所述基台(1)上固定安装有固定板(2)，所述固定板(2)上固定安装有横板(3)和挡板(13)，所述固定板(2)上还固定有用于承接所需产物的盛放箱(12)，所述横板(3)上固定安装有用于盛放所需添加溶液的储料桶(33)，所述基台(1)上固定安装有离心机(4)，所述离心机(4)上转动安装有承接台(5)，所述承接台(5)上开设有限位槽；离心管(6)，设置在所述基台(1)上且用于盛放通过蛋白酶处理后的溶液，所述离心管(6)朝向基台(1)的一侧固定安装有与所述限位槽卡合的限位杆，所述离心管(6)上还固定有与所述挡板(13)配合的限位轮(11)以及用于输送所述离心管(6)内溶液的单向阀(10)；密封杆(21)，活动密封安装在所述离心管(6)内且中心呈导通设置，所述密封杆(21)上设置有与所述离心管(6)连接的卡合机构，所述横板(3)上设置有与所述密封杆(21)连接的升降机构，所述升降机构驱动所述密封杆(21)在竖直方向上往复运动，并通过所述卡合机构调节所述离心管(6)高度；封堵机构，设置在所述密封杆(21)内，所述封堵机构包括封堵组件和呈对称设置的密封板(32)，两个所述密封板(32)可做相互靠近或远离运动，以切换所述密封杆(21)密封或导通状态；下料机构，设置在所述横板(3)上且与所述储料桶(33)连接，所述升降机构通过所述密封杆(21)驱动所述密封板(32)与所述下料机构配合，以使两个所述密封板(32)做相互远离运动，并在所述密封杆(21)与所述下料机构配合时，通过所述下料机构将所述储料桶(33)内的物料输送至离心管(6)内。3.根据权利要求2所述的一种高丰度粪便微生物基因组DNA提取设备，其特征在于，所述卡合机构包括开设在所述离心管(6)上且呈对称设置的一号限位孔(7)和二号限位孔(8)以及三号限位孔(9)，所述密封杆(21)上设置有与所述一号限位孔(7)和所述二号限位孔(8)以及所述三号限位孔(9)配合的滑动组件，所述一号限位孔(7)和所述二号限位孔(8)以及所述三号限...
【专利技术属性】
技术研发人员：李夏西，胡威，李泽华，
申请(专利权)人：南方医科大学深圳医院，
类型：发明
国别省市：
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