【技术实现步骤摘要】
一种去除质粒内毒素的试剂及应用
[0001]本专利技术涉及分子生物学领域，具体涉及一种去除质粒内毒素的试剂及应用。
技术介绍
[0002]内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的脂多糖，一般在细胞死亡或者裂解的时候释放到周围介质中，有时候也会从活细胞中泄漏。革兰氏阴性菌几乎无处不在，所以内毒素的也几乎存在任何地方。内毒素存在会极大程度地影响转染效率，同时内毒素还可能激活免疫细胞的非特异反应，造成实验中的假阳性。因此为了保证高转染率和转染细胞高存活率，必须去除质粒中的内毒素。
[0003]目前通常采用的去除质粒中内毒素的方法有TritonX
‑
114雾点法和层析法。TritonX
‑
114雾点法及其改进方法所用时间较久，而且会导致质粒浓度下降，且会残留TritonX
‑
114；层析法常见的为亲和层析和离子交换层析，层析法去除内毒素的级别能达到临床级别，但成本较高，质粒浓度也会降低。
[0004]CN111676215A公开了一种去内毒素质粒提取试剂盒，所述的去内毒素...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种去除质粒内毒素的试剂，其特征在于，所述试剂包括质量分数为8
‑
12%的TritonX
‑
114和TE缓冲液，其中，所述TE缓冲液包含有体积分数为10
‑
15%的有机溶剂。2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，含有体积分数为10
‑
15%的有机溶剂的TE缓冲液通过如下方法制备得到：向去内毒素的水中加入1M Tris
‑
HCl和0.5M EDTA
‑
2Na，定容至1000mL，然后将得到的溶液与有机溶剂按照体积比进行混合使有机溶剂的体积占总体积的10
‑
15%。3.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂包括质量分数为10%的TritonX
‑
11和TE缓冲液，其中，所述TE缓冲液包含有体积分数为12%的有机...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙益军，张峰，王雪根，李阳，
申请(专利权)人：江苏凯基生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。