本发明专利技术公开了解淀粉芽孢杆菌及其菌剂在黑水虻处理畜禽粪便中的应用，涉及生物菌株利用开发技术领域，其中的解淀粉芽孢杆菌LYM152已于2019年9月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类命名为Bacillus amyloliquefaciens LYM152，保藏编号为CGMCC No.18497，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。本发明专利技术公开的解淀粉芽孢杆菌具有抗菌、除臭、消化酶活力高的特点，其菌剂在畜禽粪便处理中具有良好除臭效果，联合黑水虻强化畜禽粪便降解效果更显著。效果更显著。效果更显著。
【技术实现步骤摘要】
解淀粉芽孢杆菌及其菌剂在黑水虻处理畜禽粪便中的应用
[0001]本专利技术涉及生物菌株利用开发
，尤其涉及解淀粉芽孢杆菌及其菌剂在黑水虻处理畜禽粪便中的应用。
技术介绍
[0002]我国畜禽粪污排放量大，是农业面源污染主要来源。据第二次全国污染源普查测算，2019年我国畜禽粪污年产量在30.5亿吨。集约化养殖场日产粪污量庞大，排出物中含有大量有机物、病原微生物和寄生虫卵，还有重金属、添加剂、氮、磷、臭气等污染，畜禽粪污给农业生产和农村生活造成很大的生态压力。传统处理方法技术简单、投资小，但资源化水平较低且有二次污染和资源浪费等问题，而主流的好氧堆肥和厌氧沼气发酵则存在投资大、收益低的弊端。
[0003]近几年以黑水虻为代表的昆虫处理畜禽粪便技术受到广泛关注。黑水虻(Hermetia illucens L.)是腐生性昆虫，幼虫具有食性杂、食量大、抗逆性强、不传播疾病、繁殖迅速、饲养成本低等优点，对畜禽粪便有着极强的摄取能力。畜禽粪便经幼虫转化后，虫体可用于高价值动物蛋白饲料，虫粪可生产高附加值有机肥。2013年FAO将黑水虻列入最主要的蛋白饲料替代昆虫之一，在全世界范围进行推广应用。目前黑水虻处理畜禽粪便技术已经逐渐得到认可，但是应用中仍然存在臭气较重、病原菌消除等诸多问题，比如，尤其是筛选了一些功能微生物，在畜禽粪便处理过程中发挥了重要作用。
[0004]解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)属芽孢杆菌，不仅能产生淀粉酶、蛋白酶等多种消化酶，而且能产生脂肽类抗生素包括伊枯草菌素(iturins)、芬枯草菌素(fengycins)和表面活性素(surfactin)，具有广谱抑菌活性，可抑制多种植物病原菌的生长，具有促进植物生长的功能，广泛用于生物防治、有机肥生产、土壤改良等领域。
技术实现思路
[0005]专利技术目的：为了克服现有技术中存在的不足，本专利技术提供解淀粉芽孢杆菌具有抗菌、除臭、消化酶活力高的特点，其菌剂在黑水虻处理畜禽粪便中的应用效果显著。
[0006]技术方案：为实现上述目的，本专利技术的一种解淀粉芽孢杆菌LYM152，该菌株分离自黑水虻肠道，已于2019年9月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类命名为Bacillus amyloliquefaciens LYM152，保藏编号为CGMCC NO.18497；所述菌株的16S rRNA基因序列如SEQ NO.1所示。
[0007]一种菌剂，该菌剂包括权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌LYM152。
[0008]一种制备所述菌剂的方法，包括以下步骤：
[0009]S1、菌株活化：挑取菌种划线接种至固体斜面培养基，于恒温培养箱28～37℃培养16～24h；
[0010]S2、液体种子制备：将步骤S1中活化好的解淀粉芽孢杆菌LYM152接种于装有液体种子培养基的容器中，纱布封口，28～37℃、160～220r/min条件下振荡培养16～24h，得到
液体种子；
[0011]S3、液体发酵：将步骤S2中制备的液体种子按体积比1～10％接种量接种于发酵培养基，转速200～700r/min，溶氧控制20～40％，pH 6.0～7.5，温度28～37℃，10L发酵罐通气培养24～48h，得到解淀粉芽孢杆菌LYM152的液体菌剂。
[0012]进一步地，所述菌剂可浓缩制成液体菌剂或冷冻干燥制成固体菌粉，所述菌剂中解淀粉芽孢杆菌LYM152的活菌量不低于108cfu/mL或108cfu/g。
[0013]进一步地，所述固体斜面培养基为：葡萄糖1～3g/L，酵母浸粉3～7g/L，蛋白胨5～15g/L，NaCl 2～7g/L，琼脂15～20g/L，蒸馏水溶解定容至1L，pH7.0～7.2，121℃高压蒸汽灭菌15～20min。
[0014]进一步地，所述液体种子培养基为：葡萄糖5～15g/L，牛肉膏1～5g/L，酵母浸粉3～7g/L，KH2PO
2 0.5～2.0g/L，MgSO4·
7H2O 0.1～1.0g/L，CaCl2·
2H2O 0.1～0.5g/L，(NH4)2SO
2 1～5g/L，蒸馏水溶解定容至1L，pH 7.0～7.2，121℃高压蒸汽灭菌15～20min。
[0015]进一步地，所述发酵培养基为：葡萄糖15～25g/L，牛肉膏1～5g/L，酵母浸粉0.5～2.0g/L，KH2PO
4 0.5～2.0g/L，MgSO4·
7H2O 0.2～0.6g/L，CaCl2·
2H2O 0.1～0.5g/L，柠檬酸铵1～5g/L，玉米浆5～15g/L，FeSO
4 0.5～2.0mg/L，维生素B
1 1～3mg/L，蒸馏水溶解定容至1L，pH 7.0～7.2，121℃高压蒸汽灭菌15～20min。
[0016]所述的菌剂在黑水虻处理畜禽粪便中的应用。
[0017]本专利技术的解淀粉芽孢杆菌及其菌剂在黑水虻处理畜禽粪便中的应用，至少具有以下技术效果：
[0018](1)本专利技术中的解淀粉芽孢杆菌LYM152(CGMCC NO.18497)分离自黑水虻肠道，具有繁殖速度快、发酵密度高、消化酶系丰富、广谱抗菌、不良环境耐受性强等优点；
[0019](2)本专利技术中的解淀粉芽孢杆菌LYM152(CGMCC NO.18497)能够应用于畜禽粪便除臭，有效减少畜禽粪便中恶臭气体和挥发性有机物的释放量，从源头上减少臭味的产生；除臭效果稳定，受温度影响较小，在常温条件下仍具有较好的除臭效果
[0020](3)本专利技术中的解淀粉芽孢杆菌LYM152(CGMCC NO.18497)能够应用于黑水虻处理畜禽粪便，能在黑水虻处理畜禽粪便体系中稳定长期定殖并发挥降解有机物、抑制病原菌、减少臭气产生释放等作用，达到加快畜禽粪便减量、减少黑水虻死亡率、提高黑水虻生长速度、缩短黑水虻预蛹时间等目的效果；
[0021](4)本专利技术中的解淀粉芽孢杆菌LYM152(CGMCC NO.18497)具有制备工艺简单高效、产品稳定可靠的特性，具有易形成商品化的明显的技术优势。
附图说明
[0022]图1为解淀粉芽孢杆菌LYM152的菌落形态；
[0023]图2为解淀粉芽孢杆菌LYM152的显微形态；
[0024]图3为解淀粉芽孢杆菌LYM152的电镜照片；
[0025]图4为解淀粉芽孢杆菌LYM152基于16S rRNA序列的系统发育树。
具体实施方式
[0026]以下结合图1至图4对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发
明，并非用于限定本专利技术的范围。
[0027]实施例1：解淀粉芽孢杆菌LYM152(CGMCC NO.18497)的分离筛选。
[0028]1、分离：本专利技术的菌株LYM152采用稀释涂布法分离获得，具体分离方法为：挑选畜禽粪便喂养的7日龄黑水虻幼虫20～30只，本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种解淀粉芽孢杆菌LYM152，其特征在于，该菌株分离自黑水虻肠道，已于2019年9月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类命名为Bacillus amyloliquefaciens LYM152，保藏编号为CGMCC No.18497；所述菌株的16S rRNA基因序列如SEQ NO.1所示。2.一种菌剂，其特征在于，该菌剂包括权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌LYM152。3.一种制备权利要求2所述菌剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、菌株活化：挑取菌种划线接种至固体斜面培养基，于恒温培养箱28～37℃培养16～24h；S2、液体种子制备：将步骤S1中活化好的解淀粉芽孢杆菌LYM152接种于装有液体种子培养基的容器中，纱布封口，28～37℃、160～220r/min条件下振荡培养16～24h，得到液体种子；S3、液体发酵：将步骤S2中制备的液体种子按体积比1～10％接种量接种于发酵培养基，转速200～700r/min，溶氧控制20～40％，pH 6.0～7.5，温度28～37℃，10L发酵罐通气培养24～48h，得到解淀粉芽孢杆菌LYM152的液体菌剂。4.根据权利要求3所述的菌剂的方法，其特征在于，所述固体斜面培养基为：葡萄糖1～3g/L，酵母浸粉3～7g/L，蛋白胨5～15g/L，NaCl 2～7g/L，琼脂15～20g/L，蒸馏水溶解定容至1L，pH 7.0～7.2，121℃...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈国忠，张兴晓，李有志，朱洪伟，张建龙，姜琳琳，于馨，汤文利，战余铭，
申请(专利权)人：山东省饲料兽药质量检验中心，
类型：发明
国别省市：
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