一种生物催化合成对羟基亚苄基丙酮的方法技术

本发明专利技术公开了一种生物催化合成对羟基亚苄基丙酮的方法，属于生物工程技术领域。本发明专利技术首先构建了一种过表达脱氧核糖醛缩酶的重组大肠杆菌，并利用该重组菌株的全细胞和固定化细胞，以丙酮为反应介质催化对羟基苯甲醛生成对羟基亚苄基丙酮。采用本发明专利技术提供的重组大肠杆菌全细胞催化制备对羟基亚苄基丙酮时，产量达到19g/L，对羟基苯甲醛的摩尔转化率达到99.8％。本发明专利技术提供的这种生物法制备对羟基亚苄基丙酮的方法，具有反应条件温和、工艺简单、易于控制等优点，同时有利于环境保护，易于推广应用。广应用。广应用。

【技术实现步骤摘要】
一种生物催化合成对羟基亚苄基丙酮的方法


[0001]本专利技术涉及一种生物催化合成对羟基亚苄基丙酮的方法，尤其是一种过表达脱氧核醛缩酶的重组大肠杆菌及其在合成对羟基亚苄基丙酮中的应用，属于生物工程


技术介绍

[0002]对羟基亚苄基丙酮(4
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羟基苯亚甲基丙酮)是脱氢姜酮的结构类似物，其一，相关研究表明对羟基亚苄基丙酮具有抗癌消炎等功能，可用于医疗保健产品，其二，对羟基亚苄基丙酮的氢化产物覆盆子酮是仅次于香兰素的香料化合物，市场价值高。
[0003]目前，对羟基亚苄基丙酮的制备方法以化学合成为主，即通过碱催化对羟基苯甲醛和丙酮的交叉羟醛缩合制得，但是其中碱的用量较大，易造成设备腐蚀和环境污染等问题。如勇纪新等人以10％～20％的氢氧化钠为催化剂催化对羟基苯甲醛和丙酮的缩合，得率为96％，缩合产物加冰醋酸中和碱然后结晶得到产品，酸和碱的大量使用易造成环境污染和设备腐蚀(CN93120105.5)。李观兵等人为了解决上述催化过程中酸和碱带来的环保问题将对羟基苯甲醛和丙酮在超临界流体状态下进行缩合，得率为96％，反本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.重组大肠杆菌，其特征在于，含有用于过表达脱氧核醛缩酶的重组质粒。2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，编码所述脱氧核糖醛缩酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求1或2所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组质粒是重组pRSF
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1。4.根据权利要求1或2所述的重组大肠杆菌，其特征在于，以E.coliBL21(DE3)为表达宿主。5.构建权利要求1～4任一所述重组大肠杆菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将编码脱氧核糖醛缩酶的基因克隆到表达载体pRSF
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1中，得到重组质粒，(2)将重组质粒转化至宿主细胞中。6.一种固定化的重组大肠杆菌，其特征在于，制备方法包括以下步骤：(1)培养权利要求1～4任一所述重组大肠杆菌并诱导其表达脱氧核糖醛缩酶，然后离心、收集得到湿菌体，(2)将8～10g湿菌体与8～10mL生理盐水混合制备成菌悬液，并于45～50℃保温；(3)将1～2g卡拉胶溶于30～40mL生理...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑璞，朱兴淼，陈鹏程，吴丹，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：