【技术实现步骤摘要】
可控生长工程菌及其构建方法和应用
[0001]本专利技术涉及肿瘤生物治疗
，尤其涉及可控生长工程菌及其构建方法和应用。
技术介绍
[0002]癌症是威胁人类健康的重大疾病之一，死于癌症的人数日益增加。随着生物医学的发展，癌症治疗方面已取得了突破性进展。目前肿瘤的主要治疗方式是手术、放疗及化疗的综合治疗，虽然在一定程度上可以缓解患者疼痛并使肿瘤体积缩小，但这些方法有着明显的局限性，包括肿瘤复发、药物耐受、以及机体毒副作用。近年来癌症研究人员研发出了一种新型癌症疗法即细菌介导的肿瘤疗法，用来解决目前临床上存在的问题。肿瘤微环境是肿瘤存在的细胞环境，很大程度上决定了肿瘤的生存和发展。肿瘤组织中不规则脉管系统导致的低氧、免疫抑制和营养丰富等独特的微环境使得兼性厌氧菌特异性地在此定居、繁殖，从而显示出细菌对肿瘤的高度靶向特异性。在细菌靶向定居肿瘤的过程中，细菌的病原相关分子模式，包括脂多糖、鞭毛蛋白、核酸等，会被机体的模式识别受体识别，通过激活相应的炎症信号通路，募集免疫细胞，引发强烈的炎症反应，并进一步激活机体的固有免疫反应与...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种可控生长工程菌，其特征在于，所述可控生长工程菌为在鼠伤寒沙门氏菌基础上，进行dapA基因的敲除，构建了DAP营养缺陷型沙门氏菌突变体。2.根据权利要求1所述的可控生长工程菌，其特征在于，所述鼠伤寒沙门氏菌为aroA突变的鼠伤寒沙门氏菌SL7207或relA、spoT突变的鼠伤寒沙门氏菌14028s/ΔppGpp。3.一种权利要求1或2所述的可控生长工程菌的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、构建携带dapA基因上游和下游序列的重组自杀质粒pDM4
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dapA U+D；S2、将所述重组自杀质粒pDM4
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dapA U+D导入至鼠伤寒沙门氏菌株中，通过两次同源重组，获得不能增殖的可控生长工程菌。4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，还包括以下步骤：S3、DAP小分子鉴定所述可控生长工程菌。5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述S3具体包括以下步骤：S3
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1、将所述可控生长工程菌在LB培养基中培养，细菌不生长；S3
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2、通过外源加入DAP分子，恢复增殖能力的细菌则为dapA突变的鼠伤寒沙门氏菌。6.根据权利要求3至5中任一项所述的构建方法，其特征在于，所述S1具体包括以下步骤：S1
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1、根据aroA突变的鼠伤寒沙门氏菌株SL7207基因组DNA或根据relA、spoT突变的鼠伤寒沙门氏菌14028s/ΔppGpp基因组DNA设计两组引物：用于扩增包含dapA基因上游DNA片段的引物1和引物2；以及用于扩增包含dapA基因下游的...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋健晖，郑金海，赵凌云，李也蔚，楚霞，
申请(专利权)人：湖南大学，
类型：发明
国别省市：
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