一种控制枯草芽孢杆菌基因组同源重组概率的方法技术

技术编号:36709600 阅读:30 留言:0更新日期:2023-03-01 09:35
本发明专利技术公开了一种控制枯草芽孢杆菌基因组同源重组概率的方法,属于基因工程领域。本发明专利技术以枯草芽孢杆菌为出发菌株,敲除了编码RecA蛋白的基因recA或诱导表达基因recA,通过诱导物质的添加调控微生物的同源重组,使得到的工程菌株产量稳定性大大提高。的工程菌株产量稳定性大大提高。的工程菌株产量稳定性大大提高。

【技术实现步骤摘要】
一种控制枯草芽孢杆菌基因组同源重组概率的方法


[0001]本专利技术涉及基因工程
,尤其涉及一种控制枯草芽孢杆菌基因组同源重组概率的方法。

技术介绍

[0002]同源重组又称一般性重组,发生在DNA的同源序列之间,同源重组是生物界普遍存在的现象,真核生物非姐妹染色单体的交换,姐妹染色单体的交换,细菌及某些低等真核生物的转化,细菌的转导、接合等都属于这一类型。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)作为革兰氏阳性菌的模型微生物,用于孢子形成机制和代谢调节的实验室研究,在自然界广泛分布,包括土壤表面,水环境和动物胃。它是一种非致病微生物,不含内毒素,并且通常被美国食品和药物管理局(FDA)认可为安全(GRAS)食品级微生物。此外,枯草芽孢杆菌具有许多优点,包括:细胞生长快,培养时间短,培养要求低,分泌蛋白质能力强,广泛用于工业酶生产,高附加值产品的生物合成。
[0003]然而利用枯草芽孢杆菌进行发酵生产伴随着多拷贝基因引起的同源重组,这导致产量的降低或消失。控制枯草芽孢杆菌发酵过程同源重组引起的产量下降或消失对于微生物发酵具本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种控制枯草芽孢杆菌基因组同源重组概率的方法,其特征在于:包括敲除所述枯草芽孢杆菌中编码RecA蛋白的基因recA或诱导表达recA的步骤。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述编码RecA蛋白的基因recA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:通过诱导型启动子以及非天然氨基酸诱导表达recA。4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:将原启动子替换为诱导型启动子,同时将RecA蛋白的第二个密码子替换为编码非天然氨基酸的密码子。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:通过诱导剂和非天然氨基酸的加入控制枯草芽孢杆菌基因组的同源重组概率。6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘延峰陈坚郭豪玉堵国成刘龙李江华吕雪芹田荣臻
申请(专利权)人:嘉兴未来食品研究院
类型:发明
国别省市:

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