诱导免疫应答的组合物和方法技术

本发明专利技术涉及一种包含病毒载体的组合物，该病毒载体包含具有编码来自冠状病毒SARS

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】诱导免疫应答的组合物和方法


[0001]本专利技术涉及诱导针对SARS
‑
CoV2(nC0V
‑
19)的免疫应答，合适地是保护性免疫应答。

技术介绍

[0002]冠状病毒19(SARS
‑
CoV2；有时也称为nCoV
‑
19或COVID
‑
19)是造成冠状病毒疾病暴发的病毒。
[0003]该疾病的症状包括发热、干咳、肌肉疼痛和呼吸问题，诸如呼吸困难/呼吸短促。在更严重的情况下，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭甚至死亡。世界卫生组织(WHO)估计死亡率高达感染个体的3.4％，许多评论员一致认为，一旦考虑到并不总是能报告的最轻微病例(例如，如果个体未寻求治疗或诊断)而对数字进行了调整，则死亡率为感染个体的大约1％
‑
2％。
[0004]根据世界卫生组织截至2020年3月7日的报告，全球确诊的COVID
‑
19病例数已超过100,000例。
[0005]当前没有获得许可的、可用于SARS
‑
CoV2感染的疫苗或治疗方法。迄今为止，现行疾病控制策略依赖于最大程度地减少与感染个体的接触，遵守标准的感染控制措施以限制院内传播，接触者追踪和隔离。许多国家/地区已经实施了影响数百万人的隔离措施。如意大利等欧洲国家/地区已对1600万人进行了隔离，这超过了总人口的四分之一。
[0006]许多流行病对健康和经济的影响一直很严重，而且还在继续升级。世界卫生组织2020年3月11日的报告将该暴发定性为大流行病。这是有史以来第一次由冠状病毒导致的大流行病。没有任何特效疗法加剧了经济影响并且更重要的是导致人员伤亡的问题。缺乏针对该病毒的任何疫苗是本领域中的严重问题。
[0007]为应对SARS
‑
CoV2暴发而在行为上发生的大规模改变所造成的物流影响是巨大的并且对健康造成了继发性风险。例如，在2020年3月9日，英国政府的环境、食品和农村事务部(Department for Environment,Food&Rural Affairs，DEFRA)被迫放松他们对运送车辆的限制的执行，以允许额外运送供应短缺的物品，包括非处方药物(诸如抗炎药)、卫生用品(诸如卫生纸)和基本食品。这些问题是由于缺乏对SARS
‑
CoV2感染/传播的控制而引起的进一步问题。
[0008]WO 2018/215766描述了一种用于MERS(中东呼吸综合征)冠状病毒(MERS
‑
CoV)的疫苗。该文件中提到的一种载体是ChAdOx1。该疫苗包含全长MERS CoV刺突蛋白，在5'末端添加有人tPA前导序列。在一个实施例中，核苷酸序列的相关部分经密码子优化以供人类使用。然而，当专利技术人继续制造为GMP(良好生产规范)生产作准备时，他们发现他们只能使用tet阻遏细胞系来这样做，这是一个问题。专利技术人在以期望的规模制造这种疫苗时面临许多困难。
[0009]本专利技术试图克服与现有技术相关的问题。

技术实现思路

[0010]我们描述了一种组合，该组合包含递送SARS
‑
CoV2抗原(刺突蛋白)的猿猴腺病毒载体(诸如ChAdOx1)。通过特别关注编码抗原的核苷酸序列，尤其是解决遗传稳定性和序列重排/突变的技术问题，已经产生了这种组合。这种方法带来了惊人的技术益处，包括无需Tet阻遏即可进行高效高产量生产，以及在保留正确货物序列的情况下成功挽救完整病毒。这种新组合所带来的主要益处是仅施用单次疫苗后即可诱导强烈的免疫应答。
[0011]另外，专利技术人描述了与SARS
‑
CoV2刺突蛋白抗原的N端融合的前导序列/分泌序列(诸如组织纤溶酶原激活物(tPA)氨基酸序列)的任选并入。这种三重组合(ChAdOx1+tPA+SARS
‑
CoV2刺突蛋白)带来增强的免疫原性。专利技术人提供的数据证明单次剂量的这种组合构建体带来相关免疫应答的显著增加
‑
在下文的实例部分提供了证明这些优点的数据。
[0012]因此，在一个方面，本专利技术涉及一种包含病毒载体的组合物，该病毒载体包含具有编码来自冠状病毒SARS
‑
CoV2的刺突蛋白的多核苷酸序列的核酸，其特征在于所述病毒载体是基于腺病毒的载体。
[0013]合适地，所述基于腺病毒的载体是基于猿猴腺病毒的载体。
[0014]合适地，所述基于腺病毒的载体是ChAdOx 1。
[0015]合适地，所述刺突蛋白包含受体结合结构域(RBD)。
[0016]合适地，所述刺突蛋白是全长刺突蛋白。
[0017]合适地，所述刺突蛋白以与组织纤溶酶原激活物(tPA)序列按顺序N端
‑
tPA
‑
刺突蛋白
‑
C端的融合形式存在。
[0018]合适地，所述tPA具有氨基酸序列SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8。
[0019]合适地，所述刺突蛋白具有氨基酸序列SEQ ID NO:1。
[0020]合适地，所述多核苷酸序列包含SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4的序列，优选SEQ ID NO:4的序列。
[0021]合适地，所述病毒载体序列与ECACC登录号12052403中相同。
[0022]合适地，向哺乳动物受试者施用单次剂量的如上所述的组合物在所述受试者中诱导保护性免疫。
[0023]合适地，向哺乳动物受试者施用两个剂量的如上所述的组合物在所述受试者中诱导保护性免疫。
[0024]合适地，向哺乳动物受试者施用第一剂量的如上所述的组合物，然后向所述受试者后续施用第二剂量的所述组合物，在所述受试者中诱导保护性免疫。
[0025]在另一个实施例中，本专利技术涉及如上所述的组合物诱导或用于诱导针对SARS
‑
CoV2的免疫应答的用途。
[0026]合适地，所述免疫应答是哺乳动物受试者中的免疫应答。
[0027]在另一个实施例中，本专利技术涉及如上所述的组合物，该组合物在哺乳动物受试者中诱导或用于诱导针对SARS
‑
CoV2的免疫应答，其中向所述受试者施用单次剂量的所述组合物。
[0028]在另一个实施例中，本专利技术涉及如上所述的组合物，该组合物在哺乳动物受试者中诱导或用于诱导针对SARS
‑
CoV2的免疫应答，其中向所述受试者施用两个剂量的所述组
合物。
[0029]在另一个实施例中，本专利技术涉及如上所述的组合物，该组合物在哺乳动物受试者中诱导或用于诱导针对SARS
‑
CoV2的免疫应答，其中向所述受试者施用第一剂量的所述组合物，并且随后向所述受试者施用第二剂量的所述组合物。
[0030]在另一个实施例中，本专利技术涉本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种包含病毒载体的组合物，该病毒载体包含具有编码来自冠状病毒SARS
‑
CoV2的刺突蛋白的多核苷酸序列的核酸，其特征在于，所述病毒载体是基于腺病毒的载体。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述基于腺病毒的载体是ChAdOx 1。3.根据权利要求1或权利要求2所述的组合物，其中所述刺突蛋白包含受体结合结构域(RBD)。4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述刺突蛋白是全长刺突蛋白。5.根据任一项前述权利要求所述的组合物，其中所述刺突蛋白以与组织纤溶酶原激活物(tPA)序列按顺序N端
‑
tPA
‑
刺突蛋白
‑
C端的融合形式存在。6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述tPA具有氨基酸序列SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8。7.根据任一项前述权利要求所述的组合物，其中所述刺突蛋白具有氨基酸序列SEQ ID NO:1。8.根据任一项前述权利要求所述的组合物，其中所述多核苷酸序列包含SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4的序列，优选SEQ ID NO:4的序列。9.根据权利要求2至8中任一项所述的组合物，其中所述病毒载体序列与ECACC登录号12052403中相同。10.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中向哺乳动物受试者施用单次剂量的所述组合物在所述受试者中诱导保护性免疫。11.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中向哺乳动物受试者施用第一剂量的所述组合物，然后向所述哺乳动物受试者施用第二剂量的所述组合物，在所述受试者中诱导保护性免疫。12.根据任...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：牛津大学创新有限公司，
类型：发明
国别省市：