冠状病毒疫苗制造技术

本公开涉及可用于预防或治疗冠状病毒科或SARS

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】冠状病毒疫苗


[0001]本专利技术涉及可用于预防或治疗冠状病毒科病毒感染的多肽。

技术介绍

[0002]初步研究表明SARS
‑
CoV
‑
2与SARS
‑
CoV相似，为此，以前存在关于保护性免疫应答的研究数据。有关SARS
‑
CoV的各种报道提示体液和细胞介导二者的免疫应答的保护作用。针对SARS
‑
CoV的刺突(S)和核壳(N)蛋白产生的抗体应答在SARS
‑
CoV感染的患者中特别普遍。尽管有效，但发现抗体应答在恢复期SARS
‑
CoV患者中是短暂的。相反，T细胞应答已证实在恢复的患者中提供感染后的长期记忆。
[0003]生产有效疫苗的挑战之一是，在不同人类受试者的免疫系统与由感染性病毒表达的不同抗原的相互作用的方式中存在巨大的可变性。本专利技术人先前已经表明，个体受试者的免疫应答通过单个抗原T细胞表位被受试者的多个HLA等位基因识别的能力来预测。被受试者的多个HLA等位基因所限制的T细胞表位充当预测个体患者的肽特异性T细胞应答的遗传生物标志物。这些遗传生物标记物被称为“个人表位”或“PEPI”。多HLA等位基因结合性PEPI以比被接种对象的单一HLA等位基因所限制的T细胞表位显著更高的速率诱导T细胞应答。在疫苗组合物的多肽中T细胞抗原决定部位的鉴定，其为在人类模型群体中的个体的多HLA等位基因结合性PEPI，已显示预测在临床试验中报导的免疫反应率(WO 2018/158456、WO 2018/158457和WO 2018/158455)。
[0004]开发有效疫苗的第二个挑战是病毒通过突变的持续进化和感染病毒异质性的潜力。
[0005]第三个挑战是需要快速开发、安全性试验和验证新出现的SARS
‑
CoV
‑
2冠状病毒的疫苗的效力，并随后大规模生产疫苗，以满足即时的群体需求。常规疫苗开发是复杂且具有挑战性的过程。与由死亡或减毒病原体、灭活毒素、和重组亚单位制成的常规疫苗相比，肽疫苗提供了若干优点。短多肽可以快速合成，并且肽疫苗生产相对便宜。另外，肽疫苗避免了包含对宿主具有高反应原性的不必要组分，例如脂多糖、脂质、和毒素。含有Montanide佐剂的肽疫苗的安全性和免疫原性已经在涉及超过6,000名患者和超过200名健康志愿者的多个临床试验中得到证实。
[0006]肽疫苗开发策略通常以选择寻求最大化覆盖全球群体的HLA等位基因限制性表位的组合为目标。根据这种方法，选择具有不同HLA结合特异性的多种肽，以提供由基于肽(表位)的疫苗靶向的患者群体的增加的覆盖，还考虑到不同的HLA类型在不同的种族中以显著不同的频率表达。例如，SF Ahmed等人提出了一组筛选的T细胞表位，估计其提供了全球以及中国群体对SARS
‑
CoV
‑
2的广泛覆盖(Ahmed et al.Viruses,12(3).2020)。他们使用HLA限制性SARS
‑
CoV衍生表位和公众可获得的IEDB Population Coverage Tool(http://tools.iedb.org/population)指导针对SARS
‑
CoV
‑
2的疫苗的实验工作。
[0007]这种方法试图考虑不同种族群体中HLA多态性和频率。然而，实际上，最常见的HLA限制性表位不诱导HLA匹配个体中的免疫应答，并且临床试验导致比预期更低的免疫应答
率(Slingluff CL.Cancer J 2011；17(5):343
–
50)。此外，CD8 T细胞识别的肽已证实既是选择性的且是极其敏感的；一个氨基酸变化可以将特定表位改变为非免疫原性肽。
[0008]其它方法包含mRNA或pDNA载体中S蛋白的全序列。(Smith TRF et al.under review 10.21203/rs.3.rs
‑
16261/v1；Safety and Immunogenicity Study of 2019
‑
nCoV Vaccine(mRNA
‑
1273)for Prophylaxis SARS CoV
‑
2 Infection,NCT04283461)。
[0009]因此，迫切需要一种疫苗，这种疫苗对全球人口的高比例有效，对病毒抗原突变具有抵抗力，并能迅速通过临床验证和生产的必要步骤。

技术实现思路

[0010]专利技术人集中精力开发针对SARS
‑
CoV
‑
2的全球性多肽疫苗，以解决不同个体的免疫反应的异质性和感染病毒的潜在异质性的双重挑战。本文详述的肽设计概念将共有的个人表位设计与B细胞表位序列的进一步选择合并，导致在个体内的重叠的多HLA结合表位，旨在诱导CD4
+
、CD8
+
和产生抗体的B细胞应答。因此，专利技术人已经鉴定了目前已知的SARS
‑
CoV
‑
2病毒抗原的保守区的30聚体多肽片段，其包括(i)在具有代表全球群体的HLA基因型的人类受试者的模型群体中的最大CD8
+
个人表位(PEPI)；(ii)全球群体中的最大CD4
+
个人表位(PEPI)；和(iii)线性B细胞表位。包括由专利技术人鉴定的多肽的肽疫苗，预计在人类群体中的惊人高比例的受试者中诱导细胞毒性T细胞、辅助T细胞和B细胞应答。通过组合多于一个的由专利技术人鉴定的抗原片段，优选地通过组合由专利技术人从不同的SARS
‑
CoV
‑
2结构蛋白鉴定的抗原片段，可以在人类群体中实现甚至更高的应答率，和针对进化的异源感染病毒的持续效力。
[0011]因此，在第一方面，本公开提供了一种多肽、或一种长度至多50个氨基酸，或长度至多60个氨基酸的多肽组，其中所述多肽包括选自SEQ ID NO:1至17的氨基酸序列或由其组成。
[0012]在另一个方面，本专利技术提供了一种长度多至50个氨基酸、或长度至多60个氨基酸的多肽组，其中每个多肽包括选自SEQ ID NO:1至17的不同氨基酸序列或由其组成。
[0013]多肽的一或多个可以由冠状病毒科、β
‑
冠状病毒科或SARS
‑
CoV
‑
2蛋白的片段组成。多肽中的每一个可包括选自SEQ ID NO:1至17中的序列的核酸序列，其是不同的冠状病毒科、β
‑
冠状病毒科或SARS
‑
CoV
‑
2蛋白的片段。多肽组可以包含来自以下组中的至少二组、三组或全部四组的至少一个序列：(a)SEQ ID NO:1至11(SARS
‑
CoV
‑
2表面蛋白的片段)；(b)SEQ ID NO:12至1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种长度至多50个氨基酸的二或更多个多肽的多肽组，其中每个多肽包括选自SEQ ID NO:1至17的不同氨基酸序列。2.如权利要求1所述的多肽组，其中每个多肽由冠状病毒科蛋白的片段组成。3.如权利要求2所述的多肽组，其中每个多肽由SARS
‑
CoV
‑
2蛋白的片段组成。4.如权利要求1至3任一所述的多肽组，其中每个多肽包括选自SEQ ID NO:1至17中所示的氨基酸序列，所述氨基酸序列是不同的冠状病毒科或SARS
‑
CoV
‑
2蛋白的片段。5.如权利要求1至4任一所述的多肽组，其中所述多肽组包含来自以下组中的至少二组、三组或所有四组的至少一个序列：(a)SEQ ID NO:1至11；(b)SEQ ID NO:12至15；(c)SEQ ID NO:16；和(d)SEQ ID NO:17。6.如权利要求5所述的多肽组，其中所述多肽组包括十个多肽，所述十个多肽包括SEQ ID NO:2、5、7、9、12、13、14、15、16、和17的氨基酸序列或由其组成。7.如权利要求5所述的多肽组，其中所述多肽组包括九个多肽，所述九个多肽包括SEQ ID NO:2、5、9、12、13、14、15、16、和17的氨基酸序列或由其组成。8.一种药物组合物或试剂盒，其具有根据权利要求1至7任一所述的多肽组作为活性成分。9.如权利要求8所述的药物组合物或试剂盒，其包括多核酸、核糖核酸、或一起编码每个多肽的一或多个载体或细胞。10.如权利要求9所述的药物组...

【专利技术属性】
技术研发人员：佐尔特，
申请(专利权)人：帕普泰克疫苗有限公司，
类型：发明
国别省市：