silncRNA16、纳米靶向药物及其治疗铂类耐药肿瘤中的用途制造技术

本发明专利技术提供一种silncRNA16以及以silncRNA16制备的Nano

【技术实现步骤摘要】
silncRNA16、纳米靶向药物及其治疗铂类耐药肿瘤中的用途


[0001]本专利技术属于生物医药领域，涉及一种新型的纳米靶向药物及其用途，具体涉及一种silncRNA16、纳米靶向药物在治疗铂类耐药肿瘤中的用途。

技术介绍

[0002]肺癌是人类发病率和死亡率第一的恶性肿瘤，严重危害人类生命健康。临床研究表明，以铂类为基础的一线全身治疗进行3
‑
4周期后，1/3
‑
3/4的非小细胞肺癌(NSCLC)患者会产生明显耐药，且没有有效的二线药物。
[0003]研究显示，化疗耐药的原因涉及多个方面，最新研究显示活性氧(ROS)生成减少和清除增加是促进化疗耐药的重要原因。据报道，耐药癌细胞中ROS清除能力增加，抗氧化酶的活性增强，使耐药癌细胞中ROS浓度显著降低，避免细胞凋亡，加剧了肿瘤耐药。显然，细胞保护性抗氧化已成为有效抗肿瘤治疗的障碍。缺乏有效的治疗靶点、体内干预效果差、高效成熟的递送材料缺乏是克服化疗耐药的主要障碍，确定调节ROS浓度的新靶点，开发有效克服铂类耐药的新方法是临床的迫切需要。

技术实现思路

[0004]为了解决上述问题，本专利技术的目的在于提供一种silncRNA16，该silncRNA16可特异性结合并抑制lncRNA16，从而实现对由于肿瘤细胞中ROS浓度降低引起的耐药肿瘤的治疗。
[0005]本专利技术的另一目的在于提供一种纳米靶向药物。
[0006]本专利技术的第三个目的在于提供上述silncRNA16或纳米靶向药物的用途。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术提供一种silncRNA16，该silncRNA16的正义链序列如Seq ID No.1所示：5
’‑
CUCUAGGUACUACUAACCATT
‑3’
；该silncRNA16的反义链序列如Seq ID No.2所示：5
’‑
UGGUUAGUAGUACCUAGAGTT
‑3’
。
[0008]如上所述地，进一步在所述silncRNA16的正义链的5
’
端、反义链的5
’
端、反义链的3
’
端其中之一的位置进行荧光修饰
‑
化学修饰的联合修饰；或在所述silncRNA16的正义链的5
’
端、反义链的5
’
端、反义链的3
’
端中的任意两个位置分别进行荧光修饰和化学修饰。
[0009]如上所述地，当进行荧光修饰
‑
化学修饰的联合修饰时，化学修饰直接与silncRNA16的正义链的5
’
端、反义链的5
’
端或反义链的3
’
端连接。
[0010]如上所述地，所述荧光修饰使用的荧光染料为FAM、VIC、JOE、TET、TAMRA、ROX、Texas Red、LC RED460、FITC、cy3、cy3.5、cy5、cy5.5、cy7或cy7.5；所述化学修饰为胆固醇修饰、甲基化修饰、氟代修饰、氯代修饰中的一种或多种的联合修饰。
[0011]如上所述地，所述silncRNA16特异性结合并抑制lncRNA16表达。
[0012]本专利技术还提供一种纳米靶向药物，由上述的silncRNA16与药学上可接受的载体和/或辅料组成。
[0013]如上所述地，所述的药学上可接受的载体为N
‑
乙酰半乳糖胺分子、脂质体、纳米凝
胶、纳米棒、胶束、纳米微球、碳纳米管、树形分子或外泌体。
[0014]本专利技术还提供上述silncRNA16或纳米靶向药物在制备逆转肿瘤铂类化疗耐药的药物中的用途。
[0015]如上所述地，该肿瘤为肺肿瘤。
[0016]本专利技术还提供一种药物组合物，由上述silncRNA16或纳米靶向药物，和铂类药物组成。
[0017]优选地，所述铂类药物为顺铂、卡铂或奈达铂。
[0018]如上所述地，上述silncRNA16或纳米靶向药物按照5mg/kg的用量皮下给药，然后第二日将铂类药物按照0.5mg/kg的用量腹腔注射给药。
[0019]本专利技术所提供的silncRNA16能够沉默顺铂耐药A549细胞(以下简称为A549/DDP细胞)中lncRNA16的表达的同时，促进细胞ROS产生，提高顺铂耐药的非小细胞肺癌(NSCLC)对顺铂的敏感性。
[0020]本专利技术通过向铂类耐药的机体给药治疗的silncRNA16或纳米靶向药物Nano
‑
silncRNA16，实现逆转肿瘤铂类耐药。本专利技术通过RT
‑
qPCR分析NSCLC患者血浆lncRNA16含量与铂类药物化疗响应的相关性，发现lncRNA16在铂类不响应NSCLC患者血浆中高表达，且耐药后lncRNA16含量较治疗前显著升高。通过siRNA下调lncRNA16的表达，促进ROS浓度上调，从而抑制A549/DDP细胞的生长，说明lncRNA16是顺铂耐药过程中潜在的关键靶点，通过N
‑
乙酰半乳糖胺(GalNAC)递送silncRNA16在体内有效抑制lncRNA16，从而恢复耐顺铂NSCLC对顺铂的敏感性。
[0021]本专利技术的有益效果在于：
[0022]本专利技术提供一种silncRNA16或纳米靶向药物，该silncRNA16或纳米靶向药物在耐药NSCLC中富集、并将silncRNA16高效递送至A549/DDP细胞内，实现精准靶向lncRNA16，促进线粒体ROS生成，在体内体外实现逆转耐药NSCLC对顺铂耐药的效果。
附图说明
[0023]图1A为NSCLC化疗响应组和不响应组的患者血浆lncRNA16含量在铂类治疗前的统计图。
[0024]图1B为NSCLC化疗响应组和不响应组的患者血浆lncRNA16含量在铂类治疗后的统计图。
[0025]图1C为NSCLC化疗响应组和不响应组的患者血浆lncRNA16在铂类治疗前后的表达对比统计图。
[0026]图2为顺铂敏感株A549和顺铂耐药株A549/DDP中lncRNA16的比较。
[0027]图3A为通过流式细胞术比较顺铂敏感株A549和顺铂耐药株A549/DDP中ROS浓度的差异。
[0028]图3B通过流式细胞术比较顺铂敏感株A549和顺铂耐药株A549/DDP中ROS浓度差异的统计图。
[0029]图4为pGPU6/Neo的质粒图谱。
[0030]图5为顺铂耐药株A549/DDP中lncRNA16敲低后的ROS变化图。
[0031]图6为不同序列silncRNA16对A549/DDP细胞中lncRNA16的沉默效率统计图。
[0032]图7A为克隆形成检测不同序列silncRNA16对A549/DDP细胞的生长抑制作用。
[0033]图7B为克隆形成检测不同序列silnc本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种silncRNA16，其特征在于，该silncRNA16的正义链序列如Seq ID No.1所示：5
’‑
CUCUAGGUACUACUAACCATT
‑3’
；该silncRNA16的反义链序列如Seq ID No.2所示：5
’‑
UGGUUAGUAGUACCUAGAGTT
‑3’
。2.如权利要求1所述的silncRNA16，其特征在于，进一步在所述silncRNA16的正义链的5
’
端、反义链的5
’
端、反义链的3
’
端其中之一的位置进行荧光修饰
‑
化学修饰的联合修饰；或在所述silncRNA16的正义链的5
’
端、反义链的5
’
端、反义链的3
’
端中的任意两个位置分别进行荧光修饰和化学修饰。3.如权利要求2所述的silncRNA16，其特征在于，当进行荧光修饰
‑
化学修饰的联合修饰时，化学修饰直接与silncRNA16的正义链的5
’
端、反义链的5
’
端或反义链的3
’
端连接。4.如权利要求2或3所述的silncRNA16，其特征在于，所述荧光修饰使用的荧光染料为FAM、VIC、JOE、TET、TAM...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹启敏，吴楠，刘艳芳，王嫣，马媛媛，刘文忠，刘冰，
申请(专利权)人：北京肿瘤医院北京大学肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：