用于固定化酶的载体、其制备方法及其用途技术

本发明专利技术提供了用于固定化酶的载体、其制备方法及其用途。本发明专利技术提供了一种用于固定化酶的载体，所述载体为噬菌体M13水凝胶，其中所述噬菌体M13水凝胶通过pVIII蛋白的N端交联形成，并且所述噬菌体M13的pIII蛋白的N末端结合磁性纳米颗粒。本发明专利技术提供了所述用于固定化酶的载体的制备方法。本发明专利技术还提供了一种新型固定化酶，包括本发明专利技术所述的载体和固定于所述载体上的酶。本发明专利技术基于噬菌体M13和磁性纳米颗粒构建的载体在酶固定化领域具有重大的应用价值。价值。价值。

【技术实现步骤摘要】
用于固定化酶的载体、其制备方法及其用途


[0001]本专利技术属于生物工程领域，涉及一种用于固定化酶的载体，更具体地，本专利技术涉及一种基于噬菌体M13的固定化酶的载体。本专利技术还提供了所述载体的制备方法及其在固定化酶方面的用途。

技术介绍

[0002]酶作为一种天然的高分子生物催化剂，因具有极高的选择性、高催化活性、反应条件温和、污染小等诸多优点，在食品加工、医药等产业中有着极为广阔的应用前景。然而，游离酶在大规模工业化生产中由于回收困难、稳定性差而应用受限制。因此，固定化酶研究日益受到人们的重视。固定化酶经过几十年的发展，已经被广泛用于食品生产、生物制药、生物传感器、医药工业、环保技术及生物技术等多种领域。
[0003]近年来，科学家和工程师们通过理性设计和定向进化等不同途径，在酶分子的设计改造方面取得了巨大进展，多种酶的活性和稳定性已经可以获得突破性的提升。随着越来越多的酶工程和人工智能(AI)技术的发展，自由酶催化在不久的将来将是一个非常有前途的发展方向，特别是大分子底物体系的催化(Rix G,et al.,Nat Commu本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于固定化酶的载体，所述载体为噬菌体M13的水凝胶，其中所述噬菌体M13的水凝胶通过噬菌体M13的pVIII蛋白的N端交联形成，并且所述噬菌体M13的pIII蛋白的N端结合磁性纳米颗粒。2.根据权利要求1所述的用于固定化酶的载体，其中所述噬菌体M13的pIII蛋白的N末端包含能够特异性结合磁性纳米颗粒的连接肽FAP。3.根据权利要求1或2所述的用于固定化酶的载体，其中所述磁性纳米颗粒为Fe3O4颗粒；优选地，所述Fe3O4颗粒为无任何修饰的Fe3O4颗粒。4.根据权利要求1至3中任一项所述的用于固定化酶的载体，其中所述连接肽FAP为能够特异性结合Fe3O4颗粒的LPLSTQH。5.根据权利要求1至4中任一项所述的用于固定化酶的载体，其中，所述噬菌体M13与磁性纳米颗粒的比例为10
12
‑
10
16
pfu噬菌体M13/g磁性纳米颗粒；优选为1
‑9×
10
15
pfu噬菌体M13/g磁性纳米颗粒；更优选为1
‑9×
10
15
pfu噬菌体M13/g Fe3O4。6.根据权利要求1至5中任一项所述的用于固定化酶的载体的制备方法，所述方法包括以下步骤：1)淘选获得能特异性结合磁性纳米颗粒的噬菌体M13，并任选地进行规模培养；2)将磁性纳米颗粒和步骤1)得到的噬菌体M13置于缓冲液中，使磁性纳米颗粒与噬菌体M13结合；3)向步骤2)得到的结合物中加入交联剂，使噬菌体交联为噬菌体水凝胶，得到所述用于固定化酶的载体。7.根据权利要求6所述的方法，其中，在步骤1)中，所述磁性纳米颗粒为Fe3O4颗粒；优选地，所述特异性结合Fe3O4颗粒的噬菌体M13为pIII蛋白的N末端包含有LPLSTQH的噬菌体M13；优选地，在步骤2)中，所述Fe3O4颗粒的浓度为1
‑
10mg/mL，更优选为5
‑
8mg/mL；优选地，在步骤2)中，所述噬菌体M13的浓度为1
×
10
12
‑9×
10
13

【专利技术属性】
技术研发人员：于慧敏，齐文靖，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：