一种桑黄多糖及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种桑黄多糖及其制备方法与应用，包括将桑黄子实体进行热水浸提法提取，得到桑黄水溶性粗多糖，对获得的桑黄水溶性粗多糖进行初步纯化，将经初步纯化后得到的多糖组分进行精氨酸酶活性的筛选，并对抑制效果较好的多糖组分SSP

【技术实现步骤摘要】
一种桑黄多糖及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于食药用菌多糖
，具体涉及一种桑黄多糖及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]桑黄，又被称为桑耳、桑臣、胡孙眼等，是一种珍贵的药食两用菌，其营养丰富且具有抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性，而这些功效主要由桑黄所含有的活性成分在起作用。研究表明在桑黄子实体和菌丝体中发现多种生物活性物质包括多糖、黄酮类和有机酸等，多糖是其研究的主要活性成分。
[0003]先前的研究证明多糖具有良好的抗肿瘤与免疫调节效果。桑黄多糖主要来源于其子实体、菌丝体和发酵液。热水浸提法是从真菌中提取多糖最常用的方法，操作简单且成本低。
[0004]然而，桑黄多糖成分较为复杂，对其成分组成及功效仍有待进一步研究。

技术实现思路

[0005]本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。
[0006]作为本专利技术其中一个方面，本专利技术提供一种一种桑黄多糖的制备方法，其由以下步骤组成，
[0007](1)桑黄水溶性粗多糖的制备：将桑黄子实体粉碎后，脱脂，采用水提醇沉法提取粗多糖，得到桑黄水溶性粗多糖SSP；
[0008](2)将步骤(1)得到的桑黄水溶性粗多糖SSP加入水配制成粗多糖溶液，通过离子交换柱层析，用0.1mol/L NaCl溶液洗脱，收集洗脱液，透析，浓缩，冷冻干燥得到桑黄多糖SSP
‑
1；
[0009](3)将步骤(2)得到的桑黄多糖SSP
‑
1使用凝胶柱层析纯化，用去离子水洗脱，浓缩，冷冻干燥，得到桑黄多糖SSP
‑1‑
A。
[0010]作为本专利技术所述的桑黄多糖的制备方法的一种优选方案：步骤(1)中，所述脱脂，是将桑黄子实体粉碎后，按料液比1∶3～6g/mL加入到乙醇溶液中，混合均匀后浸泡12～24h，过滤，收集残渣，将残渣风干，去除乙醇，得到脱脂后的粉末。
[0011]作为本专利技术所述的桑黄多糖的制备方法的一种优选方案：步骤(1)中，所述采用水提醇沉法提取粗多糖，是将脱脂后的桑黄子实体粉末按照料液比1∶30～50g/mL加入水，加热提取1～3h，离心收集上清液，减压浓缩得到多糖浓缩液，向所述多糖浓缩液中加入乙醇溶液，静置12～24h，离心收集沉淀，将沉淀加水溶解后旋蒸除去乙醇，冷冻干燥，得到桑黄水溶性粗多糖SSP。
[0012]作为本专利技术所述的桑黄多糖的制备方法的一种优选方案：所述乙醇溶液的体积浓度为95％；所述离心收集上清液，是8000rpm离心15min。
[0013]作为本专利技术所述的桑黄多糖的制备方法的一种优选方案：步骤(2)中，所述粗多糖溶液浓度为10.0mg/mL；所述透析，截流分子量为10000Da，透析时间为48h；步骤(2)中，采用DEAE离子交换柱层析。
[0014]作为本专利技术所述的桑黄多糖的制备方法的一种优选方案：步骤(3)中，所述使用凝胶柱层析纯化，是将步骤(2)得到的桑黄多糖SSP
‑
1加入水配制成5.0mg/mL的粗多糖溶液，使用Sephacryl S
‑
300凝胶填料。
[0015]作为本专利技术所述的桑黄多糖的制备方法的一种优选方案：步骤(3)得到的桑黄多糖SSP
‑1‑
A，由葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、甘露糖、木糖、盐酸氨基葡萄糖组成，葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、甘露糖、木糖、盐酸氨基葡萄糖的摩尔比为0.360∶0.305∶0.130∶0.168∶0.034∶0.004，所述桑黄多糖重均分子量为2.700
×
104Da，数均分子量为2.356
×
104Da。
[0016]作为本专利技术的另一个方面，本专利技术提供一种桑黄多糖：所述桑黄多糖由葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、甘露糖、木糖、盐酸氨基葡萄糖组成，葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、甘露糖、木糖、盐酸氨基葡萄糖的摩尔比为0.360∶0.305∶0.130∶O.168∶0.034∶0.004，所述桑黄多糖重均分子量为2.700
×
104Da，数均分子量为2.356
×
104Da。
[0017]作为本专利技术的另一个方面，本专利技术提供所述的方法得到的桑黄多糖在制备精氨酸酶抑制剂中的应用。
[0018]作为本专利技术的另一个方面，本专利技术提供所述的方法得到的桑黄多糖在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0019]本专利技术的有益效果：本专利技术提供的制备方法获得的桑黄水溶性均一多糖组分SSP
‑1‑
A分子量小、分布宽度较窄，且对精氨酸酶活性具有良好的抑制效果，在天然药物精氨酸酶抑制剂和开发桑黄多糖新型药物方面提供了方向和参考依据，有良好的应用前景。
附图说明
[0020]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，其中：
[0021]图1为桑黄水溶性粗多糖SSP的离子交换柱洗脱曲线。
[0022]图2为SSP
‑
1的激光光散射图。
[0023]图3为桑黄水溶性多糖组分SSP
‑
1的Sephacryl S
‑
300HR凝胶洗脱曲线。
[0024]图4为桑黄水溶性均一多糖组分SSP
‑1‑
A的分子量及纯度分布图。
[0025]图5为SSP
‑1‑
A的紫外全扫描光谱图。
[0026]图6为为混合标准品的IC色谱图。
[0027]图7为SSP
‑1‑
A的IC色谱图。
[0028]图8为SSP
‑1‑
A的扫描电镜图。
[0029]图9为SSP
‑1‑
A的FT
‑
IR光谱图。
[0030]图10为桑黄水溶性均一多糖组分SSP
‑1‑
A浓度对精氨酸酶抑制活性的曲线关系图。
[0031]图11为桑黄水溶性均一多糖组分SSP
‑1‑
A对精氨酸酶的抑制作用曲线关系图。
[0032]图12为SSP
‑1‑
A抑制精氨酸酶的双倒数图。
[0033]图13为SSP
‑1‑
A对精氨酸酶抑制常数的测定。
具体实施方式
[0034]为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本专利技术的具体实施方式做详细的说明。
[0035]实施例1：
[0036]桑黄粗多糖SSP提取：
[0037](1)称取桑黄子实体200g(本实施例以Sanghuangporus vaninii，QJF
‑
3菌种为例)，粉碎，80目筛网过筛，用样品4倍体积的95％乙醇浸泡过夜，过滤收集残渣，自然风干，称取风干后的药渣粉末100g，按料液比1∶40g/mL加入去离子水置于沸水浴中提取2h，且期间间断性搅拌，8000rpm离心15m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种桑黄多糖的制备方法，其特征在于：由以下步骤组成，(1)桑黄水溶性粗多糖的制备：将桑黄子实体粉碎后，脱脂，采用水提醇沉法提取粗多糖，得到桑黄水溶性粗多糖SSP；(2)将步骤(1)得到的桑黄水溶性粗多糖SSP加入水配制成粗多糖溶液，通过离子交换柱层析，用0.1mol/L NaCl溶液洗脱，收集洗脱液，透析，浓缩，冷冻干燥得到桑黄多糖SSP
‑
1；(3)将步骤(2)得到的桑黄多糖SSP
‑
1使用凝胶柱层析纯化，用去离子水洗脱，浓缩，冷冻干燥，得到桑黄多糖SSP
‑1‑
A。2.根据权利要求1所述的桑黄多糖的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述脱脂，是将桑黄子实体粉碎后，按料液比1：3～6g/mL加入到乙醇溶液中，混合均匀后浸泡12～24h，过滤，收集残渣，将残渣风干，去除乙醇，得到脱脂后的粉末。3.根据权利要求1或2所述的桑黄多糖的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述采用水提醇沉法提取粗多糖，是将脱脂后的桑黄子实体粉末按照料液比1：30～50g/mL加入水，加热提取1～3h，离心收集上清液，减压浓缩得到多糖浓缩液，向所述多糖浓缩液中加入乙醇溶液，静置12～24h，离心收集沉淀，将沉淀加水溶解后旋蒸除去乙醇，冷冻干燥，得到桑黄水溶性粗多糖SSP。4.根据权利要求3所述的桑黄多糖的制备方法，其特征在于：所述乙醇溶液的体积浓度为95％；所述离心收集上清液，是8000rpm离心15min。5.根据权利要求1或2所述的桑黄多糖的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述粗多糖溶液浓度为1...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈晓华，张安强，李彦颖，林庚兰，
申请(专利权)人：浙江千济方医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：