一种葡萄牙棒孢酵母及其在白酒酿造中的应用制造技术

本发明专利技术涉及白酒酿造技术领域，具体公开了一种葡萄牙棒孢酵母及其在白酒酿造中的应用。所述的葡萄牙棒孢酵母，其保藏编号为GDMCC No：61758，命名为Clavispora lusitaniae YJ18。该葡萄牙棒孢酵母具有非常优异的产乳酸乙酯和乙酸乙酯能力，将其应用于米香型白酒酿造中，可以有效地提高米香型白酒中乳酸乙酯和乙酸乙酯的含量。乙酸乙酯的含量。乙酸乙酯的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种葡萄牙棒孢酵母及其在白酒酿造中的应用


[0001]本专利技术涉及白酒酿造
，具体涉及一种葡萄牙棒孢酵母及其在白酒酿造中的应用。

技术介绍

[0002]米香型白酒的生产方法可分为三种：固态发酵法、半固态发酵法和液态发酵法。半固态发酵法生产米香型白酒是以大米为原料，小曲作为糖化发酵剂，发酵前期酒醅为固态，主要进行糖化，有少量酒精产生；后期通过加水稀释酒醅为半固态状进行酒精发酵；最终经过蒸馏、陈酿和勾兑等工艺而制成。
[0003]白酒是由水、乙醇和其他呈香呈味的微量成分构成，其中水和乙醇占总量的98％～99％，而微量成分仅占1％～2％。白酒中微量成分的种类十分丰富，根据化学性质可以将其分成醇类、醛类、酸类、酯类、酮类、缩醛类化合物、芳香族化合物及吡嗪类等化合物。在白酒风味成分中，醇类物质是白酒醇甜的主要来源和助香剂，乙醛和乙缩醛等能够协调香气、修饰白酒风味，适量有机酸能够使白酒的香气和口感更加丰满，酯类物质是白酒香气的主体成分。
[0004]现有技术研究表明：与其他香型的白酒相比，米香型白酒的风味成分种类相对较少，其突出的主体香气成分包括乳酸乙酯、乙酸乙酯和β
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苯乙醇。因此，提高米香型白酒中酯类物质含量对于提高米香型白酒的香味具有重要的意义。
[0005]本专利技术在前期的专利技术专利CN 114181845 A中公开了一种酿酒酵母及其在白酒酿造中的应用。所述的酿酒酵母协同老八尺酒曲得到的米香型白酒其乳酸乙酯和乙酸乙酯在挥发性成分中的含量分别为17.44％和5.69％。但是，该专利公开的酿酒酵母必须协同老八尺酒曲才能制备得到乳酸乙酯和乙酸乙酯含量高的米香型白酒；然而，使用该酿酒酵母采用其它酒曲搭窝制备得到的米香型白酒，其中的乳酸乙酯和乙酸乙酯含量并不高；并且老八尺酒曲为梅州市平远县老八尺酒厂生产的酒曲，其在市场上的销量有限，因此也限制了其它酒厂的规模化的生产。
[0006]综上所述，提供一种不用协同特定酒曲的产酯酵母就可以制备得到乳酸乙酯和乙酸乙酯含量高的米香型白酒具有更加广阔的应用价值。

技术实现思路

[0007]为解决现有技术中存在的上述至少之一的技术问题，本专利技术首先提供了一种葡萄牙棒孢酵母。
[0008]所述的葡萄牙棒孢酵母，其保藏编号为GDMCC No：61758，命名为Clavispora lusitaniae YJ18。
[0009]该菌株于2021年6月30日保藏于广东省微生物菌种保藏中心；保藏地址为广东省广州市先烈中路100号。
[0010]本专利技术还提供上述葡萄牙棒孢酵母在白酒酿造中的应用。
[0011]优选地，所述的葡萄牙棒孢酵母在白酒酿造中提高白酒酯类物质含量的应用。
[0012]优选地，所述的白酒为米香型白酒。
[0013]优选地，所述的酯类物质为乳酸乙酯和乙酸乙酯。
[0014]本专利技术还提供了一种米香型白酒的酿造方法，该方法在米香型白酒的酿造过程中采用本专利技术所述的葡萄牙棒孢酵母。
[0015]优选地，在发酵中采用本专利技术所述的葡萄牙棒孢酵母。
[0016]有益效果：本专利技术提供了一种全新的葡萄牙棒孢酵母，该葡萄牙棒孢酵母具有非常优异的产乳酸乙酯和乙酸乙酯能力且其产乳酸乙酯和乙酸乙酯的能力要显著高于专利CN 114181845 A公开的酿酒酵母。
[0017]尤其在具体的米香型白酒的酿造过程中，该葡萄牙棒孢酵母不用协同特定的酒曲就可以制备得到乳酸乙酯和乙酸乙酯含量高的米香型白酒；并且采用该葡萄牙棒孢酵母制备得到的米香型白酒，比采用专利CN 114181845 A中公开的酿酒酵母制备得到的米香型白酒具有更高的乳酸乙酯和乙酸乙酯含量。
附图说明
[0018]图1为分离得到的8株不同菌落形态的酵母菌其扩增产物电泳图。
[0019]图2为分离得到的8株不同菌落形态的酵母菌的系统发育树。
具体实施方式
[0020]以下结合具体实施例对本专利技术做进一步详细的说明，但实施例对本专利技术不做任何形式的限定。
[0021]实施例1葡萄牙棒孢酵母的分离与鉴定
[0022](1)样品处理
[0023]分别称取鹰金钱酒曲以及烧麸曲样品5.00g，加入装有45mL无菌生理盐水的三角瓶中，200r/min振荡30min，充分混匀。取1mL样液，加入含9mL麦氏培养基的试管中，28℃、120r/min振荡培养24h。
[0024](2)酵母菌的分离纯化
[0025]吸取稀释倍数为10
‑4、10
‑5、10
‑6和10
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7 4个梯度的样品稀释液各100μL分别涂布于孟加拉红培养基平板，28℃培养48h。观察菌落形态，挑取表面湿润、光滑的典型酵母单菌落，在溴甲酚绿的PDA培养基平板上划线，28℃下倒置培养48h。挑取黄色圈较大的菌落进行平板划线纯化，选取长势较好的单菌落进行编号，并接种于YEPD培养基中，28℃、120r/min振荡培养24h。培养后用20％的甘油(菌液:20％甘油＝1:1)于
‑
80℃下保存备用。最终共分离出8株不同菌落形态的酵母菌株。
[0026](3)酵母菌的鉴定
[0027]3.1形态学鉴定：用美蓝染液对酵母进行染色、镜检。
[0028]3.2分子生物学鉴定：
[0029]鉴定方法：采用酵母基因组DNA提取试剂盒分别提取8株不同菌落形态的酵母菌DNA，接着采用通用引物扩增出26S rDNA序列并进行纯化及测序；然后在数据库中比对26S rDNA序列，对筛选菌株进行分子学鉴定。通用引物序列参照文献“彭俊,杨团元,刘蒲临,等.
白酒酿造酒醅与周边土壤中酵母菌多样性及东方伊萨酵母发酵特性比较[J].中国酿造,2019,38(08):77
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84)”，并由赛默飞世尔科技(中国)有限公司合成，使用浓度20μmol/L，
‑
20℃保存。PCR扩增反应体系见表1，PCR扩增程序条件见表2。采用DNA产物纯化试剂盒纯化所得PCR产物，并送至上海生工生物工程股份有限公司进行测序。将测序结果与National Center for Biotechnology Information数据库进行BLAST比对分析，采用MEGA X软件，构建系统发育树。
[0030]表1.PCR扩增反应体系
[0031][0032][0033]表2.PCR扩增程序条件
[0034][0035]鉴定结果：8株不同菌落形态的酵母菌，其PCR扩增产物电泳图如1所示。由图1可看出，所有菌株PCR扩增的条带较清晰，无拖尾现象，可用于测序。与Marker对比，PCR扩增所得DNA分子大小在500～750bp间。
[0036]将PCR产物进行测序，结果与National Center for Biotechnology Information数据库进行BLAST比对，得出菌株鉴定结果见表3。采用MEGAX软件，根据B本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种葡萄牙棒孢酵母，其保藏编号为GDMCC No：61758，命名为Clavispora lusitaniae YJ18。2.权利要求1所述的葡萄牙棒孢酵母在白酒酿造中的应用。3.权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的葡萄牙棒孢酵母在白酒酿造中提高白酒酯类物质含量中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的白酒为米香型白...

【专利技术属性】
技术研发人员：屈春云，李健俊，刘功良，彭立影，白卫东，肖更生，王宏，费永涛，
申请(专利权)人：仲恺农业工程学院，
类型：发明
国别省市：