杜仲籽粕中京尼平苷酸的提取纯化方法及其应用技术

本发明专利技术属于天然化合物提取纯化技术领域，尤其涉及一种杜仲籽粕中京尼平苷酸的提取纯化方法及其应用。该提取纯化方法具体包括：将杜仲籽粕以乙醇水溶液回流提取，然后用氢氧化钠水溶液水解，调节至酸性后再用酸化处理的大孔树脂柱进行富集、纯化，收集洗脱液，干燥，即得。该方法能够从杜仲籽粕提取获得高纯度的京尼平苷酸，且得率较高，可用于杜仲籽粕作为天然中药化合物原料的再利用，能够提升其药用价值，并减少资源浪费。并减少资源浪费。并减少资源浪费。

【技术实现步骤摘要】
杜仲籽粕中京尼平苷酸的提取纯化方法及其应用


[0001]本专利技术属于天然化合物提取纯化
，特别是涉及一种杜仲籽粕中京尼平苷酸的提取纯化方法及其应用。

技术介绍

[0002]杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)为杜仲科植物，是中国传统名贵中药材。杜仲以皮入药，含有多种天然活性成分，据报道杜仲具有抗高血压、降血脂、抗糖尿病、抗氧化、抗炎、神经保护、免疫调节等药理作用，临床应用于肝肾不足，腰膝酸痛，筋骨无力，头晕目眩，妊娠漏血，胎动不安等症。近年来发现，杜仲的种子也具有很高的药用价值。
[0003]杜仲籽在植物学范畴内称为翅果，富含油脂、蛋白质以及环烯醚萜苷等多种天然活性成分，然而目前脱脂后杜仲籽粕仅作为饲料添加剂加以利用，其潜在的药用价值远未被开发利用，造成了极大的资源浪费。

技术实现思路

[0004]针对以上技术问题，本专利技术提供一种杜仲籽粕中京尼平苷酸的提取纯化方法及其应用，该方法能够从杜仲籽粕提取获得高纯度的京尼平苷酸，且得率较高，可用于杜仲籽粕作为天然中药化合物原料的再利用，能够提升其药用价值，并减少资源浪费。
[0005]为达到上述专利技术目的，本专利技术采用了如下的技术方案：
[0006]本专利技术第一方面提供一种杜仲籽粕中京尼平苷酸的提取纯化方法，具体包括以下操作：
[0007]将杜仲籽粕以40％～70％v/v乙醇水溶液回流提取1～3次，每次0.5～1.5h，将所得提取液合并后浓缩，加入氢氧化钠水溶液于90～95℃水解5～60min，得到水解液，所述氢氧化钠水溶液中氢氧化钠的质量为所述杜仲籽粕的质量的1％～10％；
[0008]调节所述水解液的pH至小于2，以含0～5％v/v乙醇的0.45～0.55％v/v甲酸水溶液为洗脱溶剂、用酸化处理的大孔树脂柱进行富集、纯化，收集洗脱液，干燥，即得。
[0009]本专利技术提供的上述提取纯化方法首先通过乙醇水溶液回流提取获得环烯醚萜苷类成分(包括京尼平苷酸、Scyphiphin D、杜仲苷A、杜仲苷C、杜仲苷B、杜仲苷D)，通过特定的参数来确保获得较高的提取率；再对所得提取液进行水解，使Scyphiphin D、杜仲苷A、杜仲苷C、杜仲苷B、杜仲苷D转化为京尼平苷酸，并通过水解温度、时间、氢氧化钠用量来确保京尼平苷酸转化率；然后通过以大孔树脂柱来富集、纯化，以获得高收率、高纯度的京尼平苷酸。
[0010]结合第一方面，所述杜仲籽粕为将杜仲籽脱脂处理后的产物。
[0011]优选地，所述杜仲籽粕的制备方法包括：将杜仲籽置于石油醚中回流2～3 次，每次1～1.5h，将处理后的杜仲籽取出晾干，即得所述杜仲籽粕。
[0012]可选地，将杜仲籽置于石油醚中回流2次，每次1.5h。
[0013]结合第一方面，所述乙醇水溶液的体积百分浓度优选为40％～55％。选用该浓度
的乙醇能够使所得提取液中京尼平苷酸、Scyphiphin D、杜仲苷A、杜仲苷 C、杜仲苷B、杜仲苷D均获得较高的提取率。
[0014]所述乙醇水溶液进一步优选的体积百分浓度为40％。
[0015]结合第一方面，以所述乙醇水溶液回流提取的次数优选2次，每次1h。该条件下既能够提高环烯醚萜苷类成分的提取率，又能节省提取时间和溶剂。
[0016]结合第一方面，所述氢氧化钠水溶液中氢氧化钠的质量为所述杜仲籽粕的质量的10％。
[0017]结合第一方面，优选采用盐酸调节所述水解液的pH。
[0018]结合第一方面，大孔树脂可选D101大孔树脂。
[0019]优选地，对所述大孔树脂柱进行酸化处理的方法为：将湿法装柱的大孔树脂以90％～95％v/v乙醇水溶液洗脱至流出液无色，再以水洗脱至洗脱液无醇味，然后以至少2倍柱体积的0.5％v/v甲酸水溶液洗脱，即得酸化处理的大孔树脂柱。
[0020]结合第一方面，所述甲酸水溶液的浓度为0.5％v/v。
[0021]优选地，可先以0.5％v/v甲酸水溶液洗脱2倍柱体积后再用含5％v/v乙醇的0.5％v/v甲酸水溶液洗脱4～5倍柱体积，以去除京尼平苷酸样品中的糖、色素以及其他杂质，提高京尼平苷酸样品中中京尼平苷酸的纯度，但该方法会稍稍降低京尼平苷酸的得率；若希望获得更高的得率，可直接用含5％v/v乙醇的 0.5％v/v甲酸水溶液洗脱4～5倍柱体积，以提高京尼平苷酸得率。
[0022]结合第一方面，所述提取方法还包括将所述洗脱液干燥后的产物以甲醇或乙醇纯化。纯化方法可采用以甲醇或乙醇复溶后静置、过滤，将所得滤液蒸干后再次复溶，过滤，将所得滤液除去溶剂，干燥，即得。
[0023]第二方面，本专利技术提供上述杜仲籽粕中京尼平苷酸的提取纯化方法在生产京尼平苷酸中的应用。
[0024]本专利技术提供的上述提取纯化方法具有能够获得较高产率和纯度的京尼平苷酸，且工艺条件简单，易于规模化地从杜仲籽粕中提取京尼平苷酸，一方面为杜仲籽粕的再利用提供了新途径，提高了其药用价值，另一方面，为京尼平苷酸的生产提供了新方法。
附图说明
[0025]图1为检验例1中不同水解条件下的供试品溶液的检测结果；
[0026]图2为检验例1中不同洗脱溶剂所得洗脱液的液相色谱图；
[0027]图3为检验例1中测得的实施例1所得京尼平苷酸粉末的色谱图。
具体实施方式
[0028]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例和附图，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本领域普通技术人员基于本专利技术所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0029]杜仲籽粕为脱脂后的杜仲籽，目前仅作为饲料添加剂加以利用，其潜在的药用价值远未被开发利用，造成了极大的资源浪费。
[0030]经研究发现，杜仲籽粕中含有环烯醚萜苷类成分，如京尼平苷酸、ScyphiphinD、杜仲苷A、杜仲苷C、杜仲苷B、杜仲苷D。其中京尼平苷酸具有抗健忘、防癌抗癌、抗氧化、抗衰老、降压、抗应激等多种药理活性，若能从杜仲籽粕中提取出京尼平苷酸，则能提升杜仲籽粕的药用价值，并为京尼平苷酸的生产提供新方向。
[0031]现有技术中有从杜仲籽中提取京尼平苷酸的技术，但杜仲籽在脱脂处理过程中其细胞状态会发生变化，故从杜仲籽中提取京尼平苷酸的现有技术并不适宜直接用于杜仲籽粕。并且这些现有技术中京尼平苷酸得率较低，甚至收益不足以抵消提取过程消耗的多方面成本，即使能够用于杜仲籽粕，也难以有助于提升杜仲籽粕的药用价值，达不到预期目的。
[0032]针对以上问题，本专利技术实施例第一方面提供一种杜仲籽粕中京尼平苷酸的提取纯化方法，具体包括以下操作：
[0033]将杜仲籽粕以40％～70％v/v乙醇水溶液回流提取1～3次，每次0.5～1.5h，将所得提取液合并后浓缩，加入氢氧化钠水溶液于90～95℃水解5～60min，得到水解液，所述氢氧化钠水溶液中氢氧化钠的质量为所述杜本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种杜仲籽粕中京尼平苷酸的提取纯化方法，其特征在于，具体包括以下操作：将杜仲籽粕以40％～70％v/v乙醇水溶液回流提取1～3次，每次0.5～1.5h，将所得提取液合并后浓缩，加入氢氧化钠水溶液于90～95℃水解5～60min，得到水解液，所述氢氧化钠水溶液中氢氧化钠的质量为所述杜仲籽粕的质量的1％～10％；调节所述水解液的pH至小于2，以含0～5％v/v乙醇的0.45％～0.55v/v甲酸水溶液为洗脱溶剂、用酸化处理的大孔树脂柱进行富集、纯化，收集洗脱液，干燥，即得。2.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，所述杜仲籽粕的制备方法包括：将杜仲籽置于石油醚中回流2～3次，每次1～1.5h，将处理后的杜仲籽取出晾干，即得所述杜仲籽粕。3.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，所述乙醇水溶液的体积百分浓度为40％～55％。4.根据权利要求3所述的提取纯化方法，其特征在于，以所述乙醇水溶液回流提取2次，每次1h。5.根据权利要求1所述的提...

【专利技术属性】
技术研发人员：王跃飞，柴欣，赵禾苗，黄山，于卉娟，崔英，马露露，
申请(专利权)人：现代中医药海河实验室，
类型：发明
国别省市：