一种鲜诃子中鞣质部位的提取方法及鞣质化合物的提取纯化方法以及检测方法技术

本发明专利技术关于中药提取与检测技术领域，尤其涉及一种鲜诃子中鞣质部位的提取方法及鞣质化合物的提取纯化方法以及检测方法。本发明专利技术提供的鲜诃子中鞣质部位的提取方法以诃子鲜果为原料，依次进行去核、加水榨汁和超声提取，既能够避免鞣酸降解，又能够获得理想的提取率，并且工艺简单、能耗低、耗时短。本发明专利技术还提供了鞣质化合物的提取纯化方法，通过大孔吸附树脂洗脱、醇沉、十八烷基键合硅胶反相填料柱洗脱以及制备色谱分离，能够获得高纯度的诃子次酸、没食子酸、4

【技术实现步骤摘要】
一种鲜诃子中鞣质部位的提取方法及鞣质化合物的提取纯化方法以及检测方法


[0001]本专利技术关于中药提取与检测
，尤其涉及一种鲜诃子中鞣质部位的提取方法及鞣质化合物的提取纯化方法以及检测方法。

技术介绍

[0002]诃子为使君子科植物诃子或绒毛诃子的干燥成熟果实，具有涩肠止泻，敛肺止咳，降火利咽的作用。诃子含有多酚类，黄酮类、多糖类、萜类等多种化学成分，其中含量最多的是鞣质类，以可水解鞣质为主。鞣质具有较强的抗氧化能力，多以没食子酸、安石榴苷、柯里拉京、鞣花酸为指标性成分。目前常用的诃子鞣质提取方法大多使用诃子干果粉末提取，而鲜果干燥成干果的过程中有鞣酸降解，且耗能，耗时，操作繁琐，提取率低。

技术实现思路

[0003]针对以上技术问题，本专利技术提供一种鲜诃子中鞣质部位的提取方法及鞣质化合物的提取纯化方法以及检测方法。该鞣质部位的提取方法直接提取鲜诃子中鞣质部位，能减少鞣酸降解，耗能低，工艺简单，提取率高；该鞣质化合物的提取纯化方法能够获得高纯度的化合物；该检测方法能够从上述鞣质部位中检测到十余种鞣质成分。
[0004]为达到上述专利技术目的，本专利技术实施例采用了如下的技术方案：
[0005]第一方面，本专利技术提供了一种鲜诃子中鞣质部位的提取方法，具体包括以下操作：
[0006]将诃子鲜果去核，加水榨汁，得鲜诃子匀浆；
[0007]用乙醇水溶液对所述鲜诃子匀浆超声提取，固液分离，将所得液相浓缩、干燥，即得。
[0008]现有技术中从诃子中提取鞣质类成分的方法均为从诃子干燥成熟果实中提取，未见以鲜诃子中提取鞣质类成分的报道。为了从鲜诃子中提取得到鞣质部位并同时获得理想的提取效率，本专利技术对提取工艺进行了研究，通过先制备鲜诃子匀浆、再用乙醇水溶液提取的方法，既能够避免将鲜果制成干果所带来的鞣酸降解，又能够获得理想的提取率，且工艺简单、能耗低、耗时短，为诃子中鞣质类成分的提取提供了新的方法。
[0009]结合第一方面，所述乙醇水溶液的浓度为60％～100％v/v。乙醇浓度过低时，提取液不易抽滤，当乙醇浓度达到60％v/v后，既能尽量避免该问题，还可以沉淀糖类，减少固含物，降低提取物的引湿性。
[0010]优选地，超声提取的温度为25～60℃，功率为500～700W。
[0011]优选地，用乙醇水溶液对所述鲜诃子匀浆超声提取的次数≥2次。提取次数对于提取率的影响较小，两次提取后没食子酸、安石榴苷、柯里拉京、鞣花酸的累计提取率均>78％。
[0012]第二方面，本专利技术还提供一种鞣质化合物的提取纯化方法，所述化合物为诃子次酸，该提取方法具体包括以下步骤：
[0013]S1、按上述提取方法提取鲜诃子中鞣质部位；
[0014]S2、将所述鞣质部位以水溶解后固液分离，以大孔吸附树脂为固定相，以水为洗脱溶剂，将固液分离所得液相进行柱层析，收集前4～5倍柱体积的洗脱液；
[0015]S3、将S2中收集的洗脱液合并，浓缩后加入乙醇，静置沉淀，之后固液分离；
[0016]S4、将S3中固液分离所得固相以水溶解后，以十八烷基键合硅胶反相填料(ODS)为固定相，以水为洗脱溶剂进行柱层析，收集前1～2倍柱体积的洗脱液，浓缩后用制备色谱分离纯化；
[0017]所述制备色谱的色谱条件包括：流动相：流动相A为0.095％～0.105％v/v甲酸水溶液，流动相B为甲醇，按流动相A:流动相B为90:10的体积比等度洗脱。
[0018]该方法中，S2以大孔吸附树脂收集的洗脱液中含有较高的目标化合物含量；S3经醇沉后，沉淀中能够分离得到诃子次酸；S4经在上述色谱条件下的制备色谱分离纯化后，即可得到高纯度的诃子次酸。
[0019]优选地，所述制备色谱的色谱条件还包括：色谱柱为Cosmosil 5C18
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MS
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II(20
×
250mm，5μm)；流速为8ml/min；检测波长为284nm。
[0020]结合第二方面，S2中优选收集5倍柱体积的洗脱液。在该洗脱体积下，诃子次酸累积洗脱量较高，且杂质洗脱量较低。
[0021]结合第二方面，S3中加入乙醇至乙醇含量为85.7％～90.0％v/v。在该乙醇含量下能够获得更多的沉淀，从而有助于获得更多的目标化合物。
[0022]结合第二方面，S4中优选收集2倍柱体积的洗脱液。在该洗脱体积下，诃子次酸累积洗脱量较高。
[0023]第三方面，本专利技术还提供一种鞣质化合物的提取纯化方法，所述化合物包括没食子酸、4
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没食子酰莽草酸和5
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没食子酰莽草酸，该方法具体包括以下步骤：
[0024]S1、按上述提取方法提取鲜诃子中鞣质部位；
[0025]S2、将所述鞣质部位以水溶解后固液分离，以大孔吸附树脂为固定相，以水为洗脱溶剂，将固液分离所得液相进行柱层析，收集前4～5倍柱体积的洗脱液；
[0026]S3、将S2中收集的洗脱液合并，浓缩后加入乙醇，静置沉淀，之后固液分离；
[0027]S4、将S3中固液分离所得液相浓缩后，用制备色谱分离纯化；
[0028]所述制备色谱的色谱条件包括：
[0029]流动相：流动相A为0.095％～0.105％v/v甲酸水溶液，流动相B为甲醇，按流动相A:流动相B为(60～65):(40～35)的体积比等度洗脱。
[0030]该方法中，S2以大孔吸附树脂收集的洗脱液中含有较高的目标化合物含量；S3经醇沉后，上清液中能够分离得到没食子酸、4
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没食子酰莽草酸和5
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没食子酰莽草酸；S4经在上述色谱条件下的制备色谱分离纯化后，即可得到高纯度的没食子酸、4
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没食子酰莽草酸和5
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没食子酰莽草酸。
[0031]优选地，所述制备色谱的色谱条件还包括：色谱柱为Cosmosil PBr Packed Column(20
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250mm，5μm)；流速为8ml/min；检测波长为270nm。
[0032]结合第三方面，S2中优选收集5倍柱体积的洗脱液。在该洗脱体积下，没食子酸、4
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没食子酰莽草酸和5
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没食子酰莽草酸的累积洗脱量较高。
[0033]结合第三方面，S3中加入乙醇至乙醇含量为85.7％～90.0％v/v。在该乙醇含量下
能够除去更多的诃子次酸沉淀，从而有助于上清液中干扰物更少。其中优选向浓缩后的洗脱液中加入8倍量乙醇，即乙醇含量约88.9％v/v。
[0034]结合第三方面，S4中流动相A:流动相B为65:35。在该比例下，没食子酸的纯度更高。
[0035]结合第三方面，S4中用制备色谱分离纯化两次。可选地，第一次分离提纯时，流动相A:流动相B为60:40；第二次分离纯化时，流动相A:流动相B为65:35；或两次均为65:35，以获得更高的产物纯度本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鲜诃子中鞣质部位的提取方法，其特征在于，具体包括以下操作：将诃子鲜果去核，加水榨汁，得鲜诃子匀浆；用乙醇水溶液对所述鲜诃子匀浆超声提取，固液分离，将所得液相浓缩、干燥，即得。2.根据权利要求1所述的鲜诃子中鞣质部位的提取方法，其特征在于，所述乙醇水溶液的浓度为60％～100％v/v；和/或超声提取的温度为25～60℃，功率为500～700W；和/或用乙醇水溶液对所述鲜诃子匀浆超声提取的次数≥2次。3.一种鞣质化合物的提取纯化方法，其特征在于，所述化合物为诃子次酸，所述提取方法具体包括以下步骤：S1、按权利要求1或2所述的提取方法提取鲜诃子中鞣质部位；S2、将所述鞣质部位以水溶解后固液分离，以大孔吸附树脂为固定相，以水为洗脱溶剂，将固液分离所得液相进行柱层析，收集前4～5倍柱体积的洗脱液；S3、将S2中收集的洗脱液合并，浓缩后加入乙醇，静置沉淀，之后固液分离；S4、将S3中固液分离所得固相以水溶解后，以十八烷基键合硅胶反相填料为固定相，以水为洗脱溶剂进行柱层析，收集前1～2倍柱体积的洗脱液，浓缩后用制备色谱分离纯化；所述制备色谱的色谱条件包括：流动相：流动相A为0.095％～0.105％v/v甲酸水溶液，流动相B为甲醇，按流动相A:流动相B为90:10的体积比等度洗脱。4.根据权利要求3所述的鞣质化合物的提取纯化方法，其特征在于，所述制备色谱的色谱条件还包括：色谱柱为Cosmosil 5C18
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MS
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II，规格为20
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250mm，5μm；和/或流速为8ml/min；和/或检测波长为284nm。5.根据权利要求3或4所述的鞣质化合物的提取纯化方法，其特征在于，S2中收集5倍柱体积的洗脱液；和/或S3中加入乙醇至乙醇含量为85.7％～90.0％v/v；和/或S4中收集前2倍柱体积的洗脱液。6.一种鞣质化合物的提取方法，其特征在于，所述化...

【专利技术属性】
技术研发人员：王跃飞，吴红华，徐健，张敏，柴欣，于卉娟，贾晓蕊，王来磊，
申请(专利权)人：现代中医药海河实验室，
类型：发明
国别省市：