目标蛋白质的制造方法技术

技术编号:36595245 阅读:34 留言:0更新日期:2023-02-04 18:05
本发明专利技术提供一种不对宿主细胞进行特别的基因操作、不使用耐药基因等、在稳定维持载体的同时制造目标蛋白质的方法。一种制造方法,其为包括对用载体转化后的细胞进行培养的步骤的目标蛋白质的制造方法,其特征在于,上述载体包含目标蛋白质的基因,不包含抗生素抗性基因、重组酶的识别序列和细胞生存所必需的基因。因。因。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】目标蛋白质的制造方法


[0001]本专利技术涉及目标蛋白质的制造方法。

技术介绍

[0002]为了提高食品的保存性、味道、口感等,使用了各种各样的酶。酶是原本存在于微生物、植物等天然生物体内或细胞外的蛋白质。酶通过微生物培养、细胞培养、植物栽培等进行工业生产、纯化并使用。另外,为了提高酶的生产率,有时通过基因重组使它们大量表达。
[0003]在自然界中,已知除了染色体DNA以外还具有质粒DNA的生物。将质粒DNA改良为用于人为表达目标蛋白质的载体而对宿主细胞赋予新功能的技术是普遍公知的。基于该基因重组的蛋白质表达通过将包含该蛋白质的基因的载体导入宿主细胞中,并对宿主细胞进行培养来进行。此处,对于宿主细胞来说,载体不过是不需要的外来因子,因此具有在持续培养的期间载体容易脱落的问题。为了避免该问题,开发出了在宿主细胞内稳定地维持载体的各种方法。
[0004]最广泛地用于稳定维持载体的方法是向载体中加入蛋白质的基因并导入抗生素抗性基因,在抗生素的存在下对宿主细胞进行培养的方法。由于宿主细胞没有抗生素抗性基因就不能存活,因此包含抗生素抗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种制造方法,其为包括对用载体转化后的细胞进行培养的步骤的目标蛋白质的制造方法,其特征在于,所述载体包含目标蛋白质的基因,不包含抗生素抗性基因、重组酶的识别序列和细胞生存所必需的基因。2.如权利要求1所述的制造方法,其中,细胞生存所必需的基因为编码核糖体再循环因子的基因或编码翻译起始因子的基因。3.如权利要求1或2所述的制造方法,其中,细胞为细菌。4.如权利要求3所述的制造方法,其中,细菌为放线菌。5.如权利要求1~4中任一项所述的制造方法,其中,目标蛋白质为酶。6.如权利要求5所述的制造方法,其中,酶为磷脂酶、葡聚糖酶、蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员:原园幸一
申请(专利权)人:长濑化成株式会社
类型:发明
国别省市:

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