单细胞测序制造技术

本公开提供了通过同时将细胞分离成单分散液滴并用每个液滴特有的条形码标记来自这些细胞的每个核酸分子来分析单细胞的方法和系统。这些方法和系统将模板颗粒与多个单细胞在管中组合，在该管中产生包封这些模板颗粒中的单个模板颗粒和这些单细胞中的单个单细胞的单分散液滴，从这些单细胞中释放核酸分子并向每个核酸分子提供相应液滴特有的条形码。然后可以通过任何已知的方法，例如通过对这些核酸分子进行测序来分析这些核酸分子。酸分子进行测序来分析这些核酸分子。酸分子进行测序来分析这些核酸分子。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】单细胞测序


[0001]本专利技术涉及用于单细胞分析的方法和系统。

技术介绍

[0002]治疗癌症的主要挑战是在癌症治疗最有效的早期阶段从健康细胞中检测癌细胞的难度和成本。在更常见的细胞材料的背景下鉴定小比例存在的细胞和细胞成分是诊断中的重要问题。已经针对这个问题提出了许多解决方案。例如，单细胞测序已经被提议作为鉴定样品中小比例存在的癌细胞的方法。用于分离单细胞的传统方法采用流式细胞术和液滴微流体来一次一个地分离单细胞。然而，这些方法需要昂贵且难以使用的复杂设备。此外，因为每个细胞必须单独处理，所以此类方法的速率有限并且需要很长一段时间(通常几天)才能将癌细胞与周围细胞分离。这种限制在早期癌症检测中尤其成问题，因为样品中癌细胞的比例最小。另外，因为此类方法难以使用，尤其是对于临床医生来说，所以必须将样品送到能够处理此类设备的设施，这进一步增加了进行癌症诊断所需的时间和费用。这导致大多数癌症患者无法负担和无法进行早期癌症检测。

技术实现思路

[0003]本专利技术提供了用于单细胞分析的方法和系统，这些方法和系统大大降低了单细胞测序本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于单细胞测序的方法，所述方法包括：将模板颗粒与多个单细胞在管中组合；在所述管中同时产生多个单分散液滴，所述多个单分散液滴包封所述模板颗粒中的单个模板颗粒和所述单细胞中的单个单细胞；从所述单细胞中释放核酸分子并向液滴内的每个核酸分子提供所述液滴特有的条形码；以及对所述核酸分子进行测序。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述核酸分子是DNA分子。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述液滴特有的所述条形码由所述液滴包封的所述模板颗粒提供给所述液滴。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述模板颗粒进一步包括一个或多个隔室。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述一个或多个隔室含有：(1)选自包括以下的组的试剂：裂解试剂、核酸合成试剂或其组合；(2)所述液滴特有的所述条形码；和/或(3)唯一分子标识符(UMI)。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述核酸合成试剂包括聚合酶或逆转录酶。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述试剂、条形码或UMI响应于外部刺激而从所述一个或多个隔室中释放。8.根据权利要求3所述的方法，其中所述模板颗粒包括多个捕获探针，所述多个捕获探针包括以下中的一种或多种：引物序列；所述液滴特有的条形码；唯一分子标识符(UMI)；以及捕获序列。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述捕获序列是基因特异性核苷酸序列。10.根据权利要求8所述的方法，其中所述核酸分子在从所述单细胞中释放之后通过与所述捕获序列杂交而附着到所述模板颗粒。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述核酸分子通过第一和/或第二链合成用所述液滴特有的所述条形码和/或UMI标记。12.根据权利要求1到11中任一项所述的方法，其中组合模板颗粒、产生液滴包括，以及从细胞中释放核酸分子包括：将所述模板颗粒与所述单细胞在第一流体中组合；将第二流体添加到所述第一流体；剪切所述流体以同时产生多个单分散液滴，所述多个单分散...

【专利技术属性】
技术研发人员：K，
申请(专利权)人：福路伦特生物科学公司，
类型：发明
国别省市：