一种低宿主DNA含量TaqDNA聚合酶的制备试剂和方法技术

本发明专利技术公开了一种低宿主DNA含量Taq DNA聚合酶的制备试剂和方法，属于酶工程领域。本发明专利技术的试剂包含裂解结合缓冲液、洗脱缓冲液和宿主DNA去除液，裂解结合缓冲液含Tris

【技术实现步骤摘要】
一种低宿主DNA含量Taq DNA聚合酶的制备试剂和方法


[0001]本专利技术属于酶工程领域，具体涉及一种低宿主DNA含量Taq DNA聚合酶的制备试剂和方法。

技术介绍

[0002]DNA聚合酶是以亲代DNA为模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一类酶，是分子诊断中常用原料，广泛应于PCR反应中(polymerase chain reaction)。Taq DNA聚合酶是第一个被发现的热稳定DNA聚合酶，是从温泉中分离的一株水生噬热杆菌(Thermus aquaticus)中提取获得，因为其热稳定性好，在PCR过程中可以保持较好的活性，从而保证了PCR反应的高效和连续性。此外陆续发现了各种可用于PCR扩增的DNA聚合酶，但Taq酶目前仍是应用最广的DNA聚合酶之一。目前各厂商生产Taq DNA聚合酶多是将其基因构建在重组载体上，然后将重新载体导入常见的工程菌如大肠杆菌中，发酵诱导其过表达，然后再通过各种纯化技术进行提纯。纯化过程虽然去除了大部分的杂质，但是仍有少量的宿主大肠杆菌DNA残留在Taq酶中。当Taq酶的后续应用是检测临床本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低宿主DNA含量的Taq DNA聚合酶的制备试剂，其特征在于：包含裂解结合缓冲液、洗脱缓冲液和宿主DNA去除液；所述的裂解结合缓冲液的组成为：5
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15mM Tris
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HCl、pH 7.6，100
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300mM氯化钠，30
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50mM咪唑；所述的洗脱缓冲液的组成为：5
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15mM Tris
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HCl、pH7.6，100
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300mM氯化钠，300
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500mM咪唑；所述的宿主DNA去除液的组成为：5
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15mM Tris
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HCl、pH 7.6，100
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300mM氯化钠，0.01
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0.05U/μL热敏感dsDNase。2.根据权利要求1所述的低宿主DNA含量的Taq DNA聚合酶的制备试剂，其特征在于：所述的裂解结合缓冲液的组成为：10mM Tris
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HCl、pH 7.6，100mM氯化钠，50mM咪唑。3.根据权利要求1所述的低宿主DNA含量的Taq DNA聚合酶的制备试剂，其特征在于：所述的洗脱缓冲液的组成为：10mM T...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡梦竹，
申请(专利权)人：武汉臻熙医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：