一种低密度醛基基片以及低密度生物芯片的制备方法技术

本申请涉及一种低密度醛基基片以及低密度生物芯片的制备方法，一种低密度醛基基片，包括：醛基修饰基片，和多孔膜板，所述多孔膜板由疏水材料制成且带有通孔阵列，所述多孔膜板附接于所述醛基修饰基片的醛基修饰表面。本申请的低密度醛基基片通过醛基基片上附接疏水材料制成的多孔膜板，在利用该低密度醛基基片制备生物芯片时可以利用疏水性将点样液聚集在疏水通孔内，完成芯片制备，方法简便易行；并且可以用移液枪进行芯片制备，适用性广泛。适用性广泛。适用性广泛。

【技术实现步骤摘要】
一种低密度醛基基片以及低密度生物芯片的制备方法


[0001]本申请涉及生物芯片领域，尤其是涉及一种低密度醛基基片以及低密度生物芯片的制备方法。

技术介绍

[0002]生物芯片目前广泛应用于生物检测领域。目前生物芯片，特别是高密度生物芯片受到制造成本、样品处理时间、高分辨率检测仪器的多方面制约，伴随着测序技术的高速发展与测序成本的降低，高密度生物芯片的市场受到了极大的挤压。但低密度芯片具有制造成本低、样本处理速度快、检测成本低的优势，在POCT领域取得良好发展势头。
[0003]低密度生物芯片上探针数目较少，通过适当加大点样量与提高探针位点间的间隔，可以实现低成本的POCT检测。制造适宜于低密度生物芯片生产的专用基片，不仅可以提升低密度芯片质量，还可以进一步降低基片价格。本领域需要这种针对低密度生物芯片的基片。

技术实现思路

[0004]本专利技术针对当下市场缺少低密度芯片专用基片的不足，提出一种低密度醛基基片，以及制备低密度生物芯片的方法，能根据目标探针点位信息进行特定位置上的醛基修饰，只在与探针反应的位置上有修饰后的醛基并与带有氨基的探针结合；位点以外是疏水环境，不与探针结合从而降低成像检测背景，还有通过疏水作用趋动探针向醛基修饰位点聚集，提高探针与醛基位点的结合，同时也使用芯片的制作不依赖专业的点样仪也可以完成。
[0005]本申请提供一种低密度醛基基片，包括：醛基修饰基片，和多孔膜板，所述多孔膜板由疏水材料制成且带有通孔阵列，所述多孔膜板附接于所述醛基修饰基片的醛基修饰表面。r/>[0006]本申请还提供一种低密度生物芯片的制备方法，包括：S1. 提供具有醛基修饰基片；S2. 将由疏水材料制成的带有通孔阵列的多孔膜板粘附到所述醛基修饰基片的醛基修饰表面上，得到所述低密度醛基基片；S3. 将带有氨基的探针施加到所述通孔中，使所述探针固定在所述基片上，得到所述低密度生物芯片。
[0007]本申请的低密度醛基基片通过醛基基片上附接疏水材料制成的多孔膜板，在利用该低密度醛基基片制备生物芯片时可以利用疏水性将点样液聚集在疏水通孔内，完成芯片制备，方法简便易行；并且可以用移液枪进行芯片制备，适用性广泛。
附图说明
[0008]图1示出低密度醛基基片示意图，1为多孔膜板，2为多孔膜板的通孔，3为醛基修饰基片；图2示出实施例1的检测结果。
具体实施方式
[0009]下面通过实施例对本申请进一步详细说明。通过这些说明，本申请的特点和优点将变得更为清楚明确。
[0010]在这里专用的词“示例性”意为“用作例子、实施例或说明性”。这里作为“示例性”所说明的任何实施例不必解释为优于或好于其它实施例。
[0011]此外，下面所描述的本申请不同实施方式中涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互结合。
[0012]如图1所示，本申请提供一种低密度醛基基片，包括：醛基修饰基片3，和多孔膜板1，所述多孔膜板由疏水材料制成且带有通孔阵列，所述多孔膜板附接于所述醛基修饰基片的醛基修饰表面。
[0013]在本公开中，相对于每平方厘米上有过万探针的高密度芯片，“低密度”是指每平方厘米上的探针数少于4000，尤其是探针数目在1000以内。
[0014]在本公开中，低密度醛基基片包括醛基修饰基片3。该醛基修饰基片3可以为玻璃基片例如低荧光玻璃基片，其一个表面经醛基修饰处理，形成醛基修饰表面。
[0015]提供醛基修饰基片包括：S11. 使基片表面活化；S12. 对表面活化的基片进行氨基修饰；S13. 对经氨基修饰的基片进行醛基修饰，得到所述醛基修饰基片。
[0016]可以对基片例如低荧光白玻璃片进行表面清洗，去除油渍与灰尘，并进行表面活化（例如可以用浓硫酸与双氧水（95：5体积比）进行处理），水洗后进行表面氨基修饰。
[0017]可以将基片置于氨基修饰溶液中进行表面氨基修饰。在一种实施方式中，进行氨基修饰包括：用氨基修饰剂的溶液处理0.5
‑
2小时。
[0018]所述氨基修饰剂为具有下式I的化合物：其中，R1、R2、R3各自独立地选自C1‑
C6烷基或C1‑
C6烷氧基，其中R1、R2、R3至少之一为C1‑
C6烷氧基；R4选自C1‑
C6亚烷基。
[0019]优选地，氨基修饰剂可以为3
‑
氨丙基三乙氧基硅烷等。可以使用氨基修饰剂的溶
液处理0.5
‑
2小时，辅助轻微振荡。例如，可以1mol/L的3
‑
氨丙基三乙氧基硅烷的丙酮溶液，室温下作用0.5
‑
2小时。
[0020]对氨基修饰基片进行二醛化合物修饰，得到醛基修饰基片。可以将基片置于二醛化合物溶液中，进行醛基修饰，得到醛基修饰基片。进行醛基修饰的条件为：将二醛化合物溶液加入到基片上之后，室温下作用0.5
‑
2小时。常用的二醛化合物可以选自对苯二甲醛、戊二醛等，例如可以使用1mol/L的二醛化合物丙酮溶液作为醛基修饰剂溶液。
[0021]氨基修饰基片置于二醛化合物中时，可以使其一个醛基与氨基进行脱水形成希夫碱，而另一个醛基显露在基片表面，可以与带有氨基的探针分子结合。
[0022]本公开的低密度醛基基片包括多孔膜板1，所述多孔膜板1由疏水材料制成且带有通孔2的通孔阵列，所述多孔膜板1附接于所述醛基修饰基片3的醛基修饰表面。
[0023]在本申请中，多孔膜板1由疏水材料制成。使用疏水材料制成的多孔膜板1对于本申请来说是关键的。在由该低密度醛基基片来制备生物芯片时，将探针溶液滴加到通孔上，由于该多孔膜板的疏水材料的疏水性，液滴自动聚集到通孔中，液滴中的探针的氨基与基片上的醛基形成希夫碱，从而将探针固定在基片上，完成生物芯片的制备。而且，疏水材料及其上的通孔为每个探针可结合的亲水位点提供一个疏水围栏，防止点样液向外周的流动，防止点样液边缘蒸发造成的探针位点边缘变形，提高生物芯片质量。每个探针可结合的亲水位点周围都是疏水环境，利用疏水环境在生物芯片制造过程中克服表面全部活化造成的探针点移位和探针外噪声点形成，提高生物芯片的成品率与质量。在一种实施方式中，具有疏水性质的材料例如金属，蜡膜，油纸、陶瓷、树脂等都可以用来制造该多孔膜板。
[0024]本公开的低密度醛基基片的点阵密度取决于多孔膜板1中通孔阵列中通孔密度。在一种实施方式中，通孔阵列包括多个呈阵列分布的通孔2，所述多孔膜板的通孔2孔径为100
‑
300μm，两个通孔之间的间距为300
‑
500μm。在通孔2处，可以显露出醛基基片的醛基修饰表面；而在其他位置，醛基基片的醛基修饰表面则被遮盖。由此，在制备生物芯片时，在低密度的醛基基片上的探针可结合的亲水位点间距较大且处于疏水区的包围之中，点样液会自动聚集在亲水位点，不使用专门的点样仪也可以完成芯片的制备过程。
[0025]由此，本申请提供一种低密度生物芯片的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低密度醛基基片，包括：醛基修饰基片，和多孔膜板，所述多孔膜板由疏水材料制成且带有通孔阵列，所述多孔膜板附接于所述醛基修饰基片的醛基修饰表面。2.根据权利要求1所述的低密度醛基基片，其中，所述多孔膜板的通孔孔径为100
‑
300μm，两个通孔之间的间距为300
‑
500μm。3.根据权利要求1所述的低密度醛基基片，其中，所述疏水材料选自金属材料，蜡膜，油纸材料，陶瓷材料，或者树脂材料。4.一种低密度生物芯片的制备方法，包括：S1. 提供具有醛基修饰基片；S2. 将由疏水材料制成的带有通孔阵列的多孔膜板粘附到所述醛基修饰基片的醛基修饰表面上，得到所述低密度醛基基片；S3. 将带有氨基的探针施加到所述通孔中，使所述探针固定在所述基片上，得到所述低密度生物芯片。5.根据权利要求4所述的制备方法，其中，通过粘合剂将所述多孔膜板粘附到所述醛基修饰基片的醛基修饰表面上。6.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：华子昂，刘宝全，竹添，
申请(专利权)人：北京百奥纳芯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：