一种刺梨发酵后制备多糖的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种刺梨发酵后制备多糖的方法及其应用，属于保健食品领域，包括以下步骤：步骤1：将刺梨微沸灭菌；步骤2：刺梨接种微生物菌种发酵；步骤3：刺梨和发酵液的混合物加水进行磨浆；步骤4：将浆液过滤刺梨滤渣和刺梨滤液；步骤5：刺梨滤渣，首先用纤维素酶水解，其次用木瓜蛋白酶水解，然后果胶酶水解，灭酶操作，超声波提取，冷却至室温得到提取液；步骤6：刺梨滤液提取液混合得到混合液，将混合液真空浓缩，再加入乙醇，干燥处理，得到刺梨多糖，本发明专利技术采用混合菌种能够有效的提高发酵效率，进行复合酶酶解，使多种酶组合相互作用，提高了制备得到的刺梨多的分子量和基团活性，通过超声波提取，辅助酶解，提高酶解效率。提高酶解效率。

【技术实现步骤摘要】
一种刺梨发酵后制备多糖的方法及其应用


[0001]本专利技术涉及保健食品领域，具体为一种刺梨发酵后制备多糖的方法及其应用。

技术介绍

[0002]刺梨（Rosaroxbunghii）为蔷薇科多年生落叶灌木缫丝花的果实，又名山王果、刺莓果、佛朗果、茨梨、木梨子，别名刺菠萝、送春归、刺酸梨子、九头鸟、文先果，是滋补健身的营养珍果，是一种稀有的果实。刺梨具有很好的食用价值和药用价值，梨中含有丰富的B族维生素，能保护心脏，减轻疲劳，增强心肌活力，降低血压；所含的配糖体及鞣酸等成分，能祛痰止咳，对咽喉有养护作用；梨有较多糖类物质和多种维生素，易被人体吸收，增进食欲，对肝脏具有保护作用；梨性凉并能清热镇静，常食能使血压恢复正常，改善头晕目眩等症状；食梨能防止动脉粥样硬化，抑制致癌物质亚硝胺的形成，从而防癌抗癌；梨中的果胶含量很高，有助于消化、通利大便。刺梨含有丰富的药理活性成分多糖，一般含量在1.12％、1.43％（干基），杨江涛、杨娟等对刺梨多糖进行了较为全面的研究，包括刺梨多糖的分离纯化、理化性质和生物活性研究，研究表明，刺梨多糖具有增强免疫力作用，具有抗补体活性，具有体外抗氧化、小鼠体内抗氧化、抗缺氧、神经营养活性等作用，此外刺梨多糖还对神经干细胞硫代硫酸钠损伤及谷氨酸损伤有明显的保护作用，刺梨多糖具有多种生物活性，而且对机体毒副作用小，是一种很有开发潜力的天然药物化学成分。
[0003]中国专利（专利号：CN109400734B）公开了一种刺梨多糖制备方法及其应用，该制备方法主要包括原料预处理、提取、脱蛋白、脱色、醇沉和分离纯化；其中，提取是将经预处理的刺梨干粉按料液质量体积比为1:15～1:35与水混合，于温度为55～95℃下浸提；离心分离得到刺梨多糖提取液，减压浓缩到原体积的1/3～1/6，得到刺梨多糖的浓缩液，该专利技术制备的刺梨多糖进行了对作为益生元，抑制α
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葡萄糖甘酶活性，用于肠道疾病和糖尿病的辅助治疗健康食品或药物中；中国专利（专利号：CN109400734B）公开了一种超声提取刺梨果渣的多糖，其制备包括：（1）原料处理：刺梨果榨汁后的刺梨渣干燥至恒重后粉碎制成刺梨果渣粉，低温密封保存；（2）提取：称量刺梨果渣粉，加入蒸馏水浸泡，辅以超声波法提取刺梨果渣多糖，过滤后得提取液；（3）去除脂质：将提取液浓缩，向多糖溶液中加入无水石油醚搅拌震荡使之成乳状，静置使溶液上下分层为止，去除石油醚层；(4)去除蛋白：加入Sevag试剂充分溶解再振荡后离心，去除变性蛋白层，取上清液；(5)醇沉：滤液中加入无水乙醇充分搅拌、静置，收集沉淀；(6)干燥：将沉淀放在干燥滤纸的培养皿中进行干燥，既得刺梨果渣多糖。
[0004]上述公开的制备方法中国专利（专利号：CN109400734B）属于酸碱提取法工艺要求严格,如果超出工艺要求的酸碱度范围可能引起多糖中糖苷键的断裂，中国专利（专利号：CN109400734B）属于超声提取和酸碱提取的选择性结合方法，对多糖的组成和活性有较大的影响，就现有技术多糖提取的方法，酶法提取相对于其他提取方法,具有反应条件温和、产物不易变质、提取效率高、成本低、环保节能、优化有效组分等显著的优势,尤其是酶法与其他提取方法相结合的辅助提取方法,可提高提取效率,并减少提取时间。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于针对现有技术中存在的问题，提供一种通过超声波辅助，利用复合酶酶解制备刺梨多糖的方法与应用。
[0006]为达到上述目的，采用的技术方案为：一种刺梨发酵后制备多糖的方法及其应用，包括以下步骤：步骤1：将刺梨洗净用水浸泡，微沸灭菌后沥干备用；步骤2：步骤（1）得到的刺梨接种微生物菌种，发酵后得到刺梨和发酵液的混合物；步骤3：将步骤（2）得到的刺梨和发酵液的混合物加水进行磨浆，获得均匀的浆液；步骤4：将浆液挤压过滤，分开刺梨滤渣和刺梨滤液；步骤5：将步骤（4）得到的刺梨滤渣，首先用纤维素酶水解，其次用木瓜蛋白酶水解，然后果胶酶水解，接着进行灭酶操作，最后超声波提取，冷却至室温得到提取液；步骤6：将步骤2得到的刺梨滤液与步骤3得到的提取液混合，将混合液真空浓缩至体积为混合液体积的1/4～1/5， 再加入体积为浓缩液3～4倍体积量的乙醇，充分搅拌后静置12h；离心，取下层沉淀，经过喷雾干燥处理，得到刺梨多糖。
[0007]优选地，步骤1所述用水浸泡使用刺梨与水体积比例为1:1.5，浸泡1h，微沸20min。
[0008]优选地，步骤2所述微生物菌种，菌种组合为6
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8份黑曲霉和5
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10份马克斯克鲁维酵母，菌种组合加入量为发酵原料的10
‑
30％。
[0009]优选地，步骤2所述微生物菌种，发酵培养温度为20
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30℃，培养时间为12h。
[0010]优选地，步骤3所述磨浆的操作，加水量为刺梨干重的5倍。
[0011]优选地，步骤5所述纤维素酶水解，纤维素酶质量为所述刺梨滤渣质量1.5%～2.5%，水解时间为2
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4h，所述木瓜蛋白酶水解，木瓜蛋白酶质量为所述刺梨滤渣质量0.3%～0.5%，水解时间为2
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4h，所述果胶酶水解，果胶酶质量为所述刺梨滤渣质量0.5%～1%，水解时间为1
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2h。
[0012]优选地，步骤5所述灭酶操作，灭酶温度为90～95
°
C，灭酶时间为10～15min。
[0013]优选地，步骤5所述超声波提取，超声波频率为20kHz、超声波功率为20W，PH值为5
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7、超声波提取时间10～15min。
[0014]优选地，步骤6所述真空浓缩，真空度控制为0.08
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0.09MPa，温度控制为65
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85
°
C。
[0015]优选地，所述的刺梨多糖在制备保护肝脏防治酒精性损伤药物或保健品中的应用。
[0016]采用上述方案的有益效果为：本专利技术在实施过程中优先微生物发酵方式，采用混合菌种能够有效的提高发酵效率，使刺梨原料得到预提取的效果，提高发酵效率，进一步使刺梨有效成分得到的充分释放。
[0017]本专利技术在实施过程中将微生物预发酵的混合物进行复合酶酶解，利用纤维素酶，木瓜蛋白酶，果胶酶分部进行酶解，使多种酶组合相互作用，反应条件温和、产物不易变质，提高了制备得到的刺梨多的分子量和基团活性。
[0018]本专利技术在实施过程中将通过超声波，辅助酶解，提高酶解效率，提高提取效率,并减少提取时间。
具体实施方式
[0019]下面结合本专利技术的具体实施例，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述。所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部。基于本专利技术中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0020]实施例1一种刺梨发酵后制备多糖的方法及其应用，包括以下步骤：步骤1：取50份刺梨，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种刺梨发酵后制备多糖的方法及其应用，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将刺梨洗净用水浸泡，微沸灭菌后沥干备用；步骤2：步骤（1）得到的刺梨接种微生物菌种，发酵后得到刺梨和发酵液的混合物；步骤3：将步骤（2）得到的刺梨和发酵液的混合物加水进行磨浆，获得均匀的浆液；步骤4：将浆液挤压过滤，分开刺梨滤渣和刺梨滤液；步骤5：将步骤（4）得到的刺梨滤渣，首先用纤维素酶水解，其次用木瓜蛋白酶水解，然后果胶酶水解，接着进行灭酶操作，最后超声波提取，冷却至室温得到提取液；步骤6：将步骤（4）得到的刺梨滤液与步骤（5）得到的提取液混合得到混合液，将混合液真空浓缩至体积为混合液体积的1/4， 再加入体积为浓缩液3倍体积量的乙醇，充分搅拌后静置12h；离心，取下层沉淀，经过喷雾干燥处理，得到刺梨多糖。2.根据权利要求1所述一种刺梨发酵后制备多糖的方法及其应用，其特征在于，步骤1所述用水浸泡使用刺梨与水体积比例为1:1.5，浸泡1h，微沸20min。3.根据权利要求1所述一种刺梨发酵后制备多糖的方法及其应用，其特征在于，步骤2所述微生物菌种，菌种组合为6
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8份黑曲霉和5
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10份马克斯克鲁维酵母，菌种组合加入量为发酵原料的10
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30％。4.根据权利要求1所述一种刺梨发酵后制备多糖的方法及其应用，其特征在于，步骤2所述微生物菌种，发酵培养温度为20
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30℃，培养时间为12h。5.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈慧如，郭其琛，
申请(专利权)人：贵州佳义生物科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：