一种利用HPLC测定氯氮平原料药中杂质含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用HPLC测定氯氮平原料药中杂质含量的方法，属于药物分析技术领域。包括以下步骤：1)配置供试品溶液和对照溶液；2)设置高效液相检测条件：色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂，规格为250mm

【技术实现步骤摘要】
一种利用HPLC测定氯氮平原料药中杂质含量的方法


[0001]本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种利用HPLC测定氯氮平原料药中杂质含量的方法。

技术介绍

[0002]氯氮平作为新型抗精神病药，疗效高，收效快，锥体外系症状轻。作用与吩噻嗪类类似，有较强的抗精神病作用。且其作为广谱神经安定药，起效迅速，多在1周内见效，对其他药无效的病例仍然有效。氯氮平不仅对精神病阳性症状有效，对阴性症状也有一定效果。
[0003]根据氯氮平工艺路线，在制备过程中有起始物料(2，5
‑
二氯硝基苯、邻氨基苯甲酸)，中间体(缩合物、还原物)，终产品可能有工艺杂质A、B、C、D。目前对上述杂质分离测定的相关文献报道极少，因此，提供一种测定氯氮平原料药中杂质含量的方法对于原料制剂的生成和贮存具有重要意义。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的不足，本专利技术所要解决的技术问题是提供一种利用HPLC测定丙硫异烟胺中杂质含量的方法。
[0005]为了解决上述问题，本专利技术采用的技术方案为：
[0006]一种利用HPLC测定氯氮平原料药中杂质含量的方法，包括以下步骤：
[0007]1)配置供试品溶液和对照溶液；
[0008]2)设置高效液相检测条件：色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂，规格为250mm
×
4.6mm，填料粒径为5μm，柱温为35℃，以缓冲盐为流动相A，以甲醇、乙腈混合溶液为流动相B；流速为1.2mL/min进行梯度洗脱；
[0009]3)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；
[0010]所述供试品溶液的制备是方法为：精密称定氯氮平，加稀释剂溶解并稀释成每毫升含氯氮平0.5mg的溶液作为供试品溶液；
[0011]所述对照品溶液的制备方法为：取杂质A、杂质B、杂质C、杂质D及氯氮平对照品各12.5mg，精密称定，置不同50mL量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，作为对照品储备液I，精密量取5mL杂质A和氯氮平对照品储备液I，10mL杂质B和杂质D对照品储备液I，15mL杂质C对照品储备液I，置同一100mE量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，作为对照品储备液II；精密量取2mL对照品储备液II，置50mL量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，作为对照品溶液。
[0012]进一步地，所述的稀释剂为甲醇∶水＝80∶20。
[0013]进一步地，步骤2)中所述的缓冲盐为2g/L磷酸二氢钾，用磷酸调节pH至2.4。
[0014]进一步地，步骤2)中所述的流动相B中甲醇∶乙腈＝45∶55。
[0015]进一步地，步骤2)中，所述梯度洗脱的条件为：0
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30min，流动相A的体积百分比由80％降至10％，流动相B的体积百分比由20％升至90％。
[0016]进一步地，步骤3)中，所述供试品溶液与对照溶液的进样量分别为20μL。
[0017]进一步地，步骤3)中，所述液相色谱仪的紫外检测器的的检测波长为257nm。
[0018]进一步地，供试品溶液色谱图中如有与对照品溶液保留时间一致的峰，扣除空白溶剂峰，按外标法以峰面积计算，杂质A不得过0.1％，杂质B及杂质D不得过0.2％，杂质C不得过0.3％，未知杂质不得过0.1％，总杂质和不得大于0.6％，供试品溶液色谱图中，如有小于对照品溶液中氯氮平峰面积0.5倍的杂质，则不计。
[0019]有益效果：与现行检测标准《USP42》收载相比，采用本申请方法，在257nm检测波长下，氯氮平与各杂质之间能很好分离；溶剂峰不干扰主成分及杂质的检测；且各条件下破坏样品经峰纯度检测，光谱纯度均大于990，各条件下破坏产生的杂质均能与主峰很好地分离，有关物质检测专属性良好；同时对色谱条件参数发生微小变化时对氯氮平有关物质杂质分离与检查结果没有影响，耐用性良好；使用该高效液相色谱法能够快速、有效、准确和可靠的分离检测出氯氮平原料药中有关物质，有利于提高氯氮平原料药的产品质量，提高患者用药安全性。
附图说明
[0020]图1为使用不同方法检测氯氮平原料药有关物质的色谱图，其中，图1a为现行标准方法空白图谱；图1b现行标准方法对照品溶液图谱；图1c为申请方法空白图谱；图1d申请方法对照品溶液图谱；
[0021]图2为本专利技术测定氯氮平原料药中杂质含量的色谱图，图2a为系统适用性溶液图谱；图2b为供试品溶液图谱；
[0022]图3为破坏性试验中测试色谱图，其中，图3a为氯氮平原料药
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酸破坏图谱；图3b为氯氮平原料药
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碱破坏图谱；图3c为氯氮平原料药
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氧化图谱；图3d为氯氮平原料药
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高温破坏图谱；图3e为氯氮平原料药
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光照；图3f为氯氮平原料药
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破坏前图谱；
[0023]图4为氯氮平原料药
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对照品溶液稳定性色谱图，其中，图4a为0H氯氮平原料药
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对照品溶液稳定性图谱；图4b为39H氯氮平原料药
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对照品溶液稳定性图谱；
[0024]图5为氯氮平原料药
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供试品溶液稳定性色谱图，其中，图5a为0H氯氮平原料药
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供试品溶液稳定性图谱；图5b为39H氯氮平原料药
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供试品溶液稳定性图谱；
[0025]图6为氯氮平原料药
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系统适用性溶液耐用性色谱图，其中，图6a为氯氮平原料药
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耐用性
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正常条件色谱图；图6b为氯氮平原料药
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耐用性
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不同流速(1.3mL/min)色谱图；图6c为氯氮平原料药
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耐用性
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不同流速(1.1mL/min)色谱图；图6d为氯氮平原料药
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耐用性
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柱温(27℃)色谱图；图6e为氯氮平原料药
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耐用性
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柱温(33℃)色谱图色谱图；图6f氯氮平原料药
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耐用性
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不同流动相B比例(乙腈∶甲醇＝52∶48)色谱图；图6g为氯氮平原料药
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耐用性
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不流动相B比例(乙腈∶甲醇＝58∶42)色谱图；图6h为氯氮平原料药
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耐用性
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不同色谱柱(WeLchXS
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C18)色谱图；图6i为氯氮平原料药
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耐用性
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不同色谱柱(AgiLent Extend
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C18)色谱图。
具体实施方式
[0026]下面结合具体实施例进一步说明本专利技术，但这些实施例并不用来限制本专利技术。
[0027]实施例1
[0028]氯氮平原料生产工艺过程中有已知杂质有起始物料(邻氨基苯甲酸、2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用HPLC测定氯氮平原料药中杂质含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)配置供试品溶液和对照溶液；2)设置高效液相检测条件：色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂，规格为250mm
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4.6mm，填料粒径为5μm，柱温为35℃，以缓冲盐为流动相A，以甲醇、乙腈混合溶液为流动相B；流速为1.2mL/min进行梯度洗脱；3)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；所述供试品溶液的制备是方法为：精密称定氯氮平，加稀释剂溶解并稀释成每毫升含氯氮平0.5mg的溶液作为供试品溶液；所述对照品溶液的制备方法为：取杂质A、杂质B、杂质C、杂质D及氯氮平对照品各12.5mg，精密称定，置不同50mL量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，作为对照品储备液I，精密量取5mL杂质A和氯氮平对照品储备液I，10mL杂质B和杂质D对照品储备液I，15mL杂质C对照品储备液I，置同一100mL量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，作为对照品储备液II；精密量取2mL对照品储备液II，置50mL量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，作为对照品溶液。2.根据权利要求1所述的利用HPLC测定氯氮平原料药中杂质含量的方法，其特征在于，所述的稀释剂为甲醇∶水＝80∶20。3.根据权利要求1所述的利用HPLC测定氯氮平原料药中杂...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐伟，高政，左帅，顾丽，周菊，魏征，吴卫征，
申请(专利权)人：江苏慈星药业有限公司，
类型：发明
国别省市：