一种乙酰透明质酸寡肽及其制备与应用方法技术

本发明专利技术涉及一种乙酰透明质酸寡肽及其制备与应用方法，解决了现有技术乙酰透明质酸和寡肽类物质结构不稳定、功能型化妆品中的乙酰透明质酸和寡肽需分别添加、易被酶解、化学稳定性差、易受环境影响而失活和作用时间短的技术问题。本发明专利技术提供了一种祛皱抗衰老的乙酰透明质酸寡肽的制备方法，包括以下步骤：将乙酰透明质酸与寡肽通过共价键形式进行连接：寡肽序列中Lys侧链的ε

【技术实现步骤摘要】
一种乙酰透明质酸寡肽及其制备与应用方法
[0001]本案是基于2019年10月11日提交的中国专利申请号为2019109634683，名称为一种乙酰透明质酸寡肽及其制备与应用方法的分案申请。


[0002]本专利技术属于功能型化妆品
，特别涉及一种乙酰透明质酸寡肽及其制备与应用方法。

技术介绍

[0003]功能型化妆品的研制现已成为当今化妆品行业开发的主题，其中添加的生物活性成分对细胞的生长和代谢具有重要的调控作用，例如：多肽、多糖等，能有效的应对皮肤损伤和促进皮肤修复。多肽具有特殊的生物活性，对机体的生长、发育和代谢起重要的调节作用，其特殊的生理活性在肌肤老化和护理过程中起重要的调控作用，被广泛应于美容护肤品当中。美容多肽主要是由两个至十个氨基酸组成的小分子寡肽，可促进细胞生长、分化、重建与修复，从根本上改善和修复皮肤损伤，具有显著的祛皱、抗衰老、美白和祛斑等功效，现已成为功能型化妆品的重要组分，并且具有极高的使用安全性，例如：三肽
‑
1能够刺激胶原蛋白、弹性蛋白、纤维连接蛋白以及层粘连蛋白的生成，恢复皮肤弹性和紧致性，具有抗炎、抗氧化、祛皱、抗衰老的作用，可用于头发和护肤品的生产；SIKVAV寡肽和IKVAV寡肽可促进细胞黏连、改善皮肤柔韧性预防皮肤老化等。透明质酸(Hyaluronic acid，HA)是一种糖胺聚糖，具有特殊的保水作用，是目前发现的自然界中保湿性最好的物质，可以锁住自身重量1000倍的水分，1％的溶液即可形成凝胶，防止皮肤水分经表皮流失，被称为理想的天然保湿因子，同时也是非常好的的透皮吸收促进剂。透明质酸独特的分子结构和理化性质在机体内具有多种重要的生理学功能，包括预防、修复皮肤损伤和促进创伤愈合等，被广泛用于美容护肤品中的生产。其中小分子透明质酸能够深入真皮，清除氧自由基，改善皮肤营养代谢，促进表皮细胞的增殖和分化，增加皮肤弹性、祛皱和防止衰老；大分子透明质酸能够在皮肤表层形成一层保护膜，能够锁住皮肤内水分、阻隔外界的不良环境因素对皮肤造成的损伤。乙酰透明质酸(Acetylated hyaluronic acid，AcHA)是透明质酸经乙酰化修饰的衍生物，是一种新型、高效的柔肤因子，具有亲水性和亲脂性，可高度软化角质层，对皮肤有很强的亲和力，保水能力超过透明质酸的2倍，其护肤效果优于透明质酸。含有寡肽或透明质酸的功能型化妆品具有安全、稳定、易吸收和效果佳的优点，受到广大消费者的青睐。同时功能型化妆品的产品附加值高、市场空间大，大大的增加了化妆品制造商的利润，越来越多的企业和研究机构投身至功能型化妆品的研究开发。
[0004]专利CN106109296B公开了一种含有透明质酸钠、乙酰透明质酸钠的保湿精华水；CN104740643A公开了一种稳定的负载生物活性蛋白或多肽的透明质酸溶液，需分别添加透明质酸与生物活性蛋白或多肽；CN109157471A公开了一种分别添加透明质酸与寡肽的具有修复保湿功能的护肤组物；CN108904317A公开了一种祛皱的多肽组合方法。然而这些专利中均是将透明质酸与多肽单独或组合加至产品当中，并未提及同时兼具两种活性成分功能
的透明质酸寡肽、以及它在化妆用组合物中的研制和应用。单一活性成分对细胞作用有限，通过两种活性成分组合使用、或者使用同时兼具两种活性成分功能的组分显然能够取得更好效果。然而人体的透明质酸酶和蛋白酶能够水解透明质酸和寡肽，因此通过皮肤渗透吸收的、以及皮肤表面的透明质酸和寡肽易被酶解失活，同时由于多肽类物质的结构不稳定、易受外界不良环境因素影响而变性、失活，导致它们的活性作用时间短，因而需根据成分特性选择合适的剂型、保护剂，提高稳定性，延长其功效。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的就是为了克服上述现有技术的不足，针对乙酰透明质酸和寡肽类物质结构不稳定的缺点，提供一种兼具乙酰透明质酸和寡肽的功能活性、且化学性质稳定、不易受环境影响、祛皱抗衰老的效果显著且作用时间长的乙酰透明质酸寡肽及其制备与应用方法。
[0006]本专利技术采用的技术方案如下：
[0007]一种祛皱抗衰老的乙酰透明质酸寡肽，乙酰透明质酸寡肽的结构分别为具有式V、式VI和式VII结构的糖肽：
[0008][0009]一种祛皱抗衰老的乙酰透明质酸寡肽的制备方法，包括以下步骤：将乙酰透明质酸与寡肽通过共价键形式进行连接：寡肽序列中Lys侧链的ε
‑
NH2与乙酰透明质酸的
‑
COOH通过酰胺缩合反应生成酰胺键进行连接，生成乙酰透明质酸寡肽；
[0010]乙酰透明质酸的结构为式I的结构：
[0011][0012]式I；
[0013]寡肽的结构分别为式II、式III和式IV的结构：
[0014][0015]优选的，包括以下步骤：
[0016](1)将乙酰透明质酸制成乙酰透明质酸
‑
TBA；
[0017](2)缩合反应：
[0018]①
用固相合成法：在活化体系和DIEA存在下，以CTC树脂为固相合成的载体，分别按照寡肽的式II、式III和式IV结构的氨基酸序列从C端至N端依次缩合经活化的Fmoc
‑
氨基酸，进行肽树脂的合成，分别合成寡肽式II、式III和式IV结构的三种N端氨基含有Fmoc保护基的肽树脂；所述合成寡肽的结构式II的肽树脂依次缩合的Fmoc
‑
氨基酸顺序为：Fmoc
‑
Val
‑
OH、Fmoc
‑
Ala
‑
OH、Fmoc
‑
Val
‑
OH、Fmoc
‑
Lys(Dde)
‑
OH、Fmoc
‑
Ile
‑
OH、Fmoc
‑
Ser
‑
OH；所述合成寡肽的结构式III肽树脂依次缩合的Fmoc
‑
氨基酸顺序为：Fmoc
‑
Val
‑
OH、Fmoc
‑
Ala
‑
OH、Fmoc
‑
Val
‑
OH、Fmoc
‑
Lys(Dde)
‑
OH、Fmoc
‑
Ile
‑
OH；所述合成寡肽的结构式IV肽树脂依次缩合的Fmoc
‑
氨基酸顺序为：Fmoc
‑
Lys(Dde)
‑
OH、Fmoc
‑
His
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH；
[0019]②
脱除步骤
①
中制得的含有Fmoc保护基的肽树脂中Lys侧链ε
‑
NH2的保护基Dde、裂解肽树脂，分别得到寡肽式II、式III和式IV结构的三种N端氨基含有Fmoc保护基的寡肽粗肽；...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乙酰透明质酸寡肽，其特征在于，所述乙酰透明质酸寡肽的结构为具有式VII结构的糖肽：2.根据权利要求1所述的一种乙酰透明质酸寡肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将乙酰透明质酸与寡肽通过共价键形式进行连接：所述寡肽序列中Lys侧链的ε
‑
NH2与乙酰透明质酸的
‑
COOH通过酰胺缩合反应生成酰胺键进行连接，生成乙酰透明质酸寡肽；所述乙酰透明质酸的结构为式I的结构：所述寡肽的结构为式IV的结构：3.根据权利要求2所述的一种乙酰透明质酸寡肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将所述乙酰透明质酸制成乙酰透明质酸
‑
TBA；(2)缩合反应：
①
用固相合成法：在活化体系和DIEA存在下，以CTC树脂为固相合成的载体，按照寡肽的式IV结构的氨基酸序列从C端至N端依次缩合经活化的Fmoc
‑
氨基酸，进行肽树脂的合成，合成寡肽式IV结构的N端氨基含有Fmoc保护基的肽树脂；所述合成寡肽的结构式IV的肽树脂依次缩合的Fmoc
‑
氨基酸顺序为：Fmoc
‑
Lys(Dde)
‑
OH、Fmoc
‑
His
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH；
②
脱除步骤
①
中制得的含有Fmoc保护基的肽树脂中Lys侧链ε
‑
NH2的保护基Dde、裂解肽树脂，得到寡肽式IV结构的N端氨基含有Fmoc保护基的寡肽粗肽；
③
对步骤
②
中制得的含有Fmoc保护基的寡肽粗肽进行纯化、经冻干后，得到寡肽式IV结构的N端氨基含有Fmoc保护基的寡肽纯品；(3)将步骤(1)中制得的乙酰透明质酸
‑
TBA经活化后，与步骤(2)中制得的寡肽纯品进行缩合反应；所述寡肽序列中Lys侧链的ε
‑
NH2与乙酰透明质酸的
‑
COOH通过酰胺缩合反应生成酰胺键进行连接，生成产物乙酰透明质酸TBA寡肽
‑
Fmoc；(4)脱除步骤(3)中制得的产物中寡肽N端氨基的Fmoc
‑
保护基，得产物乙酰透明质酸TBA寡肽；(5)换盐：通过截留分子量500Da的超滤膜对步骤(4)中制得的产物乙酰透明质酸TBA寡肽进行超滤...

【专利技术属性】
技术研发人员：姬胜利，殷金岗，
申请(专利权)人：润辉生物技术威海有限公司，
类型：发明
国别省市：