一种高纯度GHK-Cu的合成方法技术

本发明专利技术涉及一种高纯度GHK

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度GHK
‑
Cu的合成方法


[0001]本专利技术涉及甘氨酰组氨酰赖氨酸铜的合成，特别是涉及一种高纯度的甘氨酰组氨酰赖氨酸铜的合成方法，尤其是涉及一种甘氨酰组氨酰赖氨酸铜结晶的合成方法。

技术介绍

[0002]甘氨酰组氨酰赖氨酸(GHK)是从人血浆中分离得到的一种内源性胶原三肽，它和2价铜离子有很强的亲和力，能自发地与其形成络合物GHK
‑
Cu。GHK
‑
Cu的组成为：甘氨酸
‑
组氨酸
‑
赖氨酸
‑
铜(glycyl
‑
L
‑
histidyl
‑
L
‑
lysine
–
copper)，铜离子Cu
2+
并不是铜金属的黄色，而是在水溶液中呈现蓝色，所以GHK
‑
Cu又称为蓝铜胜肽。根据目前的研究结果，其功能主要包括：有效促进胶原蛋白的产生，增加血管生长和抗氧化能力，并刺激葡糖胺聚糖产生，帮助皮肤恢复自我修补的能力；促使上皮细胞的生长和分化，从而加快创面的愈合。在皮肤组织的作用上，有抗氧化、促进胶原增生、协助伤口愈合的功能。科学家发现铜离子的除皱作用，主要是借着氨基酸复合物(peptide)的载体，使具有生化效果的二价铜离子成分进入细胞，发挥生理功能。但是如何更加高效地合成高纯度的GHK
‑
Cu是一个难题。
[0003]申请号为201810868124.X的中国申请公开了一种将GHK粗肽经制备纯化后冻干得到的产物直接和醋酸铜按照1:1或者2:1作用生成GHK
‑
Cu的方法，这种方法的缺点是使用醋酸铜反应，其中的醋酸根离子含量不好控制，影响产量，且这种方法操作比较繁琐，成本较高，也不适用于大量生产。
[0004]申请号为201711221991.6的中国申请公开了一种低成本合成GHK醋酸盐的方法，该方法将Tit
‑
Gly
‑
His(Tit)
‑
Lys(Trt)
‑
OH在醋酸和三异丙基硅烷中脱保护，生成GHK醋酸盐的方法。该方法虽然可以降低生产GHK醋酸盐的成本，但是在合成GHK
‑
Cu中醋酸根离子过多，会导致GHK
‑
Cu无法结晶析出。
[0005]申请号为201310751827.1的中国申请公开了一种GHK三肽的合成方法，该方法具体是合成Boc
‑
Gly
‑
His(Boc)
‑
LYS(Ac)
‑
OH后用三氟乙酸脱掉保护，得到GHK的三氟乙酸盐，然后经反相色谱、离子交换色谱生成GHK醋酸盐。该方法的缺点是脱保护的三氟乙酸盐需要经反相色谱纯化除去产物中三氟乙酸，再经过离子交换色谱才能转换成醋酸盐，这种方法成本较高，且不适宜应用于大规模生产。
[0006]现有的GHK
‑
Cu生产技术基本上是利用GHK的醋酸盐与醋酸铜室温下反应得到的产物，这种方法由于反应体系中醋酸根含量较多，醋酸离子含量不好控制，容易影响GHK
‑
Cu的产率。
[0007]由上可知，现有的GHK产品合成GHK
‑
Cu的过程中，由于GHK产品中携带的盐带来的阴离子(如醋酸根、三氟乙酸根等)的干扰导致难以高效地合成高纯度的GHK
‑
Cu，尤其是GHK
‑
Cu结晶。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的是提供一种高纯度甘氨酰组氨酰赖氨酸铜GHK
‑
Cu的合成方法，该方
法利用阴离子交换树脂除去GHK产品(如GHK的醋酸盐、GHK的三氟乙酸盐等)中由盐带来的阴离子，然后采用重结晶的方法来高效地合成纯度较高且结晶颗粒饱满的GHK
‑
Cu产品。
[0009]为此，本专利技术提供一种高纯度GHK
‑
Cu的合成方法，包括以下步骤：
[0010]S1、在GHK产品的溶液中加入铜盐，搅拌均匀后得到混合溶液，其中，所述GHK产品中含有副产物阴离子；
[0011]S2、将混合溶液加入到阴离子交换树脂中反应，然后过滤得到反应后的混合溶液；
[0012]S3、将反应后的混合溶液浓缩后，加入乙醇水溶液加热到40℃～70℃超声溶解，得到再溶解溶液；
[0013]S4、将再溶解溶液降温，得到GHK
‑
Cu晶体。
[0014]步骤S1中，优选的是，所述铜盐选自醋酸铜、氯化铜、硫酸铜和碳酸铜中的至少一种，进一步优选的是，所述铜盐为醋酸铜和/或氯化铜。
[0015]步骤S1中，优选的是，所述GHK产品的溶液中的GHK与所述铜盐的摩尔比为1～2:1。
[0016]步骤S1中，所述副产物阴离子为三氟乙酸根、醋酸根、盐酸根、磷酸根和枸橼酸根中的至少一种的阴离子，较为常见的所述副产物阴离子为三氟乙酸根、醋酸根和盐酸根中的至少一种的阴离子。
[0017]步骤S1中，优选的是，所述GHK产品的溶液中GHK的浓度为50mg/ml
‑
500mg/ml，进一步优选的是，100
±
20mg/ml。
[0018]步骤S2中，优选的是，所述阴离子交换树脂为强碱型阴离子交换树脂。
[0019]步骤S2中，优选的是，所述阴离子交换树脂已经过预处理，所述预处理的步骤包括：将阴离子交换树脂碱洗后，再洗涤至中性。
[0020]步骤S3中，优选的是，所述浓缩为将混合溶液中50wt％
‑
100wt％的溶剂通过减压蒸发的方式除去。
[0021]步骤S3中，优选的是，所述乙醇水溶液中乙醇的浓度为65体积％
‑
85体积％，优选78体积％。
[0022]步骤S3中，优选的是，所述乙醇水溶液加热到55℃。
[0023]步骤S4中，优选的是，所述再溶解溶液降温至≤40℃，所述降温为分段降温，具体包括：先降温至20
‑
30℃，再降温至2
‑
8℃。
[0024]本专利技术的有益效果如下：
[0025](1)本专利技术的方法利用阴离子交换树脂对GHK产品进行除盐的阴离子工作，去除阴离子后有利于铜盐与GHK络合合成GHK
‑
Cu的结晶，进一步结合重结晶的原理，乙醇水溶液加热溶解再冷却而得到GHK
‑
Cu结晶体，因此，本专利技术方法所得GHK
‑
Cu产品纯度较高、收率较高、结晶方便，同时本专利技术操作简单，成本低，效率高。
[0026](2)本专利技术的方法扩宽了GHK产品的来源，可以是GHK的醋酸盐，也可以是GHK的三氟乙酸盐等，并且，GHK产品中阴离子的含量不再影响后续GHK
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Cu的收率，有利于该方法进一步降低成本和工业化。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高纯度GHK
‑
Cu的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、在GHK产品的溶液中加入铜盐，搅拌均匀后得到混合溶液，其中，所述GHK产品中含有副产物阴离子；S2、将混合溶液加入到阴离子交换树脂中反应，然后过滤得到反应后的混合溶液；S3、将反应后的混合溶液浓缩后，加入乙醇水溶液加热到40℃～70℃超声溶解，得到再溶解溶液；S4、将再溶解溶液降温，得到GHK
‑
Cu晶体。2.根据权利要求1所述的高纯度GHK
‑
Cu的合成方法，其特征在于，所述铜盐选自醋酸铜、氯化铜、硫酸铜和碳酸铜中的至少一种，进一步优选的是，所述铜盐为醋酸铜和/或氯化铜。3.根据权利要求1所述的高纯度GHK
‑
Cu的合成方法，其特征在于，所述GHK产品的溶液中的GHK与所述铜盐的摩尔比为1～2:1。4.根据权利要求1所述的高纯度GHK
‑
Cu的合成方法，其特征在于，所述副产物阴离子为三氟乙酸根、醋酸根、盐酸根、磷酸根和枸橼酸根中的至少一种的阴离子。5.根据权利要求1所述的高纯度GHK
‑
Cu的合成方法，其特征在于，所述GHK产品的溶液中GHK的浓度为50mg/ml

【专利技术属性】
技术研发人员：唐青林，谢肖萍，
申请(专利权)人：深圳市图微安创科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：