一种同时测定白酒中多种难挥发性呈味物质的方法技术

本发明专利技术属于白酒分析检测技术领域，特别涉及一种同时测定白酒中多种难挥发性呈味物质的方法。包括如下步骤：(1)取样；(2)离心；(3)过滤；(4)采用超高效液相色谱串联高分辨质谱技术对过滤后的白酒样品进行分析；所用的色谱柱为：HypersilGoldC18柱(150mm

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定白酒中多种难挥发性呈味物质的方法


[0001]本专利技术属于白酒分析检测
，特别涉及一种同时测定白酒中多种难挥发性呈味物质的方法。

技术介绍

[0002]白酒风味是决定其品质的重要因素，目前主要针对白酒中挥发性香气物质的研究较多。但白酒作为固态发酵蒸馏的产物，同样存在某些非挥发性物质。据文献报道，非挥发性物质的存在对于白酒的风格特征同样产生重要的作用，
①
作为潜在的重要呈味物质，构成了白酒口感的丰富性和复杂性；
②
与挥发性物质产生相互作用，调节挥发性物质的挥发性能，改变并协调白酒的香气结构，如对放香强度与香气持久性产生调节作用；
③
独特和重要的生物活性功能和效果。
[0003]有机酸类物质作为白酒的重要风味物质，其中有机酸的种类和含量不仅影响白酒发酵过程微生物的生长与繁殖，亦影响酯类香气物质的合成。但在白酒生产中关注较多的难挥发性有机酸是酒体或酿造过程中以乳酸、乙酸、丁酸、己酸为主的比例及量化关系，通常以气相色谱或气相色谱质谱联用技术检测为主；同样，其他难挥发性有机酸因难以被气化，并且即使使用酯化衍生处理，有些亦无法被有效解析。因此，现阶段主要采用高效液相色谱法及离子色谱法进行白酒中难挥发性有机酸的定性定量分析。
[0004]白酒中氨基酸对其呈味亦有重要影响，白酒中生物胺与氨基酸也有一定联系，生物胺作为一类含氮的脂肪族、芳香族或杂环类化合物，主要通过氨基酸的脱羧或醛与酮的胺化及转氨基作用产生，对动植物和微生物活性细胞有重要的生理作用。目前，针对白酒中氨基酸分析多采用氨基酸自动分析仪进行检测。
[0005]目前，尚未建立一种能同时测定白酒中难挥发性有机酸、氨基酸、生物胺等多种呈味物质的检测方法。

技术实现思路

[0006]本专利技术目的在于提供一种可以同时检测白酒中多种难挥发性呈味物质的方法。
[0007]一方面，本专利技术提供了一种同时测定白酒中多种难挥发性呈味物质的方法，其特征在于，包括如下步骤：
[0008](1)取样；
[0009](2)离心；
[0010](3)过滤；
[0011](4)采用超高效液相色谱串联高分辨质谱技术对过滤后的白酒样品进行分析；所述超高效液相色谱所用的色谱柱为：Hypersil Gold C18柱(150mm
×
2.1mm，1.9μm)；
[0012]其中，所述方法不包括采用氮吹或者采用其他方式除乙醇步骤；所述呈味物质包括有机酸、生物胺、氨基酸中的至少一种。
[0013]在现有技术公开的对白酒样品中的组分进行检测分析的方法中，大多数会采取氮
吹或者采取其他方式去除白酒样品中乙醇对检测结果的干扰，以达到对白酒样品中各组分更好的检测效果，而本专利技术在力求提供一种前处理方法简单、快捷，且能够实现白酒样品中多种痕量呈味物质及衍生产物的快速、精准同时检测时发现，当选择对白酒样品的前处理方法选择包括采用氮吹或者其他方式除乙醇步骤，会对白酒样品中的目标呈味物质的检测有不同程度的负面影响，而当不进行氮吹或者不进行其他方式除乙醇的步骤，而是直接对白酒样品进行高速离心、膜过滤的前处理方法时，却可以更好的实现白酒样品中的多种痕量呈味物质的检测分析。
[0014]而对于本专利技术所构建的检测方法中，当选择Hypersil Gold C18柱(150mm
×
2.1mm， 1.9μm)作为检测分析用的色谱柱时，才可以更好的实现白酒样品中待测组分的检测分析。
[0015]在一些实施方案中，所述步骤(1)中的取样体积为：2
‑
3ml。
[0016]在一些实施方案中，取样后置于离心管内。
[0017]在一些实施方案中，所述步骤(2)中，所述离心包括：对步骤(1)中所取白酒样品进行高速离心；所述离心的条件为：在9000～12000rpm离心5～15min；优选地，所述离心的条件为：10000rpm离心10min。
[0018]在一些实施方案中，所述步骤(3)中，所述过滤包括：通过0.22μm水系PES针筒式过滤膜对离心后的白酒样品进行过滤。
[0019]在一些实施方案中，所述步骤(4)中，所述超高效液相色谱的条件为：色谱柱柱温为 30～50℃，进样量为1～5μL，流速0.1～0.3mL/min，分析时间为16～19min，采用梯度洗脱模式；优选地，所述超高效液相色谱条件为：色谱柱柱温为40℃，进样量为2μL，流速为 0.2mL/min，分析时间为16min，采用梯度洗脱模式。
[0020]在一些实施方案中，采用0.1％甲酸水溶液(A)和甲醇(B)作为流动相。
[0021]在一些实施方案中，采用如下梯度洗脱程序进行洗脱：
[0022][0023][0024]在一些实施方案中，所述步骤(4)中，高分辨质谱的离子源条件为：采用加热电喷雾电离源；鞘气流量：20～50arb；辅助气流量：5～20arb；喷雾电压：
±
3.2kV；离子源温度：330
‑
370℃；毛细管温度：300
‑
350℃。
[0025]在一些实施方案中，高分辨质谱仪离子源条件为：采用加热电喷雾电离源；鞘气流量： 40arb；辅助气流量：10arb；喷雾电压：
±
3.2kV；离子源温度：350℃；毛细管温度： 320
℃。
[0026]在一些实施方案中，所述步骤(4)中，高分辨质谱的扫描条件为：采用全扫描/数据依赖性二级扫描的正负离子同时扫描采集模式；一级扫描范围为m/z 50.0～400.0Da；一级扫描分辨率：70000；AGC target：1e6；Maximum IT：30ms；二级扫描分辨率：17500；AGCtarget：5e4；Maximum IT：50ms；归一化碰撞能量：10、20、30eV。
[0027]在一些实施方案中，所述有机酸包括：L
‑
酒石酸、L
‑
苹果酸、没食子酸、阿魏酸、儿茶素、咖啡酸、木犀草素、绿原酸、对香豆酸、2,3
‑
二羟基丙酸、柠檬酸中的至少一种。
[0028]在一些实施方案中，所述氨基酸包括：L
‑
丙氨酸、L
‑
精氨酸、L
‑
胱氨酸、L
‑
天冬氨酸、 L
‑
谷氨酸、甘氨酸、L
‑
组氨酸、L
‑
赖氨酸、L
‑
甲硫氨酸、L
‑
苯丙氨酸、L
‑
脯氨酸、L
‑
丝氨酸、L
‑
苏氨酸、L
‑
酪氨酸、L
‑
缬氨酸、L
‑
瓜氨酸、L
‑
色氨酸中的至少一种。
[0029]在一些实施方案中，所述生物胺包括：β
‑
苯乙胺、酪胺、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时测定白酒中多种难挥发性呈味物质的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取样；(2)离心；(3)过滤；(4)采用超高效液相色谱串联高分辨质谱技术对过滤后的白酒样品进行分析；所述超高效液相色谱所用的色谱柱为：Hypersil Gold C18柱(150mm
×
2.1mm，1.9μm)；其中，所述方法不包括采用氮吹或者采用其他方式除乙醇步骤；所述呈味物质包括有机酸、生物胺、氨基酸中的至少一种。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的取样体积为：2
‑
3ml；优选地，取样后置于离心管内。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述离心包括：对步骤(1)中所取白酒样品进行高速离心；所述离心的条件为：在9000～12000rpm离心5～15min；优选地，所述离心的条件为：10000rpm离心10min。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，所述过滤包括：通过0.22μm水系PES针筒式过滤膜对离心后的白酒样品进行过滤。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，所述超高效液相色谱的条件为：色谱柱柱温为30～50℃，进样量为1～5μL，流速0.1～0.3mL/min，分析时间为16～19min，采用梯度洗脱模式；优选地，所述超高效液相色谱条件为：色谱柱柱温为40℃，进样量为2μL，流速为0.2mL/min，分析时间为16min，采用梯度洗脱模式；优选地，采用0.1％甲酸水溶液(A)和甲醇(B)作为流动相；优选地，采用如下梯度洗脱程序进行洗脱：6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，高分辨质谱的离子源条件为：采用加热电喷雾电离源；鞘气流量：20～50arb；辅助气流量：5～20arb；喷雾电压：
±
3.2kV；离子源温度：330
‑
370℃；毛细管温度：300
‑
350℃；优选地，高分辨质谱仪离子源条件为：采用加热电喷雾电离源；鞘气流量：40arb；辅助气流量：10arb；喷雾电压：
±
3.2kV；离子源温度：350℃；毛细管温度：320℃。7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，高分辨质谱的扫描条件为：采用全扫描/数据依赖性二级扫描的正负离子同时扫描采集模式；一级扫描范围为m/z50.0
～400.0Da；一级扫描分辨率：70000；AGC target：1e6；Maximum IT：30ms；二级扫描分辨率：17500；AGC target：5e4；Maximum IT...

【专利技术属性】
技术研发人员：程平言，胡峰，杨军林，田栋伟，张健，尤小龙，蒋力力，尹艳艳，陈明学，
申请(专利权)人：贵州茅台酒厂集团习酒有限责任公司，
类型：发明
国别省市：